| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-25页 |
| ·蛋白质结晶学理论 | 第10-20页 |
| ·蛋白质晶体学发展历史 | 第10-11页 |
| ·蛋白质的结晶原理和方法 | 第11-12页 |
| ·影响蛋白质晶体生长的因素 | 第12-17页 |
| ·蛋白质结晶条件的筛选和优化 | 第17-18页 |
| ·X-射线衍射数据收集和处理 | 第18-20页 |
| ·蛋白质分离纯化的原则和方法 | 第20-22页 |
| ·圆二色法 | 第22-23页 |
| ·Znf-bed3 蛋白的相关研究 | 第23-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-41页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·菌种和质粒 | 第25页 |
| ·分子生物学常用的工具酶 | 第25页 |
| ·常用生化试剂 | 第25-28页 |
| ·分子量标准物 | 第28页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR）试剂 | 第28页 |
| ·仪器和设备 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-41页 |
| ·培养基的配制 | 第29-30页 |
| ·菌种保存方法 | 第30页 |
| ·质粒 DNA 的提取方法 | 第30-31页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第31-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
| ·将 PCR 产物连入质粒 | 第33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第33-34页 |
| ·用X-gal 和IPTG 筛选细菌菌落 | 第34页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第34-36页 |
| ·Western 印迹 | 第36-37页 |
| ·用固化 Ni~(2+)吸收色谱纯化带组氨酸标签的蛋白 | 第37-38页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第38-39页 |
| ·蛋白质结晶方法－悬滴式扩散结晶法 | 第39页 |
| ·其它实验、仪器操作及相关蛋白质的生物信息学分析 | 第39-41页 |
| 第三章 Znf-bed3 蛋白的克隆和表达 | 第41-50页 |
| ·引言 | 第41-42页 |
| ·Bed3 基因的克隆 | 第42-44页 |
| ·实验方法与流程 | 第42页 |
| ·Bed3 基因克隆的实验结果 | 第42-44页 |
| ·Znf-bed3 融合蛋白的表达 | 第44-46页 |
| ·实验方法与流程 | 第44页 |
| ·Znf-bed3 融合蛋白表达的实验结果 | 第44-46页 |
| ·结果分析讨论 | 第46-50页 |
| ·载体的选择 | 第46页 |
| ·PCR 中寡核苷酸引物的设计 | 第46-47页 |
| ·表达菌株的选择 | 第47-48页 |
| ·表达的Znf-bed3 融合蛋白在 SDS-PAGE 电泳中条带位置与实际分子量不符 | 第48-50页 |
| 第四章 Znf-bed3 蛋白的纯化和结晶 | 第50-68页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·使用不同纯化方法对Znf-bed3 融合蛋白进行分离纯化 | 第50-60页 |
| ·用固化Ni2+纯化Znf-bed3 融合蛋白 | 第50-55页 |
| ·使用变复性方法进行分离 | 第55-57页 |
| ·基于醋酸破菌液的分离 | 第57-60页 |
| ·圆二色法检测 | 第60-62页 |
| ·初步结晶结果 | 第62-63页 |
| ·结果分析讨论 | 第63-68页 |
| ·使用镍柱对Znf-bed3 融合蛋白进行分离 | 第63-64页 |
| ·镍柱后分离 | 第64-65页 |
| ·从包涵体中纯化表达蛋白 | 第65-66页 |
| ·醋酸作为破菌液 | 第66-67页 |
| ·蛋白质溶液的浓缩方法 | 第67-68页 |
| 第五章 总结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
