| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩写词 | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-32页 |
| 1. 水稻的病毒病害及抗病毒基因工程的研究进展 | 第12-19页 |
| ·水稻病毒病害及控制策略 | 第12-13页 |
| ·水稻抗病毒基因研究进展 | 第13-14页 |
| ·水稻抗病毒基因工程研究进展 | 第14-19页 |
| 2. 美洲商陆抗病毒蛋白(PAP)的结构、功能及抗病机理 | 第19-24页 |
| ·RAP的结构特点 | 第19-21页 |
| ·RAP的功能 | 第21页 |
| ·RAP的抗病毒作用机理 | 第21-24页 |
| 3. PAP基因突变体的研究及应用 | 第24-29页 |
| ·PAP基因突变体研究 | 第24-26页 |
| ·PAP及其突变体基因在动、植物抗病基因工程中的应用 | 第26-29页 |
| 4. 水稻转基因技术及转基因水稻安全性研究 | 第29-30页 |
| ·转基因技术 | 第29页 |
| ·转基因水稻安全性研究 | 第29-30页 |
| 5. 实验目的及意义 | 第30-31页 |
| 6. 实验技术路线 | 第31-32页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第32-50页 |
| 1. 实验材料 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌株和质粒 | 第32-33页 |
| ·引物 | 第33页 |
| 2. 实验试剂 | 第33-39页 |
| ·酶和生化试剂 | 第33页 |
| ·抗生素和生长激素 | 第33-34页 |
| ·培养基的配制 | 第34-37页 |
| ·常用的溶液和仪器 | 第37-39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| 3. 实验方法 | 第39-50页 |
| ·RNA的小量提取 | 第39-40页 |
| ·目的基因的克隆 | 第40-42页 |
| ·原核表达载体的构建及表达 | 第42-46页 |
| ·植物表达载体的构建及转化农杆菌 | 第46-47页 |
| ·植物表达载体对烟草的转化 | 第47页 |
| ·根癌农杆菌介导水稻转化 | 第47-49页 |
| ·转基因植株的初步鉴定及移栽 | 第49-50页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第50-73页 |
| 1. PAP全长基因的克隆、测序 | 第50-57页 |
| ·PAP全长基因的获得、测序及序列分析 | 第50-53页 |
| ·PAP突变体基因的获得 | 第53-55页 |
| ·突变体基因克隆载体的构建及测序 | 第55-57页 |
| 2. 原核表达载体的构建及表达产物的鉴定 | 第57-61页 |
| ·原核表达载体的构建及验证 | 第57-58页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第58页 |
| ·Western-bloting分析 | 第58-59页 |
| ·结果分析与讨论 | 第59-61页 |
| 3. PAP突变体基因对烟草的遗传转化研究 | 第61-67页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·重组载体对农杆菌的转化及鉴定 | 第63页 |
| ·烟草的转化 | 第63-65页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第65-66页 |
| ·结果分析与讨论 | 第66-67页 |
| 4. 突变体pd46pap基因对水稻遗传转化的初步研究 | 第67-73页 |
| ·水稻胚性愈伤组织的获得 | 第67-69页 |
| ·对水稻的转化 | 第69页 |
| ·结果分析与讨论 | 第69-73页 |
| 第四部分 小结与展望 | 第73-75页 |
| 1. 小结 | 第73页 |
| 2. 展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
