| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇概况 | 第11-14页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的发现 | 第11页 |
| ·DON的理化性质 | 第11页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的分布与危害 | 第11-13页 |
| ·DON的分布与污染情况 | 第11-12页 |
| ·DON的急慢性毒性 | 第12页 |
| ·DON对人类和动物的危害 | 第12-13页 |
| ·DON的检测技术 | 第13-14页 |
| ·薄层色谱测定法(Thin layer chromatography,TLC) | 第13页 |
| ·高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC) | 第13-14页 |
| ·酶联免疫吸附检测法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) | 第14页 |
| ·喹烯酮的研究 | 第14-17页 |
| ·喹噁啉类药物及喹烯酮的研究进展 | 第14-15页 |
| ·喹烯酮的理化性质 | 第15页 |
| ·喹烯酮的毒理作用研究 | 第15-16页 |
| ·喹烯酮的代谢物的研究进展 | 第16页 |
| ·喹烯酮及其代谢物的检测方法 | 第16-17页 |
| ·免疫分析在兽药残留检测中的应用 | 第17页 |
| ·小分子药物的半抗原设计 | 第17-19页 |
| ·半抗原的设计原则 | 第18页 |
| ·连接位点的选择 | 第18页 |
| ·连接臂的引入 | 第18-19页 |
| ·活性基团的引入 | 第19页 |
| ·载体的选择 | 第19页 |
| ·常用的偶联方法 | 第19-20页 |
| ·选题目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 抗DON多克隆抗体的制备 | 第21-30页 |
| ·前言 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·主要试剂材料 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·MBSA的制备 | 第23页 |
| ·DON免疫原的制备 | 第23页 |
| ·DON-HS的制备 | 第23页 |
| ·检测抗原DON-HS-KLH的制备 | 第23-24页 |
| ·质谱鉴定免疫原DON-MBSA的合成 | 第24页 |
| ·紫外扫描鉴定检测抗原 | 第24页 |
| ·免疫小鼠和多克隆抗体的制备 | 第24页 |
| ·间接ELISA确定最佳包被原浓度和抗体稀释度 | 第24-25页 |
| ·间接ELISA测定多克隆抗体的效价 | 第25页 |
| ·间接竞争ELISA | 第25-26页 |
| ·标准曲线的建立 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-29页 |
| ·DON-MBSA的MALDI-TOF-MS鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·紫外扫描鉴定检测抗原 | 第27页 |
| ·最佳包被浓度和抗体工作浓度的确定 | 第27-28页 |
| ·多克隆抗体效价的测定 | 第28-29页 |
| ·标准曲线的建立 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 抗脱二氧喹烯酮单克隆抗体的制备、鉴定及检测方法的建立 | 第30-55页 |
| ·前言 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第31-34页 |
| ·主要试剂材料 | 第31-32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·主要溶液配制 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-45页 |
| ·脱二氧喹烯酮(DQCT)免疫原的制备 | 第34-35页 |
| ·脱二氧喹烯酮(DQCT)包被原的制备 | 第35页 |
| ·脱二氧喹烯酮免疫原和包被原的鉴定 | 第35页 |
| ·酶标抗原的合成与鉴定 | 第35-36页 |
| ·抗DQCT多克隆抗体的制备 | 第36-38页 |
| ·动物免疫 | 第36页 |
| ·最佳包被浓度和抗体稀释度的确定 | 第36-37页 |
| ·抗DQCT多克隆抗体效价的测定(间接ELISA法) | 第37页 |
| ·间接竞争ELISA法 | 第37页 |
| ·直接竞争ELISA法 | 第37-38页 |
| ·多克隆抗体的灵敏度 | 第38页 |
| ·抗DQCT单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第38-42页 |
| ·Sp2/0瘤细胞的复苏与传代培养 | 第38页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第38-39页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第39页 |
| ·免疫脾细胞的制备 | 第39页 |
| ·细胞融合 | 第39-40页 |
| ·阳性孔的筛选 | 第40-41页 |
| ·阳性孔的克隆 | 第41页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第41-42页 |
| ·单抗腹水的产生 | 第42页 |
| ·单抗的纯化 | 第42页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第42-45页 |
| ·单克隆抗体纯度的鉴定 | 第42-43页 |
| ·细胞培养上清和腹水效价的测定 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第43-44页 |
| ·单抗的亲和力常数的测定 | 第44页 |
| ·单抗的特异性鉴定 | 第44页 |
| ·标准曲线的建立 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-54页 |
| ·DQCT人工抗原的制备鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·DQCT-BSA的MALDI-TOF-MS鉴定结果 | 第45页 |
| ·紫外扫描鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·DQCT-BSA的免疫结果 | 第46-49页 |
| ·DQCT-OVA抗原最佳包被浓度测定结果 | 第46-47页 |
| ·血清效价测定结果 | 第47页 |
| ·酶标抗原DQCT-OVA-HRP和多抗的最佳工作浓度 | 第47-48页 |
| ·直接竞争法和间接竞争法测定多抗的灵敏度 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第49-50页 |
| ·抗DQCT单克隆抗体的鉴定 | 第50-54页 |
| ·单克隆抗体的纯化鉴定结果 | 第50页 |
| ·效价测定结果 | 第50-51页 |
| ·单克隆抗体类型及亚类鉴定 | 第51页 |
| ·单抗亲和常数测定结果 | 第51-52页 |
| ·酶标抗原和单抗的最佳工作浓度 | 第52-53页 |
| ·特异性鉴定结果 | 第53-54页 |
| ·抗DQCT单克隆抗体标准曲线的建立 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
