| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-14页 |
| 1. 课题的提出 | 第9页 |
| 2. 前人研究进展 | 第9-13页 |
| ·柑橘BAC文库的构建及其相关研究进展 | 第9-11页 |
| ·LEC1-LIKE研究进展 | 第11-12页 |
| ·LEC1-LIKE在柑橘中的研究进展 | 第12-13页 |
| 3. 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 第二章 基于椪柑BAC文库CsL1L基因的筛选、阳性克隆的鉴定及启动子分离 | 第14-27页 |
| 1. 引言 | 第14页 |
| 2. 材料 | 第14-15页 |
| ·材料 | 第14页 |
| ·试剂与用品 | 第14-15页 |
| 3. 试验方法 | 第15-18页 |
| ·质粒的提取 | 第15页 |
| ·筛选含有CsL1L基因的BAC克隆 | 第15-16页 |
| ·质粒DNA池的制备 | 第15-16页 |
| ·文库筛选 | 第16页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第16-17页 |
| ·PCR检测 | 第16-17页 |
| ·插入片段长度检测 | 第17页 |
| ·BAC末端测序 | 第17页 |
| ·阳性克隆步移测序 | 第17页 |
| ·启动子序列分析 | 第17-18页 |
| 4. 结果分析 | 第18-25页 |
| ·PCR筛选文库 | 第18-20页 |
| ·第一轮PCR | 第18页 |
| ·第二轮PCR | 第18-19页 |
| ·第三轮PCR | 第19页 |
| ·第52块384孔板的筛选 | 第19-20页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第20-21页 |
| ·插入片段长度检测 | 第21-22页 |
| ·BAC-end测序 | 第22页 |
| ·启动子预测 | 第22-25页 |
| 5. 讨论 | 第25-27页 |
| ·利用椪柑BAC文库筛选含CsL1L基因的克隆及阳性克隆的分析 | 第25页 |
| ·阳性克隆BAC末端测序 | 第25页 |
| ·CsL1L启动子分析 | 第25-27页 |
| 第三章 CSL1L基因遗传转化分析 | 第27-34页 |
| 1. 前言 | 第27页 |
| 2. 材料 | 第27-28页 |
| 3. 试剂及用品 | 第28页 |
| 4. 方法 | 第28-30页 |
| ·柑橘外植体材料的准备 | 第28页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第28-29页 |
| ·侵染 | 第29页 |
| ·共培养 | 第29页 |
| ·筛选培养、再生 | 第29页 |
| ·上胚轴观察 | 第29页 |
| ·CsL1L基因转化国庆一号愈伤组织抗性转化子的PCR检测 | 第29-30页 |
| 5. 结果分析 | 第30-31页 |
| ·奥林达夏橙上胚轴切段转化CsL1L基因 | 第30页 |
| ·愈伤转化及抗性愈伤检测 | 第30-31页 |
| 6. 讨论 | 第31-34页 |
| ·CsL1L转化奥林达夏橙上胚轴切段结果的分析 | 第31-32页 |
| ·CsL1L基因转化"国庆一号"愈伤组织结果的分析 | 第32页 |
| ·CsL1L基因对柑橘体细胞胚研究的借鉴作用 | 第32-34页 |
| 第四章 总结及展望 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-40页 |
| 附录1:42-14-P-BES-HR序列 | 第40-41页 |
| 附录2:42-14-P-T7序列 | 第41-42页 |
| 附录3:52-8-I-BES-HR序列 | 第42-43页 |
| 附录4:52-8-I-T7序列 | 第43-44页 |
| 附录5:CsL1L基因的DNA序列 | 第44-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
