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DREB转基因烟草的获得及其对非生物胁迫耐受性研究

摘要第1-9页
1 文献综述第9-14页
2 引言第14-16页
3 材料与方法第16-20页
   ·实验材料第16-17页
     ·植物材料第16页
     ·菌株和质粒第16页
     ·主要试剂第16-17页
     ·激素和抗生素贮存液的配制第17页
     ·培养基第17页
   ·实验方法第17-20页
     ·无菌苗的组织培养第17页
     ·烟草遗传转化方法第17-18页
       ·叶盘制备及预处理第17页
       ·农杆菌的活化和制备第17-18页
       ·共培养第18页
       ·选择分化培养第18页
       ·选择生根培养第18页
     ·烟草叶片总DNA的提取第18页
     ·Km抗性检测第18页
     ·PCR检测第18-19页
     ·保水性实验第19页
     ·气孔观察第19页
     ·电导率和SOD活性测定第19页
     ·干旱和高盐胁迫下转rd29A:BnDREB 1-5基因Izmir烟株脯氨酸含量和可溶性总糖含量测定第19-20页
     ·PEG渗透胁迫实验第20页
4 结果与分析第20-31页
   ·烟草再生体系的确立第20-21页
     ·无菌苗的获得第20页
     ·无菌苗的继代第20页
     ·叶盘分化和生根培养基中激素的确定第20-21页
   ·烟草遗传转化体及其抗性植株的获得第21-25页
     ·Km浓度的确定第21页
     ·植物材料的选择和预培养第21-22页
       ·叶龄对转化率的影响第21页
       ·叶位对转化率的影响第21页
       ·预培养对转化率的影响第21-22页
     ·农杆菌的培养和浸染第22页
       ·农杆菌的培养第22页
       ·菌液浓度对转化率的影响第22页
     ·植物材料和农杆菌的共(暗)培养第22-23页
       ·共培养第22页
       ·共(暗)培养对转化率的影响第22-23页
     ·选择分化培养以及Km抗性再生芽的获得第23-24页
     ·生根培养以及Km抗性生根苗的获得第24-25页
     ·转基因烟苗漂浮盘培养第25页
   ·转基因烟苗叶片Km抗性检测第25-26页
   ·转基因烟苗PCR检测第26-27页
   ·转基因烟株的生长发育分析第27-28页
   ·转基因烟株抗逆生物学特性分析第28-31页
     ·35S:BnDREB1-5(Basma)叶片保水性分析第28页
     ·35S:BnDREB1-5(Basma)叶片上、下表皮气孔观察第28-30页
     ·干旱胁迫对35S:BnDREB1-5(Basma)叶片SOD活性的影响第30页
     ·干旱胁迫对35S:BnDREB1-5(Basma)叶片电导率的影响第30页
     ·PEG-6000处理对35S:BnDREB1-5(Izmir)的影响第30-31页
     ·高盐和干旱胁迫对rd29A:BnDREB1-5(Izmir)叶片可溶性总糖含量和脯氨酸含量的影响第31页
       ·高盐和干旱胁迫对叶片可溶性总糖含量的影响第31页
       ·高盐和干旱胁迫对叶片脯氨酸含量的影响第31页
5 结论第31-32页
参考文献第32-38页
英文摘要第38-39页

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