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桑粒肩天牛幼虫肠道微生物多样性的分子生物学方法研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
1 绪论第10-22页
   ·桑粒肩天牛的危害情况第10-11页
   ·肠道微生物和昆虫的相互关系第11-13页
   ·肠道微生物研究现状第13页
   ·肠道微生物的鉴定方法第13-19页
     ·变性梯度凝胶电泳第15-17页
     ·限制性片段长度多态性分析第17-18页
     ·均一化技术第18-19页
   ·研究目的和研究内容第19页
   ·本研究的意义第19-20页
   ·创新之处第20页
   ·技术路线第20-22页
2 材料与方法第22-34页
   ·材料第22-23页
     ·供试昆虫第22页
     ·主要试剂和实验仪器第22-23页
   ·肠道的制备和肠道总DNA 的提取第23页
   ·DGGE 分析肠道微生物第23-27页
     ·PCR 扩增肠道微生物16S rDNA V3 区第23-24页
     ·溶液的配制第24页
     ·凝胶的灌制和电泳第24-25页
     ·DGGE 凝胶上条带的回收测序第25-26页
     ·基因序列的上传第26-27页
   ·桑粒肩天牛幼虫肠道微生物16S RDNA 常规克隆文库的构建及RFLP 分析第27-30页
     ·PCR 扩增16S rDNA第27页
     ·常规16S rDNA 克隆文库的构建第27-29页
     ·转化子的RFLP 分析和测序第29页
     ·克隆文库的分析第29-30页
     ·基因序列的上传第30页
   ·均一化文库的构建第30-34页
     ·PCR 扩增和PCR 产物的纯化第30页
     ·16S rDNA 的均一化第30-32页
     ·均一化文库的构建第32页
     ·文库序列的分析和上传第32-34页
3 结果与分析第34-50页
   ·桑天牛天牛幼虫肠道微生物总DNA 的提取方法比较第34页
   ·天牛肠道微生物多样性DGGE 指纹图谱分析第34-38页
   ·常规 16S rDNA 克隆文库 RFLP 分析第38-43页
   ·天牛肠道微生物 16S rDNA 均一化克隆文库的分析第43-50页
4 讨论第50-55页
   ·分子生物学方法在环境生物多样性分析中有着重要的作用第50-52页
   ·三种分子生物学方法的差异第52-53页
   ·菌群来源和功能分析第53-55页
5 结论与后续工作建议第55-56页
   ·结论第55页
   ·后续工作建议第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-63页
附录第63-65页

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