摘要 | 第1-3页 |
ABSTRACT | 第3-7页 |
第一章 绪论 | 第7-24页 |
·引言 | 第7-8页 |
·非病毒载体 | 第8-20页 |
·脂质体 | 第8-9页 |
·聚乙烯亚胺 | 第9-11页 |
·聚乙烯亚胺(PEI) | 第9-10页 |
·PEI-半乳糖载体 | 第10-11页 |
·PEI-RGD 载体 | 第11页 |
·壳聚糖 | 第11-15页 |
·壳聚糖(CS) | 第11-12页 |
·脱氧胆酸改性壳聚糖衍生物 | 第12-13页 |
·棕榈酰化改性壳聚糖衍生物 | 第13页 |
·烷基化壳聚糖(ACS)衍生物 | 第13-14页 |
·壳聚糖其他衍生物 | 第14-15页 |
·温敏性转基因载体 | 第15-20页 |
·热敏脂质体 | 第15-16页 |
·聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)基载体 | 第16-17页 |
·壳聚糖-异丙基丙烯酰胺 | 第17-18页 |
·聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)-聚精氨酸(PArg)载体 | 第18-19页 |
·聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)-丙烯胺共聚物(PNI-AAM)及其胍基化衍生物(PNI-AAM-G)载体 | 第19-20页 |
·其它非病毒载体 | 第20页 |
·基于氢键与 DNA 作用的非病毒载体 | 第20-22页 |
·裂皱菌多糖(SPG)转基因载体 | 第20-21页 |
·大环结构糖类转基因载体 | 第21-22页 |
·论文工作的提出 | 第22-24页 |
第二章 PVDT 基非病毒转基因载体的制备和表征 | 第24-31页 |
·引言 | 第24页 |
·实验部分 | 第24-25页 |
·实验药品 | 第24页 |
·PVDT 基转基因载体的制备 | 第24-25页 |
·合成均聚PVDT | 第24页 |
·合成均聚PVP | 第24-25页 |
·合成PVDT-PVP 共聚物 | 第25页 |
·PVDT 基转基因载体的表征 | 第25页 |
·核磁共振氢谱表征(~1H NMR) | 第25页 |
·凝胶渗透色谱表征(GPC) | 第25页 |
·紫外分光光度计定量PVDT 基聚合物浓度 | 第25页 |
·结果与讨论 | 第25-30页 |
·PVDT 基聚合物的制备 | 第25-26页 |
·PVDT 基聚合物的表征 | 第26-30页 |
·核磁共振氢谱(~1H NMR)确定共聚物共聚比 | 第26-28页 |
·凝胶渗透色谱(GPC)测定的聚合物分子量和分布 | 第28页 |
·未知PVDT 基聚合物浓度定量 | 第28-30页 |
·结论 | 第30-31页 |
第三章 PVDT 基聚合物/pDNA 复合物的表征 | 第31-48页 |
·引言 | 第31页 |
·实验部分 | 第31-35页 |
·试剂耗材 | 第31-32页 |
·实验仪器 | 第32页 |
·菌体的培养与质粒的提取 | 第32-33页 |
·液体培养基(LB)配制 | 第32页 |
·菌体培养(摇菌) | 第32页 |
·质粒提取 | 第32-33页 |
·PVDT 基聚合物/pDNA 复合物的制备 | 第33-34页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
·EB 置换实验 | 第34页 |
·圆二色谱(CD)实验 | 第34页 |
·透射电镜(TEM) | 第34-35页 |
·DNA 酶(DNase I)酶解实验 | 第35页 |
·浊度检测 | 第35页 |
·结果与讨论 | 第35-47页 |
·凝胶电泳考察 PVDT 基载体与pDNA 的复合 | 第35-37页 |
·EB 置换实验考察PVDT 基载体与pDNA 的复合 | 第37-39页 |
·圆二色谱(CD)考察 PVDT 基载体对pDNA 构象的影响 | 第39-44页 |
·透射电镜(TEM)观察 PVDT 基载体对pDNA 的缩合作用 | 第44-46页 |
·PVDT 基载体保护pDNA 的抗酶解作用 | 第46-47页 |
·PVDT 基载体/pDNA 复合物的稳定性 | 第47页 |
·结论 | 第47-48页 |
第四章 PVDT 基聚合物/pDNA 复合物的体外细胞转染 | 第48-58页 |
·引言 | 第48页 |
·实验部分 | 第48-53页 |
·试剂耗材 | 第48-49页 |
·实验仪器 | 第49页 |
·COS-1 细胞的培养 | 第49-51页 |
·培养液的制备 | 第49-50页 |
·细胞培养 | 第50-51页 |
·体外转染 COS-1 细胞 | 第51页 |
·荧光素酶(Luciferase)活性的测定 | 第51-52页 |
·BCA 法测总蛋白 | 第52-53页 |
·加强绿色荧光蛋白(EGFP)表达的检测 | 第53页 |
·MTT 法考察载体的细胞毒性 | 第53页 |
·结果与讨论 | 第53-57页 |
·PVDT 基载体/pDNA 复合物有效转染 COS-1 细胞 | 第53-56页 |
·PVDT 基载体的细胞毒性 | 第56-57页 |
·结论 | 第57-58页 |
全文结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
攻读硕士学位期间完成的学术论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |