摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1 油菜油脂研究进展 | 第10-11页 |
2 MATH结构域蛋白 | 第11-15页 |
3 MATH结构域在植物中的研究进展 | 第15页 |
4 本研究的目的与意义 | 第15-17页 |
第二章 甘蓝型油菜BNAMT-1基因的生物信息学及表达谱分析 | 第17-27页 |
1 材料与方法 | 第17-21页 |
·材料 | 第17页 |
·供试材料 | 第17页 |
·分子生物学试剂 | 第17页 |
·仪器设备 | 第17页 |
·方法 | 第17-21页 |
·甘蓝型油菜总RNA的提取 | 第17-18页 |
·RNA反转录成cDNA | 第18-19页 |
·BnaMT-1全长基因的克隆 | 第19页 |
·PCR产物回收(参照TransGen公司切胶回收试剂盒操作说明) | 第19-20页 |
·制备大肠杆菌DH5a感受态细胞 | 第20页 |
·PCR产物的测序和比对 | 第20页 |
·BnaMT-1基因全长的生物信息学分析 | 第20页 |
·BnaMT-1基因在甘蓝型油菜湘油15号不同组织中的表达分析 | 第20-21页 |
2 结果与分析 | 第21-26页 |
·BnaMT-1基因全长的克隆 | 第21-22页 |
·测序结果比对 | 第22页 |
·BnaMT-1基因编码蛋白质的分析 | 第22-25页 |
·BnaMT-1蛋白质理化性质 | 第22-24页 |
·BnaMT-1蛋白质结构特征 | 第24-25页 |
·BnaMT-1基因在甘蓝型油菜湘油15号不同组织的表达 | 第25-26页 |
3 讨论 | 第26-27页 |
第三章 BNAMT-1全长基因超表达载体的构建 | 第27-33页 |
1 材料与方法 | 第27-30页 |
·材料 | 第27页 |
·供试材料 | 第27页 |
·菌株 | 第27页 |
·载体与质粒 | 第27页 |
·分子生物学试剂 | 第27页 |
·仪器设备 | 第27页 |
·方法 | 第27-30页 |
·BnaMT-1基因全长CDS的克隆 | 第27-28页 |
·PCR产物回收 | 第28页 |
·PCR产物的测序和比对 | 第28页 |
·BnaMT-1超表达载体的构建 | 第28-29页 |
·工程菌的制备 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-32页 |
·BnaMT-1基因全长克隆 | 第30页 |
·测序结果比对 | 第30页 |
·BnaMT-1超表达载体酶切验证 | 第30-31页 |
·超表达载体转化根癌农杆菌的菌落PCR检测结果 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
第四章 P-BNAMT-1在甘蓝型油菜中的遗传转化及转化子的筛选 | 第33-40页 |
1 材料与方法 | 第33-36页 |
·材料 | 第33-34页 |
·供试品种 | 第33页 |
·菌株和载体 | 第33页 |
·仪器设备 | 第33页 |
·培养基 | 第33-34页 |
·抗生素 | 第34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·油菜遗传转化体系中PPT(phosphinothricin)使用浓度的确定 | 第34-35页 |
·p-BnaMT-1在甘蓝型油菜中的遗传转化 | 第35-36页 |
·抗性苗的筛选 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-38页 |
·PPT浓度确定 | 第36-37页 |
·甘蓝型油菜湘油15号转化体系的建立 | 第37-38页 |
·PCR检测抗性苗 | 第38页 |
·外植体转化效率 | 第38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
第五章 白菜型油菜中含MATH结构域的蛋白家族进化树及结构分析 | 第40-49页 |
1 材料和方法 | 第40页 |
·含MATH结构域基因家族的识别 | 第40页 |
·蛋白结构域分析 | 第40页 |
·系统进化树分析 | 第40页 |
2 结果 | 第40-46页 |
·白菜型油菜MATH结构域基因家族成员的确定 | 第40-43页 |
·MATH结构域进化树分析 | 第43-44页 |
·白菜型油菜MATH结构域蛋白家族的序列和结构域分析 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-49页 |
第六章 全文总结与创新点 | 第49-51页 |
1 总结 | 第49-50页 |
2 创新点 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
缩写表(ABBREVIATION) | 第57-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
作者简介 | 第61页 |