摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
英文缩略词一览表 | 第9-11页 |
第1章 引言 | 第11-26页 |
·膜联蛋白A2(ANXA2)与肿瘤进程研究进展 | 第11-23页 |
·膜联蛋白家族与肿瘤简介 | 第11-12页 |
·ANXA2的生物学结构特性及活性调节 | 第12-13页 |
·ANXA2与肿瘤 | 第13-23页 |
·RNA干扰技术(RNAi) | 第23-26页 |
·RNAi的发现与作用机制 | 第23-24页 |
·RNAi的生物学意义 | 第24页 |
·RNAi应用于胃癌基因治疗 | 第24页 |
·磷酸钙转染法 | 第24-26页 |
第2章 本课题的研究内容与意义、技术路线及创新之处 | 第26-28页 |
第3章 靶向ANXA2的siRNA质粒表达载体的构建与鉴定及其对ANXA2基因沉默效应的分析 | 第28-51页 |
·实验材料 | 第28-32页 |
·细胞株与菌株 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-32页 |
·实验仪器设备 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-40页 |
·靶向ANXA2基因的siRNA设计 | 第32-33页 |
·携带ANXA2-siRNA质粒表达载体的构建与鉴定 | 第33页 |
·质粒制备与鉴定 | 第33-34页 |
·细胞培养 | 第34-35页 |
·细胞转染与效率评估 | 第35页 |
·半定量RT-PCR检测重组质粒对ANXA2 mRNA表达水平的抑制 | 第35-38页 |
·Western blot检测重组质粒对ANXA2蛋白表达水平的抑制 | 第38-40页 |
·统计学处理 | 第40页 |
·结果 | 第40-48页 |
·ANXA2 RNAi质粒表达载体的构建与鉴定 | 第40-42页 |
·ANXA2 RNAi质粒转染效率评估 | 第42页 |
·RT-PCR分析ANXA2 mRNA表达水平 | 第42-46页 |
·Western blot检测ANXA2蛋白表达水平 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
第4章 ANXA2基因沉默对胃癌细胞生物学行为影响的研究 | 第51-64页 |
·实验材料 | 第51-52页 |
·质粒及细胞株 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·主要试剂的配制 | 第51-52页 |
·实验仪器设备 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-55页 |
·细胞培养与质粒制备(同第3章) | 第52页 |
·实验分组与转染 | 第52页 |
·体外损伤修复法 | 第52-53页 |
·细胞增殖分析 | 第53页 |
·细胞凋亡检测 | 第53-54页 |
·RT-PCR与western blot检测FAK mRNA及蛋白表达水平 | 第54-55页 |
·统计学处理 | 第55页 |
·结果 | 第55-59页 |
·ANXA2-siRNA对SGC-7901细胞运动能力的影响 | 第55-56页 |
·ANXA2-siRNA对SGC-7901细胞增殖能力的影响 | 第56-57页 |
·ANXA2-siRNA对SGC-7901细胞凋亡的影响 | 第57-58页 |
·ANXA2-siRNA对FAK mRNA和蛋白表达水平的影响 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-64页 |
总结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士学位期间的科研成果 | 第75页 |