摘要 | 第1-9页 |
1 文献综述 | 第9-24页 |
·寄生蜂的生物学 | 第9-11页 |
·免疫抑制 | 第9-10页 |
·发育调控 | 第10-11页 |
·PDV的分子生物学 | 第11-19页 |
·PDV的生活史 | 第12-14页 |
·传播和复制 | 第12-13页 |
·PDV基因的表达及功能 | 第13-14页 |
·姬蜂病毒基因族 | 第14-16页 |
·Cys-motif基因 | 第14页 |
·Rep基因 | 第14-15页 |
·vinnexin基因 | 第15-16页 |
·ankyrin基因 | 第16页 |
·其他的Ⅳ基因及基因族 | 第16页 |
·茧蜂病毒基因族 | 第16-19页 |
·MdBV | 第17页 |
·Cotesia BV | 第17-18页 |
·Toxoneuron(Cardiochiles)nigriceps BV | 第18页 |
·Glyptapanteles indiensis BV | 第18页 |
·Chelonus inanitus BV | 第18-19页 |
·展望 | 第19页 |
·基因差异表达的主要研究方法 | 第19-24页 |
·cDNA消减杂交法 | 第19-20页 |
·抑制消减杂交法 | 第20页 |
·代表性差异分析 | 第20页 |
·基因表达系列分析 | 第20页 |
·cDNA微量列阵分析 | 第20-21页 |
·差异显示技术 | 第21-24页 |
·差异显示技术的优点 | 第21-22页 |
·差异显示技术的缺点 | 第22页 |
·差异显示技术的改进 | 第22-24页 |
2 引言 | 第24-25页 |
3 材料与方法 | 第25-35页 |
·养虫设备 | 第25页 |
·人工气候箱 | 第25页 |
·大养虫笼 | 第25页 |
·小养虫笼 | 第25页 |
·产卵笼 | 第25页 |
·保蜂盒 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·供试昆虫 | 第26页 |
·小菜蛾Plutella xylostella(Linnaeus) | 第26页 |
·菜蛾盘绒茧蜂Cotesia plutellae(Kurdjumov) | 第26页 |
·半闭弯尾姬蜂Diadegama semiclausum | 第26页 |
·试剂配置 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-35页 |
·单头寄生 | 第28页 |
·精巢的提取 | 第28-29页 |
·RNA模板制备 | 第29-30页 |
·总RNA提取(Trizol法) | 第29-30页 |
·RNA检测 | 第30页 |
·DD-RTPCR | 第30-31页 |
·引物 | 第30页 |
·具体操作步骤如下: | 第30-31页 |
·克隆测序 | 第31-33页 |
·差异条带二次扩增 | 第31页 |
·切胶回收纯化(3S Spin DNA Agarose Gel Purlfication Kit) | 第31-32页 |
·连接反应 | 第32页 |
·感受态细菌的制备 | 第32-33页 |
·细菌的转化(冰上操作) | 第33页 |
·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第33页 |
·序列测定 | 第33页 |
·二次验证 | 第33-35页 |
·测序结果的处理 | 第33页 |
·序列的同源性分析 | 第33-34页 |
·RT-PCR验证 | 第34-35页 |
4 结果与分析 | 第35-45页 |
·组织提取 | 第35页 |
·总RNA样品的制备 | 第35-36页 |
·mRNA差异条带的显示 | 第36-38页 |
·差异条带的二次PCR扩增 | 第38页 |
·克隆测序 | 第38-43页 |
·测序结果分析 | 第43页 |
·特异性检测 | 第43-45页 |
5 讨论 | 第45-47页 |
·微小组织RNA的提取 | 第45页 |
·差异显示技术 | 第45-46页 |
·寄生后精巢基因的表达差异 | 第46页 |
·进一步的工作 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
ABSTRACT | 第55页 |