| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号及缩略语说明 | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-60页 |
| 第一章 不同致病变型大肠杆菌致病机理研究进展 | 第12-44页 |
| 1 致病性大肠杆菌主要特性 | 第12-19页 |
| ·大肠杆菌基本特性 | 第12-13页 |
| ·致病性大肠杆菌毒力因子 | 第13-19页 |
| 2 不同致病变型大肠杆菌致病机理 | 第19-32页 |
| ·肠致病性大肠杆菌(EPEC)致病机理 | 第20-21页 |
| ·肠出血性大肠杆菌(EHEC)致病机理 | 第21-23页 |
| ·产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)致病机理 | 第23-24页 |
| ·肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)致病机理 | 第24-26页 |
| ·肠聚集性大肠杆菌(EAEC)致病机理 | 第26-27页 |
| ·弥散黏附性大肠杆菌(DAEC)致病机理 | 第27-28页 |
| ·尿道致病性大肠埃希菌(UPEC)致病机理 | 第28-30页 |
| ·新生儿脑炎大肠杆菌(NMEC)致病机理 | 第30页 |
| ·禽致病性大肠杆菌(APEC)致病机理 | 第30-32页 |
| 参考文献 | 第32-44页 |
| 第二章 抑制性差减杂交技术及其应用研究进展 | 第44-60页 |
| 1 抑制性差减杂交技术原理 | 第45页 |
| 2 抑制性差减杂交基本技术流程 | 第45-50页 |
| ·基因组的酶切 | 第45-48页 |
| ·接头连接(Adaptor) | 第48-49页 |
| ·两轮差减杂交 | 第49页 |
| ·两次选择性PCR扩增 | 第49-50页 |
| 3 使用SSH需注意的事项 | 第50-51页 |
| ·合适限制性内切酶的选择 | 第50页 |
| ·杂交时间 | 第50页 |
| ·样品的比例 | 第50-51页 |
| ·验证试验 | 第51页 |
| 4 SSH技术的应用 | 第51-56页 |
| ·毒力基因的发现 | 第51-53页 |
| ·细菌或种群的鉴定 | 第53-54页 |
| ·毒力岛或遗传岛的鉴定 | 第54-55页 |
| ·基因表达上的变化 | 第55-56页 |
| 5 SSH技术评价 | 第56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 第二篇 试验研究 | 第60-118页 |
| 第三章 禽致病性大肠杆菌IMT5155疑似毒力基因的筛选 | 第60-82页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| 1 材料和方法 | 第61-70页 |
| ·菌株、质粒和培养条件 | 第61页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第61页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH) | 第61-67页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第67页 |
| ·连接 | 第67-68页 |
| ·连接产物的转化 | 第68页 |
| ·插入片段的PCR扩增 | 第68-69页 |
| ·Southern杂交 | 第69-70页 |
| ·测序 | 第70页 |
| 2 结果 | 第70-74页 |
| ·细菌基因组酶切 | 第70页 |
| ·菌落PCR | 第70-72页 |
| ·差异片段筛选 | 第72页 |
| ·差异片段测序 | 第72-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
| ABSTRACT | 第80-82页 |
| 第四章 禽致病性大肠杆菌IMT5155疑似毒力基因在不同来源大肠杆菌中的分布 | 第82-98页 |
| 摘要 | 第82页 |
| 1 材料和方法 | 第82-88页 |
| ·菌株 | 第82页 |
| ·大肠杆菌系统进化群分析 | 第82-84页 |
| ·疑似毒力基因片段检测引物设计及PCR检测 | 第84-86页 |
| ·Dot blot检测 | 第86-88页 |
| 2 结果 | 第88-94页 |
| ·大肠杆菌进化群PCR分析 | 第88页 |
| ·检测菌株的系统进化群分析 | 第88-89页 |
| ·疑似毒力基因PCR检测 | 第89-92页 |
| ·Dot blot检测 | 第92-94页 |
| 3 讨论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| ABSTRACT | 第97-98页 |
| 第五章 禽致病性大肠杆菌IMT5155毒力基因F11的表达及免疫原性分析 | 第98-118页 |
| 摘要 | 第98-99页 |
| 1 材料与方法 | 第99-107页 |
| ·菌株及试剂 | 第99页 |
| ·模板DNA的提取 | 第99页 |
| ·PCR扩增 | 第99-100页 |
| ·F11片段所在ORF的克隆 | 第100-101页 |
| ·连接产物的转化 | 第101-102页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定和PCR鉴定 | 第102-103页 |
| ·测序及序列分析 | 第103页 |
| ·重组质粒pET-28a-F11的构建 | 第103-104页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第104-105页 |
| ·SDS-PAGE | 第105-106页 |
| ·Western blot检测重组蛋白的表达 | 第106-107页 |
| ·兔抗IMT5155全菌血清的制备 | 第107页 |
| 2 结果 | 第107-112页 |
| ·毒力基因F11及其编码氨基酸序列分析 | 第107-109页 |
| ·PCR结果 | 第109页 |
| ·克隆载体pMD18T-F11的构建 | 第109-111页 |
| ·表达载体pET-28a-F11的构建与鉴定 | 第111-112页 |
| ·重组质粒的诱导表达及免疫原性分析 | 第112页 |
| 3 讨论 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-117页 |
| Abstract | 第117-118页 |
| 全文总结 | 第118-120页 |
| 附录1：疑似毒力基因片段序列 | 第120-127页 |
| 附录2 常用试剂的配制 | 第127-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 攻读博士期间发表文章 | 第134页 |
