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根癌农杆菌介导亚精胺合成酶基因MdSPDS1的柑橘遗传转化及离体再生

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略词表第9-10页
1 前言第10-25页
   ·问题的提出第10-11页
   ·前人研究进展第11-20页
     ·根癌农杆菌介导的柑橘遗传转化研究进展第11-16页
       ·根癌农杆菌介导柑橘遗传转化效率的影响因素第11-15页
       ·转化的目标基因第15-16页
     ·植物体内PAs合成及其与植物逆境胁迫的关系第16-20页
       ·植物体内PAs合成第16-17页
       ·植物中PAs与逆境胁迫的关系第17-20页
   ·本研究课题的内容及意义第20-25页
2 材料与方法第25-38页
   ·柑橘遗传转化及转基因植株在生理及形态方面的比较第25-35页
     ·材料第25-27页
       ·供试外植体材料的准备第25页
       ·根癌农杆菌菌株及质粒第25-26页
       ·主要培养基配方第26-27页
       ·主要仪器和试剂第27页
     ·方法第27-35页
       ·农杆菌LBA4404生长曲线的测定第27-28页
       ·柑橘外植体材料对Km的敏感性试验第28页
       ·根癌农杆菌介导的柑橘遗传转化第28-33页
       ·转基因植株与未转化植株在形态、生理等方面的比较第33-35页
   ·柑橘离体再生研究第35-38页
     ·冰糖橙上胚轴切段不定芽再生的研究第35-36页
       ·材料第35页
       ·方法第35-36页
     ·金钱橘上胚轴薄细胞层培养再生芽的尝试第36页
       ·材料第36页
       ·方法第36页
     ·柑橘成年态茎段腋芽的诱导培养第36-38页
       ·材料第36页
       ·方法第36-38页
3 结果与分析第38-49页
   ·柑橘遗传转化方面第38-46页
     ·柑橘外植体材料对Km的敏感性试验第38-39页
       ·胚性愈伤组织对Km的敏感性试验第38-39页
       ·上胚轴切段对Km的敏感性试验第39页
     ·农杆菌LBA4404生长曲线测定及划线培养时间确定第39-40页
     ·柑橘转化效率影响因素的研究第40-41页
       ·共培养培养基适宜pH值对转化效率的影响第40-41页
       ·柑橘不同基因型对转化效率的影响第41页
     ·拟转化柑橘材料的PCR鉴定第41-42页
       ·盆栽拟转化金钱橘植株的PCR鉴定第41页
       ·试管内拟转化柑橘愈伤组织的PCR鉴定第41-42页
     ·已得到的Km抗性材料及其再生情况第42-43页
     ·转基因植株的形态特征与生长状况第43-44页
     ·转基因植株抗逆性检测第44-46页
       ·转基因植株与未转化植株抗温度、高盐、高渗胁迫能力比较第44-45页
       ·转基因植株与未转化植株抗氧化能力的比较第45-46页
   ·柑橘离体再生第46-49页
     ·冰糖橙上胚轴切段离体再生第46-47页
     ·柑橘成年态茎段腋芽的诱导培养第47-48页
     ·薄细胞层培养技术在柑橘离体再生中的尝试第48-49页
4 问题与讨论第49-54页
   ·外植体基因型及共培养时培养基pH值对柑橘遗传转化效率的影响第49页
   ·正交试验设计方法在柑橘组织培养和遗传转化中的应用第49-50页
   ·柑橘再生体系的细化研究和创新研究的必要性第50-51页
   ·转SPDS基因的金钱橘在形态、生理等方面的特征观察第51-52页
   ·应用遗传转化技术进行柑橘抗性育种的前景第52页
   ·本研究的下一步工作第52-54页
参考文献第54-65页
图版和图版说明第65-70页
 图版Ⅰ 柑橘材料对Km敏感性试验第66页
 图版Ⅱ 不同柑橘品种转化后抗性愈伤组织的生长情况第66页
 图版Ⅲ 转基因金钱橘植株和未转化对照的植物形态方面比较第66页
 图版Ⅳ 转基因金钱橘和未转化对照离体叶盘经过高温胁迫后外观比较第66-68页
 图版Ⅴ 转化愈伤和未转化对照在体胚发生能力上的差异第68页
 图版Ⅵ 柑橘成年态腋芽的诱导培养第68页
 图版Ⅶ 金钱橘薄细胞层培养第68页
 图版Ⅷ 冰糖橙上胚轴切段不定芽的诱导第68-70页
致谢第70页

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