| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 第一章 DNA甲基化芯片联合表达谱芯片筛选鼻咽癌紫杉醇耐药相关基因 | 第18-58页 |
| ·引言 | 第18-19页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·主要的试剂与耗材 | 第19-20页 |
| ·仪器设备 | 第20页 |
| ·细胞株 | 第20页 |
| ·分析软件 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-36页 |
| ·细胞培养 | 第21页 |
| ·鼻咽癌细胞基因组DNA抽提、纯化及检测 | 第21-22页 |
| ·细胞总RNA的提取、定量和检测 | 第22-23页 |
| ·高效液相色谱法检测细胞内DNA总体甲基化含量 | 第23-24页 |
| ·NimbleGen DNA甲基化芯片检测 | 第24-27页 |
| ·Affymetrix表达谱芯片实验 | 第27-31页 |
| ·甲基化特异性PCR(MS-PCR)验证甲基化芯片结果 | 第31-34页 |
| ·荧光实时定量PCR(Real-time PCR)检测基因表达 | 第34-36页 |
| ·统计学分析 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-55页 |
| ·高效液相色谱仪检测鼻咽癌细胞样品色谱图 | 第36-37页 |
| ·鼻咽癌总体DNA甲基化差异比较 | 第37-38页 |
| ·鼻咽癌DNA甲基化与耐药相关性分析 | 第38-39页 |
| ·NimbleGen DNA甲基化芯片结果分析 | 第39-45页 |
| ·Affymetrix表达谱基因芯片差异基因表达的多重分析 | 第45页 |
| ·联合DNA甲基化芯片和表达谱芯片筛选耐药相关基因 | 第45-48页 |
| ·对筛选的差异基因进行功能分类及信号通路分析 | 第48-53页 |
| ·甲基化特异性PCR (Methylate Specific PGR MS-PCR)验证芯片蹄选出 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第二章 5-aza-dC逆转鼻咽癌紫杉醇耐药研究 | 第58-70页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第58-59页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·实验中所用部分培养基及试剂的配制 | 第59-60页 |
| ·方法 | 第60-63页 |
| ·细胞培养和传代 | 第60页 |
| ·集落形成实验测定5-aza-dC对细胞的增殖抑制作用 | 第60-62页 |
| ·5-aza-dC预处理鼻咽癌细胞后紫杉醇对细胞增殖的影响 | 第62页 |
| ·Hoechest 33258法检测细胞凋亡 | 第62页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期 | 第62-63页 |
| ·统计学分析 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-67页 |
| ·5-aza-dC对鼻咽癌亲本及紫杉醇耐药细胞增殖影响 | 第64页 |
| ·5-aza-dC逆转鼻咽癌紫杉醇耐药性 | 第64-65页 |
| ·Hoechest 33258荧光染色观察细胞凋亡形态 | 第65-66页 |
| ·5-aza-dC对鼻咽癌耐药细胞系细胞凋亡和周期影响 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| 第三章 5-aza-dC逆转鼻咽癌紫杉醇耐药机制研究 | 第70-87页 |
| ·引言 | 第70页 |
| ·材料 | 第70-73页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第70-71页 |
| ·仪器设备 | 第71-72页 |
| ·试验中所用试剂的配制 | 第72-73页 |
| ·方法 | 第73-80页 |
| ·细胞的处理 | 第73页 |
| ·细胞总RNA提取、纯化 | 第73-74页 |
| ·鼻咽癌细胞基因组DNA抽提、纯化及检测 | 第74-75页 |
| ·细胞总蛋白的提取和检测 | 第75页 |
| ·MS-PCR检测5-aza-dC处理后基因甲基化改变 | 第75-77页 |
| ·Real-time PCR检测5-aza-dC处理后基因表达改变 | 第77-79页 |
| ·Western bloting检测蛋白质表达 | 第79-80页 |
| ·统计学分析 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-83页 |
| ·5-aza-dc处理后基因甲基化改变 | 第80-81页 |
| ·5-aza-dC处理后基因mRNA表达改变 | 第81-83页 |
| ·Western blot检测处理后蛋白质表达改变 | 第83页 |
| ·讨论 | 第83-87页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 综述 | 第93-104页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 在读期间发表论文及获奖情况 | 第105页 |
