摘要 | 第1-9页 |
1 文献综述 | 第9-14页 |
2 引言 | 第14-16页 |
3 材料与方法 | 第16-20页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·植物材料 | 第16页 |
·菌株和质粒 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·激素和抗生素贮存液的配制 | 第17页 |
·培养基 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-20页 |
·无菌苗的组织培养 | 第17页 |
·烟草遗传转化方法 | 第17-18页 |
·叶盘制备及预处理 | 第17页 |
·农杆菌的活化和制备 | 第17-18页 |
·共培养 | 第18页 |
·选择分化培养 | 第18页 |
·选择生根培养 | 第18页 |
·烟草叶片总DNA的提取 | 第18页 |
·Km抗性检测 | 第18页 |
·PCR检测 | 第18-19页 |
·保水性实验 | 第19页 |
·气孔观察 | 第19页 |
·电导率和SOD活性测定 | 第19页 |
·干旱和高盐胁迫下转rd29A:BnDREB 1-5基因Izmir烟株脯氨酸含量和可溶性总糖含量测定 | 第19-20页 |
·PEG渗透胁迫实验 | 第20页 |
4 结果与分析 | 第20-31页 |
·烟草再生体系的确立 | 第20-21页 |
·无菌苗的获得 | 第20页 |
·无菌苗的继代 | 第20页 |
·叶盘分化和生根培养基中激素的确定 | 第20-21页 |
·烟草遗传转化体及其抗性植株的获得 | 第21-25页 |
·Km浓度的确定 | 第21页 |
·植物材料的选择和预培养 | 第21-22页 |
·叶龄对转化率的影响 | 第21页 |
·叶位对转化率的影响 | 第21页 |
·预培养对转化率的影响 | 第21-22页 |
·农杆菌的培养和浸染 | 第22页 |
·农杆菌的培养 | 第22页 |
·菌液浓度对转化率的影响 | 第22页 |
·植物材料和农杆菌的共(暗)培养 | 第22-23页 |
·共培养 | 第22页 |
·共(暗)培养对转化率的影响 | 第22-23页 |
·选择分化培养以及Km抗性再生芽的获得 | 第23-24页 |
·生根培养以及Km抗性生根苗的获得 | 第24-25页 |
·转基因烟苗漂浮盘培养 | 第25页 |
·转基因烟苗叶片Km抗性检测 | 第25-26页 |
·转基因烟苗PCR检测 | 第26-27页 |
·转基因烟株的生长发育分析 | 第27-28页 |
·转基因烟株抗逆生物学特性分析 | 第28-31页 |
·35S:BnDREB1-5(Basma)叶片保水性分析 | 第28页 |
·35S:BnDREB1-5(Basma)叶片上、下表皮气孔观察 | 第28-30页 |
·干旱胁迫对35S:BnDREB1-5(Basma)叶片SOD活性的影响 | 第30页 |
·干旱胁迫对35S:BnDREB1-5(Basma)叶片电导率的影响 | 第30页 |
·PEG-6000处理对35S:BnDREB1-5(Izmir)的影响 | 第30-31页 |
·高盐和干旱胁迫对rd29A:BnDREB1-5(Izmir)叶片可溶性总糖含量和脯氨酸含量的影响 | 第31页 |
·高盐和干旱胁迫对叶片可溶性总糖含量的影响 | 第31页 |
·高盐和干旱胁迫对叶片脯氨酸含量的影响 | 第31页 |
5 结论 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-38页 |
英文摘要 | 第38-39页 |