首页--农业科学论文--农作物论文--薯类作物论文--马铃薯(土豆)论文

利用转基因技术培育马铃薯(Solanum tuberosum L.)高淀粉及抗病新品系

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩略语表第7-13页
第一章 文献综述第13-42页
 1 马铃薯遗传转化研究进展第13-31页
   ·马铃薯转化的再生系统及靶组织的选择第14-15页
     ·愈伤组织再生系统第14页
     ·直接分化再生系统第14-15页
     ·原生质体再生系统第15页
   ·马铃薯遗传转化的方法第15-22页
     ·农杆菌介导的遗传转化第15-20页
       ·农杆菌-植物间基因转移的分子基础第16-17页
       ·农杆菌介导基因转化的方法第17-18页
       ·马铃薯基因工程中农杆菌介导的遗传转化第18-20页
     ·基因枪法遗传转化第20-21页
     ·微束激光穿刺转化法第21页
     ·PEG 介导法第21页
     ·超声波介导法第21-22页
   ·转基因植物中的标记基因第22-31页
     ·植物遗传转化中常用的标记基因第22-23页
     ·标记基因的安全性问题第23页
     ·转基因作物中标记基因的消除第23-25页
     ·目标基因及其产物的安全性问题第25-26页
     ·外源基因在转基因后代中的整合、表达和遗传第26-27页
       ·外源基因在植物体内的整合第26页
       ·转基因植株的遗传行为第26-27页
     ·转基因沉默及对策第27-30页
     ·转基因植物的商业化生产第30-31页
 2 基因工程技术在马铃薯遗传改良上的应用第31-41页
   ·马铃薯淀粉基因工程第32-37页
     ·淀粉在食品及其它工业中的应用第32-33页
     ·淀粉的生物合成第33-34页
     ·ADPG 焦磷酸化酶基因研究与马铃薯高淀粉基因工程第34-37页
       ·AGPase 的功能第34页
       ·AGPase 的定位第34页
       ·AGPase 的酶学第34-35页
       ·AGPase 的分子生物学第35-36页
       ·基因工程提高淀粉含量第36-37页
   ·马铃薯抗病基因工程及广谱抗病策略的应用第37-41页
     ·过敏反应第38页
     ·hrp 基因与抗病的研究应用第38-41页
       ·hrp 基因的遗传组成第38-39页
       ·hrp 基因结构和功能保守性第39页
       ·hrp 基因的表达和调控第39页
       ·hrp 基因产物及其功能第39-40页
       ·hrp 基因与马铃薯广谱抗病基因工程第40-41页
 3 本研究的目的意义第41-42页
第二章 马铃薯再生体系的建立第42-49页
 1 材料与方法第42-44页
   ·材料第42页
     ·植物材料第42页
     ·植物培养基第42页
   ·方法第42-44页
     ·外植体材料的准备第42-43页
       ·马铃薯无菌苗的快繁第43页
       ·马铃薯试管苗的复壮第43页
     ·再生体系的建立第43-44页
       ·茎段和叶片的再生和培养基筛选第43页
       ·芽的分化第43-44页
       ·外植体创伤方式与愈伤的发生第44页
 2 结果与分析第44-47页
   ·茎段、叶片愈伤组织的发生第45-46页
   ·芽的分化第46页
   ·外植体创伤方式与愈伤的发生第46-47页
 3 讨论第47-49页
第三章 农杆菌介导马铃薯遗传转化体系的优化研究第49-63页
 1 材料和方法第49-52页
   ·材料第49页
     ·植物材料第49页
     ·农杆菌菌株与质粒第49页
     ·抗生素、选择试剂及其浓度设置第49页
   ·方法第49-52页
     ·转化方法第49-50页
       ·农杆菌工程菌的培养和活化第50页
       ·外植体的预培养第50页
       ·外植体的转化第50页
       ·转化体的筛选和抗性芽的获得第50页
     ·遗传转化体系的优化第50-52页
       ·植物材料的生长状态对遗传转化的影响第50-51页
       ·受体材料Kan 选择压力的确定第51页
         ·对愈伤形成的选择压力第51页
         ·对生根的选择压力第51页
       ·茎段和叶片遗传转化的效果比较第51页
       ·工程菌浓度及侵染时间对遗传转化的影响第51页
       ·预培养时间对遗传转化的影响第51页
       ·共培养时间对遗传转化的影响第51页
       ·抗生素的抑菌试验第51-52页
       ·梯度筛选对遗传转化的影响第52页
 2 结果与分析第52-59页
   ·植物材料的生理状态对遗传转化的影响第52-53页
   ·受体材料Kan 适合选择压力第53-54页
     ·愈伤诱导过程中Kan 适合浓度第53-54页
     ·生根过程中Kan 适合浓度第54页
   ·茎段与叶片遗传转化效果比较第54-55页
   ·工程菌浓度及侵染时间对遗传转化的影响第55-56页
   ·预培养时间对遗传转化的影响第56页
   ·共培养时间对遗传转化的影响第56-57页
   ·抗生素的抑菌效果及对遗传转化的影响第57-58页
   ·梯度筛选对遗传转化的影响第58-59页
 3 讨论第59-63页
   ·关于马铃薯基因转化受体系统的建立第59页
   ·菌种的活力对遗传转化的影响第59-60页
   ·农杆菌与再生之间的矛盾及农杆菌污染问题第60页
   ·农杆菌与外植体的共培养第60-61页
   ·抗生素对转化的影响第61-62页
   ·转化中采用两阶段选择培养的意义第62-63页
第四章 glgC 基因的导入与转基因植株的鉴定第63-80页
 1 材料与方法第63-72页
   ·材料第63-64页
     ·植物材料与繁殖第63-64页
     ·农杆菌菌株及质粒第64页
     ·酶和试剂第64页
     ·主要培养基的配制第64页
   ·方法第64-72页
     ·质粒的PCR 鉴定第64-66页
       ·农杆菌质粒DNA 提取(碱裂解法)第65-66页
       ·PCR 鉴定第66页
     ·转glgC 基因马铃薯的培育第66页
     ·转基因马铃薯植株PCR 检测第66-68页
       ·马铃薯叶片总DNA 提取(SDS 法)第66-67页
       ·转化植株PCR 检测第67-68页
     ·转化植株总DNA 的Southern 检测第68-70页
     ·转基因植株的RT-PCR 检测第70-71页
       ·转基因植株微型薯的获得第70页
       ·马铃薯块茎总RNA 的提取第70-71页
       ·转基因植株RT-PCR 检测第71页
     ·转基因植株AGPase 酶活性、淀粉和还原糖的提取与测定第71-72页
       ·AGPase 的提取和活性测定第71页
       ·淀粉提取与含量测定第71-72页
       ·还原糖含量测定第72页
 2 结果与分析第72-78页
   ·质粒的PCR 鉴定第72-73页
   ·转基因马铃薯植株再生第73页
   ·转基因植株PCR 鉴定第73-74页
   ·转基因马铃薯Southern 杂交鉴定第74-75页
   ·转基因植株的RT-PCR 检测第75-76页
   ·转基因马铃薯块茎AGPase 活性、淀粉和还原糖含量测定分析第76-78页
 3 讨论第78-80页
第五章 hrp 基因的导入与转基因植株的鉴定第80-93页
 1 材料与方法第80-84页
   ·材料第80-81页
     ·植物材料与繁殖第80-81页
     ·农杆菌菌株及质粒第81页
     ·酶和试剂第81页
   ·方法第81-84页
     ·质粒的PCR 鉴定第81-82页
     ·马铃薯遗传转化和植株再生第82页
     ·转基因马铃薯植株PCR 检测第82页
     ·转基因马铃薯的Southern 杂交检测第82页
     ·转基因植株的RT-PCR 检测第82-83页
       ·马铃薯叶片总RNA 的提取第82-83页
       ·转基因植株RT-PCR 检测第83页
     ·转hrp 基因植株抗病性测定第83-84页
       ·P.infestans 接种物制备第83页
       ·Erwinia persicinus 接种物制备第83-84页
       ·接种方法第84页
       ·病斑生长速率(Lesion Growth Rate,LGR)测量、记录及统计分析第84页
 2 结果与分析第84-91页
   ·质粒的PCR 鉴定第84-85页
   ·转基因马铃薯植株再生第85-86页
   ·转基因植株PCR 鉴定第86-87页
   ·转基因马铃薯Southern 杂交鉴定第87-88页
   ·转基因植株的 RT-PCR 检测第88-89页
   ·转基因植株抗病性测定第89-91页
 3 讨论第91-93页
第六章 讨论第93-98页
 1 马铃薯遗传转化中的几个问题第93-94页
 2 AGPase 基因与马铃薯高淀粉育种第94-95页
 3 拟过敏性反应与马铃薯广谱抗病育种第95-97页
 4 马铃薯基因工程尚存的不足第97-98页
结 论第98-100页
图 版 Ⅰ第100-101页
图 版 Ⅱ第101-102页
图 版 Ⅲ第102-103页
图 版 说 明第103-104页
参考文献第104-119页
附录 博士在读期间发表论文第119-120页
致 谢第120-121页
导师简介第121-122页
作者介绍第122-123页

论文共123页,点击 下载论文
上一篇:特定产品过渡性保障机制研究
下一篇:新加坡华语特色词语考察--以《联合早报》为例