| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·化学杀雄在油菜杂种优势利用研究中的重要作用 | 第13-14页 |
| ·杂交亲本选择自由 | 第13页 |
| ·缩短育种周期 | 第13页 |
| ·解决现有细胞质雄性不育系中的微粉问题 | 第13页 |
| ·降低育种成本 | 第13-14页 |
| ·可利用F2代的优势 | 第14页 |
| ·化学杀雄技术的研究进展 | 第14-17页 |
| ·化学杀雄剂种类的研究 | 第14页 |
| ·化学杀雄剂使用方案的研究 | 第14-15页 |
| ·环境因素对化学杀雄剂使用效果的研究 | 第15页 |
| ·化学杀雄作用机理的研究 | 第15-16页 |
| ·对花药发育的细胞学观察研究 | 第15页 |
| ·化学杀雄对保护酶活性的影响 | 第15页 |
| ·化学杀雄对蛋白质及氨基酸含量的影响 | 第15-16页 |
| ·化学杀雄对激素含量的影响 | 第16页 |
| ·化学杀雄与基因表达研究 | 第16页 |
| ·化学杀雄对油菜主要农艺性状的影响 | 第16-17页 |
| ·化学杀雄对植株营养生长的影响 | 第16-17页 |
| ·化学杀雄对植株花器官外部形态的影响 | 第17页 |
| ·化学杀雄对油菜花期的影响 | 第17页 |
| ·化学杀雄对油菜杂交制种纯度及结实力的影响 | 第17页 |
| ·几种差异表达基因的研究技术 | 第17-19页 |
| ·mRNA差异显示技术(DDRT-PCR) | 第18页 |
| ·cDNA扩增片段长度多态性技术 | 第18页 |
| ·抑制消减杂交 | 第18页 |
| ·基因芯片技术 | 第18-19页 |
| ·抑制消减杂交技术(SSH)简介 | 第19-22页 |
| ·SSH技术的基本原理 | 第19页 |
| ·SSH杂交技术的主要流程 | 第19-22页 |
| ·本研究目的、意义与主要内容 | 第22-23页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22页 |
| ·主要研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 抑制消减杂交(SSH)cDNA文库的构建及保存 | 第23-38页 |
| ·实验材料和试剂 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·田间管理 | 第23页 |
| ·喷药处理 | 第23-24页 |
| ·取样 | 第24页 |
| ·花蕾总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·试验准备 | 第24页 |
| ·试验过程 | 第24-25页 |
| ·RNA浓度及纯度检测 | 第25页 |
| ·抑制消减杂交(SSH) | 第25-31页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第26页 |
| ·RsaI酶切 | 第26-27页 |
| ·酶切产物的纯化 | 第27页 |
| ·连接头 | 第27-28页 |
| ·接头连接效率的检测 | 第28页 |
| ·第一轮杂交 | 第28-29页 |
| ·第二轮杂交 | 第29-30页 |
| ·第一轮PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·第二轮PCR扩增 | 第31页 |
| ·抑制消减杂交(SSH)文库的构建及保存 | 第31-33页 |
| ·抑制消减杂交PCR产物的回收纯化 | 第31页 |
| ·制备DH5a感受态细胞 | 第31-32页 |
| ·连接转化 | 第32页 |
| ·转化重组子的鉴定 | 第32页 |
| ·文库插入片段检测 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·喷药处理效果 | 第33-34页 |
| ·总RNA的质量及纯度检测结果 | 第34-35页 |
| ·消减效率检测结果 | 第35-36页 |
| ·文库的构建及检测结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·关于用药剂量和次数的选择 | 第37页 |
| ·关于取材时期及花蕾长度的确定 | 第37-38页 |
| 第三章 反向Northern斑点杂交筛选差异表达片段 | 第38-45页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·方法步骤 | 第38-42页 |
| ·实验前需要准备的试剂 | 第38-39页 |
| ·探针标记及纯化 | 第39-42页 |
| ·探针的标记 | 第39页 |
| ·纯化 | 第39页 |
| ·检测探针标记效率 | 第39-40页 |
| ·高密度杂交膜的制备 | 第40页 |
| ·预杂交及杂交 | 第40-41页 |
| ·洗膜 | 第41页 |
| ·免疫检测 | 第41页 |
| ·选取阳性克隆 | 第41-42页 |
| ·测序 | 第42页 |
| ·实验结果与分析 | 第42-44页 |
| ·探针的标记 | 第42页 |
| ·反向Northern斑点杂交显色结果 | 第42-43页 |
| ·阳性克隆同源性比对结果 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 差异表达基因片段的定量表达及功能分析 | 第45-55页 |
| ·实验材料及试剂 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·花蕾总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第46页 |
| ·设计引物 | 第46-47页 |
| ·标准曲线的制作 | 第47-48页 |
| ·质粒的提取 | 第47页 |
| ·标准曲线的制作 | 第47-48页 |
| ·目的基因的定量分析 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-53页 |
| ·内参基因及引物的筛选结果 | 第48-50页 |
| ·目的基因定量表达结果 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·化学杀雄剂诱导油菜雄性不育分子机制研究的复杂性和多样性 | 第53页 |
| ·MF6基因与油菜雄性不育 | 第53-54页 |
| ·进一步研究的工作 | 第54-55页 |
| 第五章 全文结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 硕士阶段发表论文情况 | 第63页 |
