| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 1.第一章 综述 | 第12-27页 |
| 1.HBV及其相关的疾病 | 第12-15页 |
| ·肝病毒的生物学特征 | 第12-13页 |
| ·乙肝病毒的基因组结构 | 第13-15页 |
| 2.乙肝表面抗原的编码基因 | 第15页 |
| ·PreS1基因 | 第15页 |
| ·PreS2基因 | 第15页 |
| ·S基因 | 第15页 |
| 3.乙肝病毒检测方法的研究进展 | 第15-19页 |
| ·基于酶联免疫实验(ELISA)的血清标志物的检测 | 第15-16页 |
| ·乙肝病毒HBV的分子生物学检测 | 第16-19页 |
| 4 生物素一链亲和素系统简介 | 第19-20页 |
| ·生物素与链亲和素反应原理 | 第19页 |
| ·生物素与链亲和素反应系统在核酸检测中的应用 | 第19-20页 |
| 5.等温扩增检测技术 | 第20-27页 |
| ·等温扩增检测技术的原理 | 第20-22页 |
| ·等温扩增检测技术的特点 | 第22-23页 |
| ·等温扩增检测技术的应用 | 第23-27页 |
| 第二章 实验一 等温扩增检测HBV S基因方法的建立 | 第27-44页 |
| 1 材料 | 第27-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·常用的材料与试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂配方 | 第27-29页 |
| ·引物及探针 | 第29页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第29页 |
| 2.方法 | 第29-35页 |
| ·HBV S基因的表达载体GS115-pPICZS酵母总RNA提取 | 第29-30页 |
| ·体外转录法制备HBV S基因mRNA标准品 | 第30-32页 |
| ·磁粒捕获HBV S基因mRNA | 第32页 |
| ·等温扩增HBV S基因mRNA | 第32-33页 |
| ·等温扩增产物的检测 | 第33页 |
| ·等温扩增反应体系的优化 | 第33-34页 |
| ·等温扩增反应的扩增特异性 | 第34页 |
| ·等温扩增反应的敏感性 | 第34页 |
| ·等温扩增反应与逆转录PCR敏感性的比较 | 第34-35页 |
| 3.结果与分析 | 第35-41页 |
| ·酵母总RNA温育后电泳结果 | 第35页 |
| ·HBV S gene mRNA标准品电泳结果 | 第35-36页 |
| ·等温扩增条件的优化结果 | 第36-37页 |
| ·等温扩增反应的特异性 | 第37-38页 |
| ·等温扩增反应的敏感性 | 第38-40页 |
| ·等温扩增反应与逆转录PCR敏感性的比较 | 第40-41页 |
| 4.讨论 | 第41-44页 |
| ·链亲和素磁粒富集靶序列 | 第41页 |
| ·等温扩增检测RNA体系的建立 | 第41-44页 |
| 第三章 实验二 等温扩增检测HBV S基因方法的临床应用的初步研究 | 第44-52页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·临床标本 | 第44页 |
| ·常用的材料与试剂 | 第44页 |
| ·主要试剂配方 | 第44页 |
| ·引物及探针 | 第44-45页 |
| ·仪器设备 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-48页 |
| ·临床标本处理条件的优化 | 第45-46页 |
| ·磁粒杂交纯化乙肝病毒DNA | 第46-47页 |
| ·等温扩增HBV DNA | 第47页 |
| ·等温扩增产物的检测 | 第47-48页 |
| ·等温扩增反应与PCR敏感性的比较 | 第48页 |
| 3.结果与分析 | 第48-50页 |
| ·临床标本处理条件的优化 | 第48-49页 |
| ·等温扩增反应与PCR敏感性的比较 | 第49-50页 |
| 4.讨论 | 第50-52页 |
| ·血清中HBV DNA的提取 | 第50-51页 |
| ·等温反应检测血清标本中HBV DNA样本体系的建立 | 第51页 |
| ·等温扩增技术的应用价值 | 第51-52页 |
| 小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
