摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩写名词表 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-47页 |
·植物的抗逆性 | 第13-14页 |
·植物在各种非生物逆境胁迫下的应答、调节途径 | 第14-35页 |
·植物体内非生物逆境胁迫信号传递的一般途径 | 第14-15页 |
·非生物逆境胁迫信号在植物体内传递的信号分子 | 第15-19页 |
·钙离子在植物非生物逆境信号传递中的作用 | 第15页 |
·ABA在植物非生物逆境信号传递中的作用 | 第15-18页 |
·磷脂是逆境胁迫响应过程中的另一重要信号 | 第18-19页 |
·非生物逆境胁迫信号在植物体内传递的几个分支 | 第19-28页 |
·MAPK pathways | 第21-24页 |
·CDPK pathways | 第24-26页 |
·CIPK-CBL(SOS)pathways | 第26-28页 |
·信号传递和胁迫应答的转录调节以及转录后调节 | 第28-35页 |
·传递信号和调控基因表达的转录因子 | 第28-34页 |
·感应和转导胁迫信号的蛋白激酶和其它蛋白酶类 | 第34-35页 |
·提高植物抗逆性的下游功能基因及编码产物 | 第35-40页 |
·渗透调节物质合成酶基因及产物 | 第36-38页 |
·清除活性氧的酶基因及产物 | 第38-39页 |
·保护细胞免受水分胁迫伤害的功能蛋白基因及产物 | 第39-40页 |
·研究植物基因功能的策略和方法 | 第40-46页 |
·基因功能增加或获得 | 第41-43页 |
·基因功能丧失或减弱 | 第43-45页 |
·功能基因研究的其他方法 | 第45-46页 |
·本研究的目的和意义 | 第46-47页 |
2 材料与方法 | 第47-59页 |
·水稻材料 | 第47页 |
·用于遗传转化的水稻基因片段 | 第47页 |
·实验所用到的菌株、质粒、载体和感受态细胞 | 第47页 |
·DNA的抽提和Southern杂交 | 第47-49页 |
·RNA的抽提,反转录和Northern杂交 | 第49页 |
·PCR、RT-PCR和Real-time PCR的检测 | 第49页 |
·水稻内源基因表达量分析的材料准备 | 第49-50页 |
·遗传转化载体的构建和转化 | 第50-53页 |
·超量表达载体的构建 | 第50-52页 |
·RNAi抑制表达载体的构建 | 第52页 |
·GFP及GUS融合表达载体的构建 | 第52页 |
·遗传转化 | 第52-53页 |
·目标蛋白的亚细胞定位分析 | 第53页 |
·酵母细胞中的生化实验 | 第53-54页 |
·GUS组织化学分析和GUS活性测定 | 第54-55页 |
·成株期转基因植株在大田和PVC管的抗旱实验 | 第55页 |
·OsbZIP23超量表达转基因植株叶片电镜观察 | 第55-56页 |
·OsbZIP23超量表达转基因植株离体条件下失水速率统计 | 第56页 |
·转基因植株的ABA敏感性实验 | 第56页 |
·转基因植株苗期抗逆性实验 | 第56-58页 |
·转基因植株苗期抗旱性分析 | 第56-57页 |
·转基因植株苗期耐盐性分析 | 第57页 |
·转基因植株苗期耐冷性实验 | 第57-58页 |
·转基因植株的基因表达谱分析 | 第58页 |
·游离脯氨酸含量的测定 | 第58页 |
·可溶性糖含量的测定 | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-119页 |
·抗逆相关基因的遗传转化和抗逆筛选 | 第59-66页 |
·转化载体的构建及遗传转化 | 第59-61页 |
·对转基因植株进行超量表达检测 | 第61-63页 |
·部分T_0代转基因植株Southern拷贝数分析 | 第63-64页 |
·转基因植株田间抗逆性筛选与鉴定 | 第64-66页 |
·转基因植株苗期抗旱筛选与鉴定 | 第64-65页 |
·T_1代转基因植株成株期抗旱筛选 | 第65-66页 |
·OsbZIP23基因在水稻非生物逆境中的功能研究 | 第66-101页 |
·OsbZIP23基因的扩增和序列分析 | 第66-69页 |
·OsbZIP23的表达模式分析 | 第69-72页 |
·OsbZIP23在非生物逆境及激素处理后的表达量分析 | 第70-72页 |
·OsbZIP23在不同组织的表达模式 | 第72页 |
·OsbZIP23亚细胞定位和酵母细胞的生化功能分析 | 第72-73页 |
·OsbZIP23蛋白在酵母细胞转录活性分析 | 第73-75页 |
·OsbZIP23超量表达转基因植株抗逆性分析 | 第75-81页 |
·OsbZIP23转基因植株苗期抗盐性分析 | 第75-76页 |
·OsbZIP23转基因家系苗期失水速率分析 | 第76-77页 |
·成株期OsbZIP23转基因植株抗旱性分析 | 第77-78页 |
·OsbZIP23转基因植株ABA敏感性分析 | 第78-81页 |
·OsbZIP23突变体的分离及表型鉴定 | 第81-83页 |
·OsbZIP23突变体植株抗逆性分析 | 第83-87页 |
·OsbZIP23突变体植株苗期抗盐性分析 | 第83-84页 |
·OsbZIP23突变体植株发芽ABA敏感性分析 | 第84-86页 |
·OsbZIP23突变体植株生长的ABA敏感性分析 | 第86-87页 |
·OsbZIP23转基因植株的基因表达谱分析 | 第87-101页 |
·水稻CIPK蛋白激酶家族的分离及功能鉴定 | 第101-119页 |
·水稻中CIPK蛋白激酶家族基因的分离及结构分析 | 第101-105页 |
·CIPK蛋白激酶家族逆境表达谱分析 | 第105-109页 |
·OsCIPK15功能分析 | 第109-112页 |
·OsCIPK15的启动子分析 | 第109-110页 |
·OsCIPK15的超量表达植株的耐盐性分析 | 第110-112页 |
·OsCIPK15超量表达植株对Na~+、K~+吸收的分析 | 第112页 |
·OsCIPK03和OsCIPK12的功能分析 | 第112-115页 |
·OsCIPK03超量表达植株耐低温能力分析 | 第112-113页 |
·OsCIPK12超量表达植株耐干旱能力分析 | 第113-115页 |
·超量表达植株体内可溶性糖和游离脯氨酸的含量分析 | 第115页 |
·水稻中CIPK与CBL基因家族突变体的收集 | 第115-119页 |
4.讨论 | 第119-125页 |
·CIPK蛋白激酶在水稻抗逆性提高作用机理探讨 | 第119-121页 |
·OsbZIP23在水稻逆境应答调控中的作用 | 第121-123页 |
·转基因策略在提高植物抗逆性方面的应用 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-140页 |
附录A Protocols | 第140-151页 |
附录B 个人简历 | 第151-152页 |
致谢 | 第152页 |