乙肝病毒表面抗原基因植物表达载体的构建及其在烟草和番茄中的表达
| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-26页 |
| ·转基因植物疫苗 | 第10-13页 |
| ·利用转基因植物生产疫苗的可行性 | 第10页 |
| ·转基因植物疫苗的研究进展 | 第10-13页 |
| ·转基因植物疫苗的优势及前景 | 第13页 |
| ·乙肝病毒表面抗原基因植物疫苗研究 | 第13-18页 |
| ·HBV病毒的分子结构 | 第13-14页 |
| ·HBSAg基因的结构 | 第14-15页 |
| ·转乙肝表面抗原基因植物疫苗的研究及进展 | 第15-17页 |
| ·转乙肝表面抗原基因植物疫苗的问题及对策 | 第17-18页 |
| ·转基因番茄研究进展 | 第18-24页 |
| ·转基因抗病毒番茄研究 | 第18-19页 |
| ·转基因抗菌番茄研究 | 第19页 |
| ·转基因疫苗番茄研究 | 第19-20页 |
| ·转基因延熟番茄研究 | 第20-21页 |
| ·转基因抗虫番茄研究 | 第21-22页 |
| ·改善番茄品质研究 | 第22-23页 |
| ·转基因抗逆性番茄研究 | 第23-24页 |
| ·转基因抗除草剂番茄研究 | 第24页 |
| ·转基因雄性不育番茄研究 | 第24页 |
| ·研究意义与内容 | 第24-26页 |
| ·研究意义 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| 第2章 植物表达载体的构建 | 第26-36页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·主要工具酶和试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·质粒提取液 | 第27页 |
| ·实验方法与步骤 | 第27-31页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第27-29页 |
| ·酶切 | 第29页 |
| ·片段的回收 | 第29-30页 |
| ·DNA片段的连接 | 第30页 |
| ·转化及重组子的筛选与鉴定 | 第30-31页 |
| ·实验结果 | 第31-33页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第31页 |
| ·植物表达载体的酶切鉴定 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·载体构建中筛选抗性基因Hpt的应用 | 第34-35页 |
| ·载体构建中植物表达启动子的选择 | 第35-36页 |
| 第3章 乙肝病毒表面抗原基因对烟草的转化及其表达 | 第36-44页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第36页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·烟草组织培养及转化培养基 | 第36-37页 |
| ·实验方法与步骤 | 第37-39页 |
| ·三亲交配法转化农杆菌 | 第37页 |
| ·无菌烟草苗的获得 | 第37页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第37页 |
| ·转基因烟草的GUS组织化学染色 | 第37-38页 |
| ·转基因烟草的分子生物学检测 | 第38-39页 |
| ·实验结果 | 第39-42页 |
| ·目的基因质粒导入农杆菌LBA4404 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化的筛选培养 | 第40页 |
| ·转基因烟草的继代培养与生根培养 | 第40-41页 |
| ·转基因植株的GUS组织化学染色 | 第41-42页 |
| ·PCR鉴定 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第4章 乙肝病毒表面抗原基因对番茄的转化及其表达 | 第44-66页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·菌株和质粒 | 第44页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·主要药品和试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·番茄组织培养及转化培养基 | 第44-45页 |
| ·实验方法与步骤 | 第45-51页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第45页 |
| ·番茄无菌苗的获得 | 第45-46页 |
| ·番茄组织培养再生体系 | 第46页 |
| ·番茄转化体系 | 第46-47页 |
| ·转基因番茄的GUS组织染色检测 | 第47页 |
| ·转基因番茄的PCR扩增检测 | 第47-51页 |
| ·实验结果 | 第51-62页 |
| ·番茄再生系统的建立 | 第51-53页 |
| ·影响番茄转化的因素 | 第53-59页 |
| ·转基因番茄抗性植株的获得 | 第59-60页 |
| ·转基因番茄的鉴定 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-66页 |
| ·转化中番茄受体材料的选择 | 第62-63页 |
| ·转化中菌株的选择 | 第63页 |
| ·转化中菌株浓度及侵染时间的选择 | 第63-64页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)在转化中的应用 | 第64页 |
| ·番茄转化中抗生素的选择 | 第64页 |
| ·番茄的生根培养 | 第64-65页 |
| ·转化中番茄的褐化和玻璃化问题 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 个人简历 | 第84-86页 |
