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火球菌尿嘧啶DNA糖苷酶基因克隆、表达纯化和酶学性质研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
1 前言第8-24页
   ·DNA 损伤第8-10页
   ·碱基脱氨基损伤第10-13页
   ·碱基切除修复第13-19页
     ·DNA 糖苷酶第14-15页
     ·AP 内切核酸酶第15-16页
     ·DNA 聚合酶第16-18页
     ·DNA 连接酶第18-19页
   ·嗜高温微生物第19-22页
     ·火球菌P.furiosus第20页
     ·嗜热菌的应用第20-21页
     ·嗜热菌研究的意义第21-22页
   ·本课题的立题依据及研究内容第22-24页
2 材料和方法第24-33页
   ·实验材料第24-25页
     ·菌株和载体第24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·实验方法第25-33页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶基因的克隆第25-28页
       ·火球菌基因组DNA 的抽提第25页
       ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶基因的PCR 扩增第25-26页
       ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶基因的克隆第26-27页
       ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶基因的亚克隆第27-28页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的诱导表达和亲和纯化第28-30页
       ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的诱导表达第28-29页
       ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的镍离子亲和纯化第29-30页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的酶学性质测定第30-33页
       ·火球菌尿嘧啶DNA糖苷酶活性测定底物第30-31页
       ·火球菌尿嘧啶DNA糖苷酶活性测定方法第31-33页
3 结果与讨论第33-43页
   ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的基因克隆结果第34-35页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的基因克隆第34页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的基因亚克隆第34-35页
   ·重组火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的表达纯化第35-36页
   ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的酶学和生化特性第36-41页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的生化性质第36-37页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的热稳定性第37-38页
     ·火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶的底物特异性第38-39页
     ·硫代修饰对火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶切除尿嘧啶碱基的影响第39-40页
     ·pfu DNA 聚合酶对火球菌尿嘧啶DNA 糖苷酶切除尿嘧啶碱基的影响第40-41页
   ·讨论第41-43页
4 结论第43-45页
参考文献第45-52页
附录第52-60页
致谢第60-61页
研究生阶段发表论文情况第61-63页

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