β-呋喃果糖苷酶单克隆抗体的研制及其在蜂蜜掺假ELISA中的应用
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-20页 |
| 1 蜂蜜的组成及功效 | 第11页 |
| 2 掺入植物糖类造假蜂蜜的鉴别方法 | 第11-14页 |
| ·一些简单的辨别方法 | 第12页 |
| ·碳同位素比率分析法 | 第12页 |
| ·高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法 | 第12-13页 |
| ·双果糖酐检测法 | 第13页 |
| ·高效液相色谱法 | 第13页 |
| ·近红外光谱法 | 第13页 |
| ·显微镜检测法 | 第13页 |
| ·旋光法 | 第13-14页 |
| ·高效毛细管电泳 | 第14页 |
| 3 蜂蜜的食品安全国家标准 | 第14-15页 |
| 4 蔗糖酶概述 | 第15-19页 |
| ·蔗糖酶的来源 | 第15页 |
| ·酶学性质 | 第15-16页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的作用方式及其机理 | 第16-17页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶在生产中的应用 | 第17-18页 |
| ·酶活力的测定 | 第18-19页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 β-呋喃果糖苷酶纯度及蛋白浓度的测定 | 第20-24页 |
| 1 材料与方法 | 第20-22页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·仪器与设备 | 第20页 |
| ·主要溶液系统 | 第20-21页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶纯度的测定 | 第21页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶蛋白浓度测定 | 第21-22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-23页 |
| ·SDS-PAGE结果 | 第22页 |
| ·酶蛋白质浓度 | 第22-23页 |
| 3 讨论 | 第23-24页 |
| 第三章 β-呋喃果糖苷酶抗体的研制及鉴定 | 第24-37页 |
| 1 材料与方法 | 第24-32页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·仪器与耗材 | 第24页 |
| ·实验动物和生物材料 | 第24-25页 |
| ·主要溶液系统 | 第25-26页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第26-29页 |
| ·单克隆抗体性质的鉴定 | 第29-30页 |
| ·ELISA检测方法的建立 | 第30-32页 |
| 2 结果及分析 | 第32-35页 |
| ·包被抗原工作浓度、封闭液以及阳性血清效价的确定 | 第32页 |
| ·单克隆抗体细胞株的建立及其稳定性 | 第32页 |
| ·腹水的制备 | 第32页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第32-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| ·单抗的制备 | 第35-36页 |
| ·抗体的鉴定 | 第36-37页 |
| 第四章 双夹心应用ELISA方法的建立和应用 | 第37-44页 |
| 1 材料和方法 | 第37-39页 |
| ·实验样品 | 第37页 |
| ·试剂和仪器 | 第37页 |
| ·双抗夹心法的建立 | 第37-38页 |
| ·包被抗体的选择 | 第38页 |
| ·双抗夹心ELISA反应条件的选择 | 第38页 |
| ·双抗夹心ELISA特异性鉴定 | 第38页 |
| ·样品基质干扰检测 | 第38-39页 |
| ·敏感性试验 | 第39页 |
| ·样品添加回收试验 | 第39页 |
| 2 结果及分析 | 第39-42页 |
| ·包被抗体的选择 | 第39-40页 |
| ·双抗夹心ELISA反应条件的选择 | 第40页 |
| ·双抗夹心ELISA特异性的鉴定 | 第40页 |
| ·样品机制干扰检测结果 | 第40-41页 |
| ·敏感性试验结果 | 第41页 |
| ·标准曲线的确定 | 第41-42页 |
| ·添加回收率及重复性 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
