| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-19页 |
| 缩略词 | 第19-23页 |
| 前言 | 第23-25页 |
| 第一章 缺氧、低(无)糖及缺氧/复氧对神经元的影响 | 第25-42页 |
| ·材料与方法 | 第25-28页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·大脑皮层神经元的分离培养 | 第26页 |
| ·神经元的鉴定 | 第26-27页 |
| ·缺氧、缺氧/复氧处理 | 第27页 |
| ·LDH漏出率的测定 | 第27页 |
| ·MTT比色法检测细胞活力 | 第27页 |
| ·Hoechst 33258 染色法检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
| ·统计分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-39页 |
| ·神经元的鉴定 | 第28页 |
| ·缺氧对正常糖培养皮层神经元的影响 | 第28-30页 |
| ·缺氧对正常糖培养皮层神经元LDH漏出率的影响 | 第28-29页 |
| ·缺氧对正常糖培养皮层神经元细胞活力的影响 | 第29-30页 |
| ·葡萄糖浓度对皮层神经元的影响 | 第30-31页 |
| ·低糖和无糖培养对皮层神经元LDH漏出率的影响 | 第30-31页 |
| ·低糖和无糖培养对皮层神经元细胞活力的影响 | 第31页 |
| ·低糖和无糖对缺氧条件下培养皮层神经元的影响 | 第31-34页 |
| ·低糖和无糖对缺氧条件下培养皮层神经元LDH漏出率的影响 | 第31-33页 |
| ·低糖和无糖对缺氧条件下培养皮层神经元细胞活力的影响 | 第33-34页 |
| ·缺氧/复氧对皮层神经元的影响 | 第34-39页 |
| ·缺氧/复氧对正常糖培养皮层神经元的影响 | 第34-36页 |
| ·缺氧/复氧对无糖培养皮层神经元的影响 | 第36-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·结论 | 第41-42页 |
| 第二章 HGF对神经元缺氧/复氧损伤的影响 | 第42-65页 |
| ·材料与方法 | 第42-47页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·大脑皮层神经元的分离培养 | 第44页 |
| ·缺氧/复氧处理 | 第44页 |
| ·LDH漏出率的测定 | 第44页 |
| ·MTT比色法检测细胞活力 | 第44页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第44-45页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| ·总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·RNA质量检测 | 第46页 |
| ·RT-PCR | 第46-47页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第47页 |
| ·Western blotting | 第47页 |
| ·统计分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-61页 |
| ·c-Met的表达 | 第48-49页 |
| ·c-Met mRNA | 第48页 |
| ·c-Met蛋白 | 第48-49页 |
| ·HGF对缺氧/复氧损伤神经元的影响(葡萄糖浓度:25mol/L) | 第49-55页 |
| ·不同浓度的HGF对神经元缺氧/复氧损伤的影响 | 第49-52页 |
| ·不同时间点加入HGF对神经元缺氧/复氧损伤的影响 | 第52-54页 |
| ·c-Met抑制剂对HGF神经保护作用的影响 | 第54-55页 |
| ·HGF对缺氧/复氧损伤神经元的影响(葡萄糖浓度:0mol/L) | 第55-61页 |
| ·不同浓度的HGF对神经元缺氧/复氧损伤的影响 | 第55-58页 |
| ·不同时间点加入HGF对神经元缺氧/复氧损伤的影响 | 第58-60页 |
| ·c-Met抑制剂对HGF神经保护作用的影响 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| 第三章 HGF对缺氧/复氧神经元的保护作用与ERK1/2、P1-3K/Akt通路及凋亡相关分子的关系 | 第65-81页 |
| ·材料与方法 | 第66-71页 |
| ·材料 | 第66-67页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-71页 |
| ·大脑皮层神经元的分离培养 | 第67页 |
| ·缺氧/复氧处理 | 第67-68页 |
| ·药物处理 | 第68页 |
| ·MTT比色法检测细胞活力 | 第68页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第68页 |
| ·引物设计 | 第68-69页 |
| ·总RNA的提取 | 第69页 |
| ·RNA质量检测 | 第69-70页 |
| ·RT-PCR | 第70页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第70-71页 |
| ·Western blotting | 第71页 |
| ·统计分析 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-79页 |
| ·HGF的神经保护作用与MEK/ERK1/2与PI3-K/Akt信号通路的关系 | 第71-76页 |
| ·HGF激活神经元MEK/ERK1/2与PI3-K/Akt信号通路 | 第71-72页 |
| ·HGF的神经保护作用与MEK/ERK1/2与PI3-K/Akt信号通路有关 | 第72-76页 |
| ·HGF对缺氧/复氧神经元凋亡相关分子的影响 | 第76-79页 |
| ·HGF对Bcl-2,Bax及Bcl-xLmRNA水平的影响 | 第76-78页 |
| ·HGF对Bcl-2,Bax及Bcl-xL蛋白表达水平的影响 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| 第四章 HGF对缺氧/复氧神经元缺氧信号通路的影响 | 第81-110页 |
| ·材料与方法 | 第81-96页 |
| ·细胞培养及RNA提取 | 第81-84页 |
| ·材料 | 第81-82页 |
| ·方法 | 第82-84页 |
| ·基因芯片实验操作步骤 | 第84-90页 |
| ·cRNA标记与合成 | 第84-87页 |
| ·芯片杂交 | 第87-88页 |
| ·化学发光检测 | 第88-89页 |
| ·图像采集和数据分析 | 第89-90页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第90-95页 |
| ·使用样品的RNA进行cDNA合成 | 第90-91页 |
| ·合成的cDNA用于实时定量PCR | 第91-95页 |
| ·Western blotting | 第95-96页 |
| ·材料 | 第95页 |
| ·方法 | 第95-96页 |
| ·统计分析 | 第96页 |
| ·结果 | 第96-103页 |
| ·RNA质量检测 | 第96页 |
| ·基因芯片结果 | 第96-97页 |
| ·实时定量PCR结果 | 第97-102页 |
| ·Mybl2 | 第97-98页 |
| ·Cygb | 第98-99页 |
| ·Birc5 | 第99页 |
| ·Cdc42 | 第99-100页 |
| ·NOS2 | 第100-101页 |
| ·IL1β | 第101-102页 |
| ·GAPDH | 第102页 |
| ·HGF对缺氧/复氧神经元Cygb和NOS2蛋白表达的影响 | 第102-103页 |
| ·Cygb | 第102页 |
| ·NOS2 | 第102-103页 |
| ·讨论 | 第103-109页 |
| ·结论 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-132页 |
| 综述 | 第132-153页 |
| 致谢 | 第153-154页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第154页 |
