| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 实验材料 | 第17-21页 |
| 实验方法 | 第21-35页 |
| ·分子生物学方法 | 第21-29页 |
| ·基因芯片结果分析 | 第21页 |
| ·生物信息学工具的使用 | 第21页 |
| ·引物的溶解制备 | 第21页 |
| ·检测超净工作台洁净度 | 第21-22页 |
| ·质粒抽提 | 第22-23页 |
| ·小鼠骨髓细胞RNA的抽提 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR | 第24-25页 |
| ·Agrose凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·胶回收DNA片断 | 第26页 |
| ·DNA片断限制性酶切(RE) | 第26-27页 |
| ·DNA片断连接反应(ligation) | 第27页 |
| ·氯化钙法制备感受态 | 第27页 |
| ·大肠杆菌DH5α的转化实验 | 第27-28页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第28-29页 |
| ·动物实验方法 | 第29-35页 |
| ·小鼠消毒程序 | 第29页 |
| ·注射5-Fu小鼠消毒防感染程序 | 第29-30页 |
| ·尾静脉注射 | 第30-31页 |
| ·建立造血应急反应模型 | 第31页 |
| ·外周血取血 | 第31页 |
| ·白细胞计数 | 第31-32页 |
| ·小鼠骨髓细胞的获取 | 第32-33页 |
| ·In vivo电转 | 第33页 |
| ·小鼠肌肉注射 | 第33页 |
| ·小鼠肌肉组织X-gal染色 | 第33-35页 |
| 结果与讨论 | 第35-71页 |
| 第一部分 造血重建及调控模型 | 第35-43页 |
| 1.造血应急动态模型 | 第35-36页 |
| 2.芯片结果分析及调控模型 | 第36-40页 |
| 3.sIL1-rn及Gpx7基因芯片结果分析 | 第40-43页 |
| 第二部分 sIL1-rn基因克隆,质粒构建及初步功能检测 | 第43-59页 |
| 1.sIL1-rn基因克隆,质粒构建 | 第43-50页 |
| ·生物信息学分析 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR从总RNA中克隆sIL1-rn | 第44-46页 |
| ·质粒phCMV提取及酶切处理 | 第46-47页 |
| ·构建phCmv／sIL-rn重组质粒 | 第47-50页 |
| 2.sIL1-rn功能研究 | 第50-59页 |
| ·X-Gal染色实验 | 第50-51页 |
| ·phCMV／sIL1-rn重组质粒大量抽提 | 第51-53页 |
| ·体内表达,外周血计数 | 第53-54页 |
| ·sIL1-rn对骨髓损伤后造血恢复影响总体分析 | 第54-55页 |
| ·sIL1-rn对造血恢复影响分析(day11) | 第55-59页 |
| 第三部分 生长激素(GH)对造血恢复影响 | 第59-61页 |
| 1 皮下注射,外周血计数 | 第59页 |
| 2 GH对造血恢复影响总体分析 | 第59-61页 |
| 第四部分 Gpx7基因克隆,质粒构建及初步功能检测 | 第61-71页 |
| 1.Gpx7基因克隆,质粒构建 | 第61-67页 |
| ·Gpx7生物信息学分析 | 第61-62页 |
| ·RT-PCR从总RNA中克隆Gpx7 | 第62-63页 |
| ·质粒pcDNA3.1提取及酶切处理 | 第63-64页 |
| ·构建pcDNA3.1／sIL-rn重组质粒 | 第64-67页 |
| 2.Gpx7功能研究 | 第67-71页 |
| ·phCMV／Gpx7重组质粒大量抽提 | 第67-68页 |
| ·体内表达,外周血计数 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 讨论 | 第72-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |