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不同寄生蜂寄生后小菜蛾精巢mRNA的表达差异

摘要第1-9页
1 文献综述第9-24页
   ·寄生蜂的生物学第9-11页
     ·免疫抑制第9-10页
     ·发育调控第10-11页
   ·PDV的分子生物学第11-19页
     ·PDV的生活史第12-14页
       ·传播和复制第12-13页
       ·PDV基因的表达及功能第13-14页
     ·姬蜂病毒基因族第14-16页
       ·Cys-motif基因第14页
       ·Rep基因第14-15页
       ·vinnexin基因第15-16页
       ·ankyrin基因第16页
       ·其他的Ⅳ基因及基因族第16页
     ·茧蜂病毒基因族第16-19页
       ·MdBV第17页
       ·Cotesia BV第17-18页
       ·Toxoneuron(Cardiochiles)nigriceps BV第18页
       ·Glyptapanteles indiensis BV第18页
       ·Chelonus inanitus BV第18-19页
     ·展望第19页
   ·基因差异表达的主要研究方法第19-24页
     ·cDNA消减杂交法第19-20页
     ·抑制消减杂交法第20页
     ·代表性差异分析第20页
     ·基因表达系列分析第20页
     ·cDNA微量列阵分析第20-21页
     ·差异显示技术第21-24页
       ·差异显示技术的优点第21-22页
       ·差异显示技术的缺点第22页
       ·差异显示技术的改进第22-24页
2 引言第24-25页
3 材料与方法第25-35页
   ·养虫设备第25页
     ·人工气候箱第25页
       ·大养虫笼第25页
       ·小养虫笼第25页
       ·产卵笼第25页
       ·保蜂盒第25页
   ·主要仪器第25-26页
   ·供试昆虫第26页
     ·小菜蛾Plutella xylostella(Linnaeus)第26页
     ·菜蛾盘绒茧蜂Cotesia plutellae(Kurdjumov)第26页
     ·半闭弯尾姬蜂Diadegama semiclausum第26页
   ·试剂配置第26-28页
   ·实验方法第28-35页
     ·单头寄生第28页
     ·精巢的提取第28-29页
     ·RNA模板制备第29-30页
       ·总RNA提取(Trizol法)第29-30页
       ·RNA检测第30页
     ·DD-RTPCR第30-31页
       ·引物第30页
       ·具体操作步骤如下:第30-31页
     ·克隆测序第31-33页
       ·差异条带二次扩增第31页
       ·切胶回收纯化(3S Spin DNA Agarose Gel Purlfication Kit)第31-32页
       ·连接反应第32页
       ·感受态细菌的制备第32-33页
       ·细菌的转化(冰上操作)第33页
       ·阳性克隆的筛选及鉴定第33页
       ·序列测定第33页
     ·二次验证第33-35页
       ·测序结果的处理第33页
       ·序列的同源性分析第33-34页
       ·RT-PCR验证第34-35页
4 结果与分析第35-45页
   ·组织提取第35页
   ·总RNA样品的制备第35-36页
   ·mRNA差异条带的显示第36-38页
   ·差异条带的二次PCR扩增第38页
   ·克隆测序第38-43页
   ·测序结果分析第43页
   ·特异性检测第43-45页
5 讨论第45-47页
   ·微小组织RNA的提取第45页
   ·差异显示技术第45-46页
   ·寄生后精巢基因的表达差异第46页
   ·进一步的工作第46-47页
参考文献第47-55页
ABSTRACT第55页

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