| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-26页 |
| ·β-甘露聚糖酶的研究进展 | 第13-22页 |
| ·β-甘露聚糖酶的作用方式及水解产物 | 第13-14页 |
| ·β-甘露聚糖酶的来源 | 第14-15页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分离纯化与酶学性质 | 第15-19页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分子生物学研究 | 第19-22页 |
| ·β-甘露聚糖酶的应用 | 第22-24页 |
| ·β-甘露聚糖酶在饲料中的应用 | 第23页 |
| ·β-甘露聚糖酶在造纸工业中的应用 | 第23页 |
| ·β-甘露聚糖酶在食品和医药中的应用 | 第23-24页 |
| ·β-甘露聚糖酶在其他方面的应用 | 第24页 |
| ·研究的背景、思路及意义 | 第24-26页 |
| 第二章 实验设备及材料 | 第26-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-33页 |
| ·菌种及载体 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-28页 |
| ·试剂与母液配制 | 第28-31页 |
| ·酶类 | 第31页 |
| ·试剂盒 | 第31页 |
| ·其它 | 第31-33页 |
| 第三章 实验方法 | 第33-49页 |
| 第一部分 产β-甘露聚糖酶A.tabescenaEJLY2098菌体培养 | 第33页 |
| 第二部分 β-甘露聚糖酶的纯化条件确立及酶学性质分析 | 第33-41页 |
| ·β-甘露聚糖酶的纯化条件确立 | 第33-35页 |
| ·β-甘露聚糖酶的活力测定 | 第35-36页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第36-37页 |
| ·47K组分的酶作用产物分析 | 第37-38页 |
| ·重组β-甘露聚糖酶与A.tabescensEJLY2098产β-甘露聚糖酶活性分析 | 第38页 |
| ·47K组分的酶学性质分析 | 第38-40页 |
| ·酶分子量分析 | 第38-39页 |
| ·温度和pH对酶活力的影响 | 第39页 |
| ·酶的热稳定性和pH稳定性 | 第39-40页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第40页 |
| ·47K的等电点的确定 | 第40-41页 |
| 第三部分 β-甘露聚糖酶79K(P2)的基因克隆 | 第41-49页 |
| ·β-甘露聚糖酶的Native-PAGE活性鉴定 | 第41-42页 |
| ·β-甘露聚糖酶的N端序列测定 | 第42-43页 |
| ·蛋白质的转移印迹 | 第42-43页 |
| ·蛋白质的N端序列测定 | 第43页 |
| ·总RNA的提取 | 第43页 |
| ·RT-PCR | 第43-49页 |
| ·引物设计 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR步骤 | 第44-45页 |
| ·切胶回收PCR产物 | 第45-46页 |
| ·TA克隆 | 第46-48页 |
| ·测序 | 第48-49页 |
| 第四章 实验结果 | 第49-68页 |
| 第一部分 产β-甘露聚糖酶A.tabescensEJLY2098的菌体培养 | 第49页 |
| 第二部分 β-甘露聚糖酶的纯化条件确立及酶学性质分析 | 第49-60页 |
| ·β-甘露聚糖酶酶的纯化条件确立 | 第49-55页 |
| ·分子筛Sephadex G-25、离子交换和疏水层析组合方案 | 第49-51页 |
| ·分子筛Sephadex G-25、离子交换和分子筛Sephadex G-75组合方案 | 第51-53页 |
| ·离子交换 | 第53-55页 |
| ·β-甘露聚糖酶47K酶作用产物分析 | 第55页 |
| ·重组β-甘露聚糖酶与A.tabescensEJLY2098产β-甘露聚糖酶活性分析 | 第55-57页 |
| ·47K的酶学性质分析 | 第57-59页 |
| ·酶分子量分析 | 第57页 |
| ·温度和pH对酶活力的影响 | 第57-58页 |
| ·酶的热稳定性和pH稳定性 | 第58-59页 |
| ·金属离子对β-甘露聚糖酶47K酶活力的影响 | 第59页 |
| ·47K的等电点的确定 | 第59-60页 |
| 第三部分 β-甘露聚糖酶79K(P2)的基因克隆 | 第60-68页 |
| ·β-甘露聚糖酶的Native-PAGE活性鉴定 | 第60-61页 |
| ·蛋白质的N端序列测定 | 第61-64页 |
| ·蛋白质的转移印记 | 第61-63页 |
| ·蛋白质N端序列比对 | 第63-64页 |
| ·总RNA的提取 | 第64页 |
| ·RT-PCR | 第64-68页 |
| ·RT-PCR产物的电泳检测 | 第64-65页 |
| ·克隆片段双酶切鉴定 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR产物的测序结果 | 第66-67页 |
| ·序列的blastx结果 | 第67-68页 |
| 第五章 讨论 | 第68-73页 |
| 第一部分 β-甘露聚糖酶的纯化条件确立及酶学性质分析 | 第68-71页 |
| ·β-甘露聚糖酶的纯化条件确立 | 第68-70页 |
| ·分子筛Sephadex G-25、离子交换和疏水层析组合方案 | 第68-69页 |
| ·分子筛Sephadex G-25、离子交换和分子筛Sephadex G-75组合方案 | 第69页 |
| ·离子交换 | 第69-70页 |
| ·47K的酶学性质分析 | 第70-71页 |
| ·酶分子量分析 | 第70页 |
| ·温度和pH对酶活力的影响 | 第70页 |
| ·酶的热稳定性和pH稳定性 | 第70-71页 |
| 第二部分 β-甘露聚糖酶79K(P2)的基因克隆 | 第71-73页 |
| ·引物设计 | 第71页 |
| ·基因克隆 | 第71-73页 |
| 小结与展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
