摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略 | 第10-11页 |
前言 | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1 单增李斯特菌的概况 | 第14-18页 |
·单增李斯特菌简介 | 第14-18页 |
2 单增李斯特菌的控制与检测现状 | 第18-26页 |
·控制 | 第18-21页 |
·检测现状 | 第21-26页 |
第二章 单增李斯特菌hly 基因和突变hly 基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第26-69页 |
1 材料 | 第26-33页 |
·菌株与质粒 | 第26页 |
·工具酶和试剂 | 第26页 |
·标准参照物 | 第26-27页 |
·主要试剂的配制 | 第27-32页 |
·实验动物 | 第32页 |
·主要设备与仪器 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-51页 |
·?LLO 重组蛋白的制备? | 第33-42页 |
·突变LLO 重组蛋白的制备 | 第42-44页 |
·LLO 及突变 LLO 重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第44-45页 |
·LLO 及突变LLO 重组蛋白抗体的Western blot 验证 | 第45-46页 |
·LLO 及突变LLO 蛋白抗体效价测定 | 第46页 |
·免疫反应性测定 | 第46-47页 |
·突变 LLO 单克隆抗体制备 | 第47-51页 |
3 结果与分析 | 第51-65页 |
·LLO 重组蛋白的获得与鉴定 | 第51-58页 |
·突变LLO 蛋白的获得与鉴定 | 第58-61页 |
·LLO 及突变 LLO 的免疫效应分析 | 第61-63页 |
·单克隆抗体制备 | 第63-65页 |
4 讨论 | 第65-69页 |
·表达载体 pET-28b(+)的选择 | 第65页 |
·突变点的选择 | 第65-66页 |
·关于点突变方法及试剂盒的选择 | 第66页 |
·关于免疫原提纯 | 第66页 |
·关于包涵体纯化 | 第66-67页 |
·关于免疫程序 | 第67-68页 |
·筛选系统的建立 | 第68页 |
·关于细胞培养中的污染 | 第68-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-73页 |
附录 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
专利申请 | 第76页 |