| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-14页 |
| ·研究背景 | 第8-10页 |
| ·基因功能的研究策略 | 第10页 |
| ·基因功能的研究技术 | 第10-12页 |
| ·RNA 干扰 | 第10-11页 |
| ·增殖检测 | 第11页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第11-12页 |
| ·细胞周期检测 | 第12页 |
| ·本论文的意义 | 第12-14页 |
| 第2章 KIF1Bβ在肝癌发生发展中的肿瘤生物学行为 | 第14-34页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·材料与方法 | 第14-18页 |
| ·质粒与抗体 | 第14-15页 |
| ·试剂 | 第15页 |
| ·细胞培养与转染 | 第15页 |
| ·Transwell 和包被基质胶的 transwell 实验 | 第15页 |
| ·细胞周期检测 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第16页 |
| ·BrdU 掺入法检测细胞增殖 | 第16页 |
| ·细胞总 RNA 提取 | 第16-17页 |
| ·实时定量 PCR 分析 | 第17页 |
| ·统计分析 | 第17-18页 |
| ·实验结果 | 第18-31页 |
| ·各 HCC 细胞系中 KIF1Bβ的表达水平的检测 | 第18-19页 |
| ·RNAi 干扰载体的敲低效果评估 | 第19-20页 |
| ·抑制 KIF1Bβ的表达促进 HCC 细胞的体外迁移和侵袭 | 第20-24页 |
| ·抑制 KIF1Bβ的表达可抑制 H_2O_2 诱导的细胞凋亡 | 第24-26页 |
| ·KIF1Bβ对细胞增殖的影响 | 第26-28页 |
| ·KIF1Bβ对细胞周期的影响 | 第28-30页 |
| ·KIF1Bβ过表达对细胞凋亡的影响 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 第3章 KIF1Bβ作用机制的初步研究 | 第34-38页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·材料与方法 | 第34-35页 |
| ·质粒与抗体 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·细胞培养与转染 | 第34页 |
| ·免疫共沉淀 | 第34-35页 |
| ·质谱检测 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-36页 |
| ·免疫共沉淀验证 KIF1Bβ与β-catenin 降解复合物的相互作用 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第4章 KIF1Bβ参与细胞自噬作用的初步研究 | 第38-48页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·材料与方法 | 第39-42页 |
| ·质粒与抗体 | 第39页 |
| ·细胞培养与转染 | 第39页 |
| ·间接免疫荧光 | 第39-40页 |
| ·电镜检测自噬小体 | 第40页 |
| ·Western Blots 检测自噬相关蛋白的表达 | 第40-41页 |
| ·溶酶体膜通透性的检测 | 第41-42页 |
| ·实验结果 | 第42-45页 |
| ·KIF1Bβ表达扰动改变了溶酶体在细胞质中的分布 | 第42-43页 |
| ·KIF1Bβ表达扰动改变了溶酶体膜通透性 | 第43-44页 |
| ·KIF1Bβ表达扰动改变肝癌细胞系的自噬水平 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 A 英文缩略词表 | 第54-56页 |
| 附录 B 常用培养基及溶液 | 第56-58页 |
| 附录 C 本文用到的载体 | 第58-60页 |
| 附录 D 本文用到的引物和干扰载体的靶序列 | 第60-62页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
