玉米黄早四基因组细菌人工染色体文库的构建
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·我国玉米育种与生产的发展情况 | 第11-14页 |
| ·我国玉米育种生产概况及所面临问题 | 第11-12页 |
| ·生物技术在玉米育种工作中的应用 | 第12页 |
| ·玉米优良自交系黄早四 | 第12-13页 |
| ·黄早四在玉米育种与生产中的重要地位 | 第13-14页 |
| ·基因工程方法分离基因 | 第14-15页 |
| ·细菌人工染色体文库的研究进展 | 第15-23页 |
| ·大片段基因组文库的发展 | 第15-17页 |
| ·BAC文库的发展 | 第17-20页 |
| ·BAC文库的常用分析方法 | 第20页 |
| ·BAC文库的应用 | 第20-23页 |
| ·立题意义及技术路线 | 第23-25页 |
| ·立题意义 | 第23-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-44页 |
| ·实验材料 | 第25-33页 |
| ·供试材料 | 第25页 |
| ·载体与菌株 | 第25-26页 |
| ·主要实验试剂及配制方法 | 第26-32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-38页 |
| ·高纯度、高分子量细胞核DNA的制备 | 第33-34页 |
| ·大片段DNA的获得 | 第34-36页 |
| ·大片段DNA与载体的连接与转化 | 第36-37页 |
| ·大批量转化、挑菌、存储 | 第37页 |
| ·BAC文库的保存与复制 | 第37-38页 |
| ·BAC文库的检测 | 第38-41页 |
| ·插入片段的检测 | 第38-39页 |
| ·BAC克隆稳定性的检测 | 第39页 |
| ·其它细胞器对BAC文库污染状况的检测 | 第39-41页 |
| ·BAC文库的杂交检测 | 第41-44页 |
| ·杂交探针的制备 | 第41-42页 |
| ·高密度杂交膜的制备 | 第42-43页 |
| ·高密度膜菌落原位裂解 | 第43页 |
| ·高密度膜与探针的杂交 | 第43页 |
| ·阳性克隆的鉴别 | 第43-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-51页 |
| ·高效BAC文库构建技术体系的建立 | 第44-50页 |
| ·玉米黄早四高质量大片段DNA的制备 | 第44页 |
| ·部分酶切用量的确定和大量酶切 | 第44-45页 |
| ·大片段DNA透析袋回收后的浓度检测 | 第45-46页 |
| ·连接产物的转化 | 第46-47页 |
| ·BAC文库插入片段大小的检测 | 第47页 |
| ·BAC稳定性检测 | 第47-49页 |
| ·检测BAC是否有细胞器污染 | 第49-50页 |
| ·BAC文库的杂交检测 | 第50-51页 |
| ·杂交探针的制备 | 第50页 |
| ·杂交探针与高密度膜的杂交 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-54页 |
| ·BAC文库的构建 | 第51-52页 |
| ·高分子量DNA胶块的制备 | 第51页 |
| ·胶块DNA的酶切 | 第51页 |
| ·酶切产物的回收 | 第51页 |
| ·连接及转化 | 第51-52页 |
| ·BAC文库的保存 | 第52页 |
| ·BAC文库的鉴定 | 第52-53页 |
| ·BAC文库插入片段大小检测 | 第52页 |
| ·BAC稳定性检测 | 第52页 |
| ·BAC污染的检测 | 第52页 |
| ·BAC文库的覆盖率 | 第52-53页 |
| ·BAC文库的杂交检测 | 第53-54页 |
| 第五章 全文结论 | 第54-55页 |
| ·玉米黄早四BAC文库的构建 | 第54页 |
| ·BAC文库的杂交检测 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
