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点突变前体肽产生新型环噻唑霉素变种的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
符号说明第7-13页
第一章 前言第13-41页
   ·链霉菌的简介第13-16页
   ·硫肽类抗生素生物合成基因簇的研究进展第16-41页
     ·Cyclothiazomycin(CLT,环噻唑霉素)第18-22页
     ·Micrococcins第22-23页
     ·Thiocillins第23-30页
     ·Thiostrepton(硫链丝菌素,TSR)第30-41页
第二章 实验材料和方法第41-61页
   ·实验材料第41-53页
     ·实验中使用的菌株第41-45页
     ·实验中使用的质粒第45-48页
     ·实验中使用的引物第48-50页
     ·培养基第50-51页
     ·化学试剂配制第51-53页
   ·实验方法第53-61页
     ·大肠杆菌质粒DNA 的提取第53-54页
     ·大肠杆菌质粒DNA 的少量快速提取及其检测第54页
     ·链霉菌质粒DNA 的大量提取第54-55页
     ·链霉菌总DNA 的提取第55页
     ·沉淀DNA第55页
     ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳第55-56页
     ·DNA 片段的胶回收第56页
     ·大肠杆菌钙转法感受态细胞的制备及其外源DNA 转化第56-57页
     ·大肠杆菌电转法感受态细胞的制备及其外源DNA 转化第57页
     ·链霉菌培养及其菌种保藏[52]第57-58页
     ·质粒DNA 从大肠杆菌到链霉菌的两亲本跨属接合转移(适用于吸水链霉菌和其他链霉菌)第58页
     ·环噻唑霉素及本研究中新型抗生素的快速提取第58页
     ·利用HPLC-MS 对环噻唑霉素及本研究中新型抗生素进行检测分析第58-59页
     ·利用 LC-EI-Q-TOF 对环噻唑霉素及本研究中新型抗生素进行高精度质谱检测分析第59页
     ·DNA 序列分析第59-60页
     ·氨基酸序列分析第60-61页
第三章 结果与讨论第61-112页
   ·点突变环噻唑霉素前体肽获得环噻唑霉素变种的方法构建第61-64页
   ·获得的环噻唑霉素变种第64-107页
     ·产生一个化合物的突变株第66-87页
     ·产生多种化合物的突变株第87-106页
     ·没有产生化合物的突变株第106-107页
   ·点突变环噻唑霉素前体肽对环噻唑霉素生物合成途径的影响第107-109页
   ·环噻唑霉素变种生物活性的测试研究第109-111页
   ·点突变环噻唑霉素前体肽对环噻唑霉素生物活性的影响第111-112页
第四章 总结与展望第112-115页
   ·点突变前体肽产生新型环噻唑霉素变种的研究的工作总结与创新点第112-114页
   ·研究工作的展望第114-115页
参考文献第115-121页
致谢第121-124页
附件第124页

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