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水稻逆境响应基因OsMsr15的克隆与功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第9-25页
 1 非生物逆境胁迫下植物的生理生化变化第9-13页
   ·高温胁迫的影响第9-11页
   ·低温胁迫的影响第11页
   ·干旱胁迫的影响第11-12页
   ·盐胁迫的影响第12-13页
 2 胁迫的感知与信号传导第13-17页
   ·钙离子在信号感受和传递方面的作用第14-15页
   ·ABA在信号感受和传导中的作用第15-16页
   ·活性氧基团(ROS)在信号传递中的作用第16-17页
 3 非生物逆境胁迫应答基因:功能基因和调节基因第17-19页
   ·功能基因的种类和作用第17-18页
   ·调节基因的种类和作用第18-19页
 4 植物基因功能的研究方法与技术第19-23页
   ·基因表达规律的分析第19-20页
   ·基因功能的验证第20-21页
   ·基因启动子中顺式作用元件及与其作用的蛋白因子的鉴定第21-22页
   ·基因编码产物:蛋白质相互作用的研究第22-23页
 5 本研究的目的与意义第23-25页
第二章 材料与方法第25-41页
 1 实验材料第25-28页
   ·芯片分析和遗传转化受体材料及菌株第25页
   ·酶、化学试剂及试剂盒第25页
   ·主要仪器第25-26页
   ·引物合成及测序第26页
   ·植物组织培养基第26-27页
   ·重要溶液第27-28页
 2 实验方法第28-41页
   ·实验整体思路第28页
   ·基因芯片和实时定量PCR分析第28-31页
     ·逆境胁迫处理第28-29页
     ·植物总RNA抽提及cDNA第一链合成第29-30页
     ·芯片操作步骤第30页
     ·Quantitative real-time RT-PCR分析第30-31页
   ·目的基因的克隆第31-34页
     ·基因克隆第31页
     ·片段回收和连接第31-32页
     ·大肠杆菌感受态制备、热激转化及质粒抽提第32-33页
     ·农杆菌感受态制备、冷冻转化及质粒提取第33页
     ·水稻DNA抽提第33-34页
   ·OsMSR15基因生物信息学分析第34页
   ·表达载体的构建第34-37页
     ·过量表达载体的构建第34-35页
     ·GFP融合蛋白载体的构建第35-37页
     ·干扰表达载体的构建第37页
   ·过量表达载体遗传转化拟南芥及纯合子筛选第37-39页
   ·过量表达载体遗传转化水稻及阳性植株鉴定第39-41页
     ·水稻组织培养和遗传转化第39-40页
     ·转基因水稻阳性植株鉴定第40-41页
第三章 结果与分析第41-53页
 1 基因在逆境下的表达分析第41-42页
 2 OSMSR15基因的CDNA克隆和生物信息学分析第42-47页
 3 表达载体的构建第47-49页
   ·过量表达载体的构建第47-48页
   ·GFP融合蛋白载体的构建第48-49页
   ·干扰表达载体的构建第49页
 4 转基因拟南芥的潮霉素抗性鉴定和分子水平鉴定第49-51页
 5 水稻组织培养和转基因阳性株系的鉴定第51-53页
第4章 讨论第53-58页
 1 基因芯片是筛选功能基因是有效手段第53-54页
 2 遗传转化载体的构建第54-55页
 3 OSMSR15可能为具有TFⅢA型锌指结构域的转录因子第55-58页
第五章 结论与展望第58-59页
参考文献第59-69页
附录1:缩略词表第69-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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