| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1 柑橘育种的研究进展 | 第15-23页 |
| ·柑橘常规育种研究 | 第15页 |
| ·柑橘转基因育种研究 | 第15-22页 |
| ·再生体系的建立 | 第16-17页 |
| ·基因转化的方法研究 | 第17-18页 |
| ·导入的基因 | 第18-22页 |
| ·柑橘转基因研究存在的主要问题及今后发展趋势 | 第22-23页 |
| ·建立稳定、高效的再生转化体系 | 第22-23页 |
| ·成年态再生体系的建立 | 第23页 |
| ·柑橘转基因育种的发展趋势 | 第23页 |
| 2 转录因子研究进展 | 第23-29页 |
| ·bZIP类转录因子 | 第24页 |
| ·WRKY类转录因子 | 第24页 |
| ·MYB类转录因子 | 第24-25页 |
| ·ERF类转录因子 | 第25-27页 |
| ·PR蛋白 | 第25-26页 |
| ·ERF类转录因子的研究进展 | 第26-27页 |
| ·转录因子的作用 | 第27-29页 |
| ·提高植物抗寒性 | 第27-28页 |
| ·提高植物抗旱和耐盐性 | 第28页 |
| ·提高植物抗病性 | 第28-29页 |
| 3 单性结实研究进展 | 第29-32页 |
| 4 本研究的主要目的和意义 | 第32-33页 |
| 5 主要技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 糖橙实生态节间茎段再生体系的建立 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·试验材料 | 第34页 |
| ·试验方法和培养基 | 第34-36页 |
| ·不同的苗龄对糖橙实生茎段不定芽分化情况的影响 | 第34-35页 |
| ·不同暗培养时间对糖橙实生茎段不定芽分化情况的影响 | 第35页 |
| ·不定芽诱导培养基 | 第35页 |
| ·增殖培养基 | 第35-36页 |
| ·生根培养基 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-41页 |
| ·不同苗龄的节间茎段对不定芽再生的影响 | 第36页 |
| ·不同暗培养时间对不定芽再生的影响 | 第36-37页 |
| ·不同6-BA浓度对实生态糖橙茎段的再生影响 | 第37-39页 |
| ·改良的糖橙实生态茎段不定芽的再生方法 | 第39-40页 |
| ·不定芽的增殖培养 | 第40页 |
| ·不同浓度IBA、GA3和NAA对糖橙不定芽生根的影响 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| ·不同培养条件对不定芽诱导的影响 | 第41-42页 |
| ·6-BA对不定芽诱导的影响 | 第42-43页 |
| ·不同激素组合对不定芽增值和生根的影响 | 第43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 糖橙成年态节间茎段再生体系的建立 | 第44-53页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| ·植物材料的选择 | 第44-45页 |
| ·外植体消毒的方法 | 第45页 |
| ·不同暗培养时间对柑橘成年态节间茎段的诱导 | 第45-46页 |
| ·不同激素浓度对成年态茎段再生的影响 | 第46页 |
| ·不定芽的嫁接 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-51页 |
| ·不同灭菌方法对灭菌效果的影响 | 第47-48页 |
| ·不同暗培养时间对成年态的诱导 | 第48-49页 |
| ·不同激素浓度对糖橙成年态不定芽再生的影响 | 第49-50页 |
| ·不同嫁接方法对糖橙成年态不定芽成活率的影响 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| ·不同消毒方法对降低柑橘成年态枝条污染率的影响 | 第51页 |
| ·不同培养对柑橘实生态茎段再生率的影响 | 第51-52页 |
| ·不同嫁接方法对柑橘不定芽嫁接成活率的影响 | 第52页 |
| 4 小结 | 第52-53页 |
| 第四章 糖橙转化体系的建立和DefH9-iaaM基因的导入 | 第53-63页 |
| 1 材料与方法 | 第53-56页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·试验主要试剂和仪器 | 第53-54页 |
| ·试验主要试剂 | 第53-54页 |
| ·试验主要仪器 | 第54页 |
| ·主要培养基配方和培养方式 | 第54页 |
| ·卡那霉素筛选浓度的确定 | 第54页 |
| ·农杆菌菌株与质粒 | 第54页 |
| ·农杆菌的转化 | 第54-55页 |
| ·分子检测 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-61页 |
| ·实生态糖橙茎段卡那霉素的筛选 | 第56-57页 |
| ·成年态糖橙茎段卡那霉素的筛选 | 第57页 |
| ·农杆菌转化过程中浸染时间的优化 | 第57-58页 |
| ·再生和嫁接 | 第58页 |
| ·DNA质量检测 | 第58-59页 |
| ·PCR检测 | 第59-60页 |
| ·转DefH9-iaaM基因糖橙的形态学观测 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| ·卡那霉素的筛选 | 第61页 |
| ·农杆菌浸染时间对转化率高低的影响 | 第61页 |
| ·PCR检测和形态学分析 | 第61-62页 |
| 4 小结 | 第62-63页 |
| 第五章 将TERF1基因导入糖橙的研究 | 第63-77页 |
| 1 材料与方法 | 第63-69页 |
| ·植物材料的准备 | 第63页 |
| ·培养基和试剂的准备 | 第63-64页 |
| ·农杆菌菌株的准备 | 第64-65页 |
| ·质粒的提取 | 第64页 |
| ·EHA105感受态细胞的制备 | 第64页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第64-65页 |
| ·PCR鉴定 | 第65页 |
| ·实生糖橙茎段的转化和再生 | 第65页 |
| ·分子检测 | 第65-66页 |
| ·Southern杂交检测 | 第66-69页 |
| ·探针的标记 | 第66-67页 |
| ·DNA的大量提取及酶解 | 第67-68页 |
| ·DNA的电泳和变性 | 第68页 |
| ·转膜 | 第68页 |
| ·预杂交 | 第68页 |
| ·杂交 | 第68-69页 |
| ·显影和定影 | 第69页 |
| 2 结果和分析 | 第69-75页 |
| ·质粒的提取和检测 | 第69-70页 |
| ·阳性转化菌落的筛选 | 第70页 |
| ·含有TERF1基因的两种农杆菌菌株浸染能力的比较 | 第70-71页 |
| ·抗性芽的嫁接 | 第71页 |
| ·拟转化植株的分子鉴定 | 第71-72页 |
| ·拟转TERF1基因糖橙的形态学分析 | 第72-73页 |
| ·RT-PCR检测 | 第73-74页 |
| ·Southern杂交 | 第74-75页 |
| ·探针的检测 | 第74页 |
| ·DNA的检测和酶切检测 | 第74-75页 |
| ·Southern杂交检测 | 第75页 |
| 3 讨论 | 第75-76页 |
| ·农杆菌质粒的提取和导入 | 第75页 |
| ·不同农杆菌菌株对糖橙茎段的浸染能力 | 第75-76页 |
| ·分子检测 | 第76页 |
| 4 小结 | 第76-77页 |
| 第六章 转TERF1基因糖橙的抗病性检测 | 第77-86页 |
| 1 材料与方法 | 第78-79页 |
| ·材料 | 第78页 |
| ·病原菌的活化 | 第78页 |
| ·溃疡病的接种方法 | 第78-79页 |
| ·炭疽病的接种方法 | 第79页 |
| ·溃疡病的分级标准和抗病性评价 | 第79页 |
| ·炭疽病的分级标准和抗病性评价 | 第79页 |
| ·发病率的计算方法 | 第79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-83页 |
| ·转基因株系叶片对柑橘溃疡病的离体检测结果 | 第79-81页 |
| ·转基因株系叶片对柑橘炭疽病的离体检测结果 | 第81-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| ·转基因植株对溃疡病的接种反应 | 第83-84页 |
| ·转基因植株对炭疽病的接种反应 | 第84-85页 |
| 4 小结 | 第85-86页 |
| 主要结论与创新之处 | 第86-89页 |
| 1 主要结论 | 第86-88页 |
| 2 创新之处 | 第88页 |
| 3 下一步工作设想 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 个人简历 | 第104页 |
