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粗毛栓菌Trametes hirsuta lg-9非典型漆酶的研究

目录第1-8页
CONTENTS第8-12页
摘要第12-18页
ABSTRACT第18-24页
缩写词表第24-25页
第一章 研究背景第25-53页
   ·生物质与可持续发展第25-26页
   ·生物质中的木质素第26-32页
     ·木质素的分布第27-28页
     ·木质素的结构第28-32页
   ·木质素降解酶及非酶因素第32-34页
   ·漆酶第34-49页
     ·漆酶的结构和光谱学特征第35-37页
     ·漆酶的氧化还原机制第37-40页
     ·在自然界中的分布和生理功能第40-44页
     ·漆酶可以催化的反应第44-45页
     ·漆酶的分子生物学改造第45-46页
     ·漆酶的应用第46-49页
       ·漆酶与脱木质素第47-48页
       ·漆酶与印染废水的处理第48页
       ·漆酶与食品工业第48页
       ·漆酶与有机合成第48-49页
   ·发酵及应用条件优化方法第49-52页
   ·本文的立题依据、可行性分析及研究内容第52-53页
第二章 菌株的筛选与鉴定第53-65页
 引言第53页
   ·材料与方法第53-61页
     ·菌株的来源第53-54页
     ·材料及主要仪器第54页
     ·培养基第54-55页
     ·产漆酶真菌的筛选第55页
     ·菌种的活化与保存第55-56页
     ·所得菌株产漆酶能力比较第56页
     ·子实体形态观察第56-57页
     ·菌丝体形态第57页
     ·菌种的ITS分子生物学鉴定第57-61页
       ·真菌基因组DNA的提取第57-58页
       ·基因组DNA的电泳检测第58页
       ·PCR反应体系第58-59页
       ·PCR产物纯化第59-60页
       ·连接转化第60-61页
       ·质粒提取第61页
       ·DNA测序结果比对第61页
   ·结果与讨论第61-64页
     ·产漆酶菌株的筛选第61-63页
     ·形态观察第63页
     ·ITS测序第63-64页
   ·本章小结第64-65页
第三章 Trametes hirsuta lg-9漆酶产量的影响因素第65-77页
 引言第65页
   ·材料与方法第65-68页
     ·菌株第65页
     ·培养方法第65-66页
     ·粗酶液的分离和酶活性测定第66页
     ·生物量的测定第66页
     ·生物量及产酶时间曲线第66页
     ·正交试验筛选影响漆酶产量的关键因素第66-67页
     ·全因子试验确定C/N的影响系数第67页
     ·定向爬坡寻找最佳C/N值第67页
     ·响应面分析最佳反应条件第67-68页
   ·实验结果和分析第68-75页
     ·产酶-时间曲线第68-69页
     ·正交试验结果第69-71页
     ·全因子试验第71-72页
     ·最陡爬坡试验第72页
     ·响应面分析第72-75页
   ·本章小结第75-77页
第四章 T.hirsute lg-9漆酶的纯化和酶学性质测定第77-93页
 引言第77-78页
   ·材料与方法第78-82页
     ·菌株与培养方法第78页
     ·分离纯化实验流程第78-79页
       ·冷冻除去多糖第78页
       ·超滤浓缩第78页
       ·硫酸铵分级沉淀第78页
       ·DEAE-Sepharose FF离子交换层析第78-79页
       ·Sephacryl S-200分子筛层析第79页
       ·蛋白质浓度的测定第79页
     ·漆酶酶学性质的研究第79-82页
       ·SDS-PAGE和Native-PAGE第79页
       ·等电聚焦电泳第79页
       ·漆酶的全波段光谱吸收第79-80页
       ·漆酶的金属离子含量测定第80页
       ·蛋白质的氮末端测序第80-81页
       ·漆酶的酶促动力学研究第81页
       ·漆酶的最适pH第81页
       ·漆酶的最适反应温度和温度稳定性第81-82页
       ·底物广泛性研究第82页
       ·漆酶抑制剂第82页
       ·介体对漆酶氧化活性的影响第82页
   ·结果与讨论第82-90页
     ·漆酶的纯化第82-84页
       ·DEAE-Sepharose FF离子交换层析第82-83页
       ·Sephacryl S-200分子筛层析第83页
       ·纯化过程总结第83-84页
     ·T.hirsuta lg-9漆酶的性质研究第84-90页
       ·SDS-PAGE和Native-PAGE第84页
       ·等电聚焦电泳第84页
       ·漆酶的全波段光谱吸收第84-85页
       ·漆酶的金属离子含量测定第85页
       ·蛋白质的氮末端测序第85-86页
       ·漆酶酶促反应动力学研究第86页
       ·漆酶的最适pH第86-87页
       ·漆酶的最适反应温度和温度稳定性第87-88页
       ·漆酶的底物广泛性研究第88页
       ·漆酶的抑制剂研究第88页
       ·介体对漆酶氧化的影响第88-90页
   ·总结讨论第90-93页
第五章 有机物对漆酶活性测定的影响第93-101页
 引言第93-95页
   ·材料与方法第95-96页
     ·漆酶与试剂第95页
     ·实验方法第95-96页
       ·酶活性测定第95页
       ·漆酶活性的pH依赖性第95页
       ·产物对反应体系pH值的影响第95页
       ·添加有机物影响因子对反应体系pH值的影响第95-96页
   ·结果与讨论第96-100页
     ·产物对反应体系的影响第96页
     ·漆酶的pH依赖性第96-97页
     ·草酸对漆酶活性测定的影响第97-99页
     ·EDTA Na_2对漆酶活性测定的影响第99-100页
   ·本章小结第100-101页
第六章 Trametes hirsuta lg-9漆酶氧化机制及染料脱色条件优化第101-114页
 引言第101页
   ·材料与方法第101-104页
     ·试剂第101-102页
     ·酶与酶活测定方法第102页
     ·Uv-Vis紫外可见检测反应动力学第102页
     ·高压液相分析检测产物第102页
     ·高压液相质谱连用分析产物第102页
     ·甲基红脱色条件优化第102-104页
       ·部分因子试验第102-103页
       ·最陡爬坡试验第103页
       ·响应面分析试验第103-104页
   ·结果与分析第104-113页
     ·Uv-Vis紫外可见检测反应动力学第104-105页
     ·高压液相分析检测产物第105页
     ·高压液相质谱连用分析产物第105页
     ·甲基红的氧化机制第105-107页
     ·脱色条件优化第107-113页
       ·部分因子试验第107-108页
       ·最陡爬坡试验第108-109页
       ·响应面分析试验第109-113页
   ·本章小结第113-114页
全文总结及展望第114-116页
参考文献第116-131页
致谢第131-132页
发表论文第132-133页
论文1第133-140页
论文2第140-157页
学位论文评阅及答辩情况表第157页

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