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基于聚乙烯二氨基三嗪的氢键型转基因载体

摘要第1-3页
ABSTRACT第3-7页
第一章 绪论第7-24页
   ·引言第7-8页
   ·非病毒载体第8-20页
     ·脂质体第8-9页
     ·聚乙烯亚胺第9-11页
       ·聚乙烯亚胺(PEI)第9-10页
       ·PEI-半乳糖载体第10-11页
       ·PEI-RGD 载体第11页
     ·壳聚糖第11-15页
       ·壳聚糖(CS)第11-12页
       ·脱氧胆酸改性壳聚糖衍生物第12-13页
       ·棕榈酰化改性壳聚糖衍生物第13页
       ·烷基化壳聚糖(ACS)衍生物第13-14页
       ·壳聚糖其他衍生物第14-15页
     ·温敏性转基因载体第15-20页
       ·热敏脂质体第15-16页
       ·聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)基载体第16-17页
       ·壳聚糖-异丙基丙烯酰胺第17-18页
       ·聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)-聚精氨酸(PArg)载体第18-19页
       ·聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)-丙烯胺共聚物(PNI-AAM)及其胍基化衍生物(PNI-AAM-G)载体第19-20页
     ·其它非病毒载体第20页
   ·基于氢键与 DNA 作用的非病毒载体第20-22页
     ·裂皱菌多糖(SPG)转基因载体第20-21页
     ·大环结构糖类转基因载体第21-22页
   ·论文工作的提出第22-24页
第二章 PVDT 基非病毒转基因载体的制备和表征第24-31页
   ·引言第24页
   ·实验部分第24-25页
     ·实验药品第24页
     ·PVDT 基转基因载体的制备第24-25页
       ·合成均聚PVDT第24页
       ·合成均聚PVP第24-25页
       ·合成PVDT-PVP 共聚物第25页
     ·PVDT 基转基因载体的表征第25页
       ·核磁共振氢谱表征(~1H NMR)第25页
       ·凝胶渗透色谱表征(GPC)第25页
       ·紫外分光光度计定量PVDT 基聚合物浓度第25页
   ·结果与讨论第25-30页
     ·PVDT 基聚合物的制备第25-26页
     ·PVDT 基聚合物的表征第26-30页
       ·核磁共振氢谱(~1H NMR)确定共聚物共聚比第26-28页
       ·凝胶渗透色谱(GPC)测定的聚合物分子量和分布第28页
       ·未知PVDT 基聚合物浓度定量第28-30页
   ·结论第30-31页
第三章 PVDT 基聚合物/pDNA 复合物的表征第31-48页
   ·引言第31页
   ·实验部分第31-35页
     ·试剂耗材第31-32页
     ·实验仪器第32页
     ·菌体的培养与质粒的提取第32-33页
       ·液体培养基(LB)配制第32页
       ·菌体培养(摇菌)第32页
       ·质粒提取第32-33页
     ·PVDT 基聚合物/pDNA 复合物的制备第33-34页
     ·琼脂糖凝胶电泳第34页
     ·EB 置换实验第34页
     ·圆二色谱(CD)实验第34页
     ·透射电镜(TEM)第34-35页
     ·DNA 酶(DNase I)酶解实验第35页
     ·浊度检测第35页
   ·结果与讨论第35-47页
     ·凝胶电泳考察 PVDT 基载体与pDNA 的复合第35-37页
     ·EB 置换实验考察PVDT 基载体与pDNA 的复合第37-39页
     ·圆二色谱(CD)考察 PVDT 基载体对pDNA 构象的影响第39-44页
     ·透射电镜(TEM)观察 PVDT 基载体对pDNA 的缩合作用第44-46页
     ·PVDT 基载体保护pDNA 的抗酶解作用第46-47页
     ·PVDT 基载体/pDNA 复合物的稳定性第47页
   ·结论第47-48页
第四章 PVDT 基聚合物/pDNA 复合物的体外细胞转染第48-58页
   ·引言第48页
   ·实验部分第48-53页
     ·试剂耗材第48-49页
     ·实验仪器第49页
     ·COS-1 细胞的培养第49-51页
       ·培养液的制备第49-50页
       ·细胞培养第50-51页
     ·体外转染 COS-1 细胞第51页
     ·荧光素酶(Luciferase)活性的测定第51-52页
     ·BCA 法测总蛋白第52-53页
     ·加强绿色荧光蛋白(EGFP)表达的检测第53页
     ·MTT 法考察载体的细胞毒性第53页
   ·结果与讨论第53-57页
     ·PVDT 基载体/pDNA 复合物有效转染 COS-1 细胞第53-56页
     ·PVDT 基载体的细胞毒性第56-57页
   ·结论第57-58页
全文结论第58-59页
参考文献第59-65页
攻读硕士学位期间完成的学术论文第65-66页
致谢第66页

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