| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 实验背景 | 第9-14页 |
| 一、龋病主要致龋菌变形链球菌 | 第9页 |
| 二、结构基因组学及其对变形链球菌的研究 | 第9-11页 |
| 三、蛋白质晶体学研究 | 第11-12页 |
| 四、本文所研究蛋白背景 | 第12-14页 |
| 1、SMU.2055蛋白(实验室编号918) | 第12-13页 |
| 2、SMU.1254蛋白(实验室编号984) | 第13-14页 |
| 实验材料 | 第14-17页 |
| 一、质粒 | 第14页 |
| 二、菌种 | 第14页 |
| 三、试剂 | 第14页 |
| 四、溶液配制 | 第14-15页 |
| 五、实验仪器 | 第15-17页 |
| 实验方法 | 第17-27页 |
| 一、实验基本路线示意图 | 第17页 |
| 二、目的基因的选择和高通量克隆 | 第17页 |
| 三、感受态细胞的制备 | 第17-18页 |
| 四、质粒DNA的提取 | 第18-19页 |
| 五、质粒DNA转化至大肠杆菌细胞 | 第19页 |
| 六、目的基因在大肠杆菌中表达及蛋白可溶性鉴定 | 第19-20页 |
| 七、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第20页 |
| 八、色谱法纯化目的蛋白 | 第20-23页 |
| 1、金属螯合层析柱纯化目的蛋白 | 第21-22页 |
| 2、凝胶排阻层析柱纯化目的蛋白 | 第22-23页 |
| 九、蛋白质结晶及结晶条件的筛选和优化 | 第23-24页 |
| 十、蛋白质X射线晶体衍射数据的收集 | 第24-25页 |
| 十一、硒代蛋白及重原子衍生物的制备 | 第25-26页 |
| 十二、晶体结构的解析方法 | 第26-27页 |
| 实验结果 | 第27-38页 |
| 一、SMU.2055蛋白(实验室编号为918) | 第27-34页 |
| 1、SMU.2055蛋白的表达和可溶性鉴定 | 第27页 |
| 2、SMU.2055蛋白的镍柱纯化 | 第27-28页 |
| 3、SMU.2055蛋白的凝胶排阻层析 | 第28-30页 |
| 4、SMU.2055蛋白结晶条件的筛选 | 第30-31页 |
| 5、SMU.2055硒代蛋白衍生物的制备 | 第31-32页 |
| 6、SMU.2055硒代蛋白衍生物结晶条件的筛选及衍射数据的收集 | 第32-33页 |
| 7、SMU.2055蛋白晶体结构的解析 | 第33-34页 |
| 二、SMU.1254蛋白(实验室编号为984) | 第34-38页 |
| 1、SMU.1254蛋白的表达和可溶性鉴定 | 第34页 |
| 2、SMU.1254蛋白的镍柱纯化 | 第34-35页 |
| 3、SMU.1254蛋白的凝胶排阻层析 | 第35页 |
| 4、SMU.1254蛋白结晶条件的筛选 | 第35-36页 |
| 5、SMU.1254蛋白重原子衍生物的制备 | 第36-38页 |
| 实验结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 文献综述 | 第41-49页 |
| 个人简介 | 第49-50页 |
| 研究成果 | 第50-51页 |
| 基金项目资助 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 一、缩略词 | 第54-55页 |
| 二、PET-28A质粒示意图 | 第55页 |
| 三、PET-28A克隆表达区示意图 | 第55页 |