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白色念珠菌Hsp60的融合表达及免疫活性的研究

提要第1-10页
前言第10-12页
第一章 文献回顾第12-23页
 一、hsp60 的分类和分布第12-13页
 二、hsp60 的基本功能第13-14页
  1. hsp60 的转运功能第13页
  2. hsp60 的细胞保护功能第13-14页
 三、hsp60 与免疫第14-19页
  1. 作为危险信号的hsp60第14页
  2. hsp60 与自身免疫病第14-15页
  3. hsp60 在自身免疫性关节炎动物模型中的作用第15-16页
  4. hsp60 在免疫耐受方面的作用机制第16-17页
  5. hsp60 与临床免疫第17-18页
  6. hsp60 与基础免疫第18-19页
 四、hsp60 作用的分子机制第19-20页
 五、hsp60 在疫苗方面的研究第20-23页
第二章 材料和方法第23-47页
 一、实验材料第23-29页
 二、实验方法第29-47页
   ·白色念珠菌的培养第29页
   ·总RNA 的提取第29-30页
   ·对提取的总RNA 进行电泳检测第30-31页
   ·RT-PCR 反应第31-33页
   ·对RT-PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳检测第33页
   ·hsp60 RT-PCR 产物回收及琼脂糖凝胶电泳检测第33页
   ·克隆载体的构建及鉴定第33-37页
   ·pET286 - hsp60 表达载体的构建第37-39页
   ·重组白色念珠菌hsp60融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达第39页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第39-41页
   ·Western Blot第41-42页
   ·镍亲和层析法纯化重组蛋白hsp60第42-43页
   ·动物免疫第43-44页
   ·ELISA 法检测小鼠血清抗体效价第44-45页
   ·淋巴细胞转化试验流程第45-46页
   ·动物保护实验第46页
   ·白色念珠菌攻击实验第46页
     ·统计学处理方法第46-47页
第三章 实验结果第47-65页
 一、总RNA提取第47页
 二、RT-PCR产物第47-48页
 三、RT-PCR产物纯化第48页
 四、白色念珠菌 hsp60 基因 TA 克隆载体的成功构建第48-55页
 五、白色念珠菌hsp60基因表达载体的成功构建第55-59页
 六、重组hsp60融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达、纯化及鉴定第59-60页
 七、免疫小鼠抗融合蛋白 hsp60 特异性抗体效价第60-61页
 八、免疫小鼠淋巴细胞转化实验第61-62页
 九、免疫小鼠保护实验第62-65页
第四章 讨论第65-72页
 一、白色念珠菌感染背景资料及靶蛋白的选择第65-66页
 二、总RNA 的提取第66-67页
 三、表达系统的选择第67-69页
 四、融合蛋白hsp60 的免疫活性及其免疫机制第69-72页
结论第72-73页
本课题创新性的自我评价第73-74页
参考文献第74-91页
攻博期间发表的学术论文第91-93页
中文摘要第93-96页
英文摘要第96-100页
致谢第100页

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