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西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum)rd22基因的克隆、表达与功能验证

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 绪论第8-17页
   ·植物脱水应答基因研究进展第8-11页
   ·ABA应答基因第11-14页
     ·脱落酸(abscisic acid,ABA)第11页
     ·ABA对基因表达的调控第11-14页
   ·脱水应答蛋白RD22与BURP蛋白家族第14-15页
   ·关于西伯利亚蓼的研究第15页
   ·本研究的目的与意义第15-17页
2 盐胁迫下西伯利亚蓼rd22基因的克隆及表达特性的研究第17-33页
   ·材料第17-18页
     ·植物材料第17页
     ·菌株与质粒第17页
     ·酶及生化试剂第17页
     ·PCR引物第17-18页
     ·仪器设备第18页
   ·方法第18-23页
     ·西伯利亚蓼总RNA的提取第18页
     ·cDNA第一链的合成第18-19页
     ·rd22基因的3′RACE和5′RACE第19-20页
     ·RACE片段的克隆与测序第20-21页
     ·rd22全长cDNA的克隆第21页
     ·rd22基因的序列分析第21-22页
     ·rd22基因在西伯利亚蓼中的表达特性研究第22-23页
   ·结果与分析第23-31页
     ·总RNA提取质量鉴定第23-24页
     ·rd22基因的3′RACE、5′RACE及全长基因电泳结果第24页
     ·rd22全长基因的序列分析第24-29页
     ·西伯利亚蓼rd22基因检测探针的标记第29-30页
     ·西伯利亚蓼不同组织中rd22基因的RT-PCR第30页
     ·西伯利亚蓼不同组织中rd22基因的表达特性第30页
     ·不同盐胁迫时间下西伯利亚蓼rd22基因的表达特性第30-31页
   ·本章小结第31-33页
3 西伯利亚蓼rd22基因在烟草中的功能分析第33-46页
   ·材料与试剂第33页
     ·材料第33页
     ·菌株与质粒第33页
     ·酶及生化试剂第33页
     ·仪器设备第33页
   ·方法第33-38页
     ·植物表达载体pROK-rd22和pROK-burp的构建及转化农杆菌第33-35页
     ·烟草的遗传转化第35页
     ·转基因烟草植株的分子鉴定第35-36页
     ·转基因烟草植株的耐盐性分析第36-38页
   ·结果与分析第38-44页
     ·植物表达载体pROK-rd22及pROK-burp的鉴定第38页
     ·农杆菌重组质粒的PCR鉴定第38-39页
     ·烟草的遗传转化第39页
     ·转基因烟草植株的分子鉴定第39-40页
     ·转基因烟草植株的耐盐碱性分析第40-44页
   ·本章小结第44-46页
4 讨论第46-50页
   ·RNA提取过程中应注意的问题第46-47页
     ·RNA降解是RNA提取的致命问题第46页
     ·水溶性细胞代谢物的去除第46-47页
     ·RNA的沉淀第47页
   ·对西伯利亚蓼rd22基因的生物信息学分析第47-48页
   ·rd22基因在西伯利亚蓼中的表达第48页
   ·rd22基因在转基因烟草中的表达第48-49页
   ·转基因植株的耐盐性评价第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-57页
攻读学位期间发表的学术论文第57-58页
附录第58-61页
致谢第61-62页

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