中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
第一部分 文献综述 | 第8-19页 |
引言 | 第8-9页 |
一、生长素信号转导的关键因子 | 第9-15页 |
1. 生长素受体 | 第9-10页 |
2. SCF~(TIR1) | 第10-11页 |
3. Aux/IAA 蛋白的研究 | 第11-12页 |
4. 生长素反应因子(ARF)的研究 | 第12-14页 |
5. 生长素早期反应基因与 AuxRE | 第14-15页 |
二、生长素调节基因表达的机理 | 第15-16页 |
三、IAA2 基因的研究进展 | 第16-17页 |
四、本论文研究的内容和意义 | 第17-19页 |
第二部分 实验材料和方法 | 第19-31页 |
一、实验材料 | 第19-22页 |
1. 报告株系 | 第19页 |
2. 种植土 | 第19页 |
3. 种子 | 第19页 |
4. 质粒 | 第19-21页 |
5. 植物激素 | 第21页 |
6. 菌株 | 第21-22页 |
7. 工具酶 | 第22页 |
8. DNA 凝胶电泳回收试剂盒 | 第22页 |
9. 拟南芥DNA 小量制备相关试剂 | 第22页 |
10. 生化试剂 | 第22页 |
二、方法 | 第22-31页 |
1. 拟南芥的培养条件 | 第22-24页 |
2. 拟南芥叶片 DNA 小量制备 | 第24页 |
3. 载体构建 | 第24-29页 |
4. 拟南芥转基因系统建立 | 第29页 |
5. 报告株系处理方法 | 第29-30页 |
6. GUS 染色 | 第30页 |
7. IAA2 蛋白显微观察 | 第30-31页 |
第三部分 结果与分析 | 第31-38页 |
一、IAA2 启动子-报告基因质粒构建 | 第31-32页 |
1. 拟南芥基因组DNA 的提取和检测 | 第31页 |
2. IAA2 基因启动子的克隆 | 第31页 |
3. 启动子载体构建 | 第31-32页 |
二、用GATEWAY 体系构建的 IAA2 融合蛋白 | 第32-34页 |
1. 入门载体的构建 | 第32页 |
2. N-端,C-端融合载体的构建 | 第32-34页 |
三、pIAA2L::GUS 转基因株系获得 | 第34页 |
四、pIAA2L::GUS 表达情况 | 第34页 |
1. 发育过程中pIAA2L::GUS 表达情况 | 第34页 |
2. pIAA2L::GUS 影响生长素能力的研究 | 第34页 |
五、IAA2 蛋白亚细胞定位 | 第34-38页 |
第四部分 讨论 | 第38-41页 |
一、报告基因简介 | 第38页 |
二、pCAMBIA1303 构建的启动子-报告基因载体表达失败的原因分析 | 第38-39页 |
三、启动子表达部位 | 第39页 |
四、生长素响应能力 | 第39页 |
五、EGFP N-端、C-端融合并不对蛋白核定位造成影响 | 第39页 |
六、IAA2 融合蛋白的亚细胞定位 | 第39-40页 |
七、IAA2 蛋白为核蛋白 | 第40-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
致谢 | 第46页 |