家蚕内皮单核细胞激活多肽Ⅱ基因的克隆与原核表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-11页 |
| ·内皮单核细胞激活多肽Ⅱ的研究进展 | 第8-11页 |
| ·内皮单核细胞激活多肽Ⅱ的结构与特性 | 第8-9页 |
| ·内皮单核细胞激活多肽Ⅱ的调控 | 第9-10页 |
| ·内皮单核细胞激活多肽Ⅱ的功能 | 第10-11页 |
| 2 引言 | 第11-13页 |
| ·研究的目的及意义 | 第11页 |
| ·主要研究内容 | 第11-12页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因的克隆 | 第11-12页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因转录水平的研究 | 第12页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因的原核表达 | 第12页 |
| ·技术路线 | 第12-13页 |
| 3 材料与方法 | 第13-24页 |
| ·实验材料 | 第13页 |
| ·仪器与试剂 | 第13-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第13页 |
| ·主要生化试剂 | 第13-14页 |
| ·常用溶液的配置 | 第14-16页 |
| ·实验方法 | 第16-24页 |
| ·家蚕的饲养 | 第16页 |
| ·家蚕组织的收集 | 第16页 |
| ·家蚕基因组RNA的提取 | 第16页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第16-17页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因cDNA的扩增 | 第17-18页 |
| ·PCR扩增后目的产物的纯化 | 第18页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第18-19页 |
| ·目的片段的连接和转化 | 第19页 |
| ·家蚕DNA的提取 | 第19页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因全长DNA的扩增 | 第19-20页 |
| ·提取的基因组DNA及总RNA的质量检测 | 第20页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因序列的拼接与分析 | 第20页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| ·BmEMAP Ⅱ转录水平的研究 | 第21页 |
| ·总RNA的提取 | 第21页 |
| ·半定量RT-PCR | 第21页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因的原核表达 | 第21-23页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·菌液的诱导表达 | 第22页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 | 第22-23页 |
| ·Western blot 分析 | 第23-24页 |
| 4 结果 | 第24-35页 |
| ·家蚕基因组 DNA及总RNA的检测 | 第24页 |
| ·第一链cDNA浓度的测定 | 第24页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因PCR扩增结果 | 第24-25页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因序列的测定和分析 | 第25-27页 |
| ·BmEMAP Ⅱ的生物信息学分析 | 第27-31页 |
| ·氨基酸同源性与系统进化树的分析 | 第27-28页 |
| ·蛋白质基本理化性质分析 | 第28-29页 |
| ·亲疏水性预测 | 第29页 |
| ·跨膜区域结果预测 | 第29-30页 |
| ·BmEMAP Ⅱ蛋白的信号肽分析 | 第30-31页 |
| ·蛋白定位的预测 | 第31页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因转录水平的研究 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增条件的确定 | 第31页 |
| ·BmEMAP Ⅱ不同时期、不同组织的表达 | 第31-32页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·BmEMAP Ⅱ基因在大肠杆菌中的表达 | 第33页 |
| ·不同条件下的原核表达 | 第33-35页 |
| ·IPTG 不同诱导浓度的原核表达 | 第33-35页 |
| 5 讨论 | 第35-37页 |
| 6 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 个人简介 | 第43页 |
