| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 文献综述 | 第14-42页 |
| 第一节 中国盐碱地概况 | 第14-17页 |
| 第二节 植物耐盐生理生化研究 | 第17-24页 |
| 第三节 植物耐盐分子机理的研究 | 第24-32页 |
| 第四节 多枝赖草研究进展 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-42页 |
| 第一部分 盐胁迫下多枝赖草基因的差异表达 | 第42-92页 |
| 第一章 前言 | 第43-50页 |
| 第二章 多枝赖草总 RNA提取、纯化方法的建立 | 第50-59页 |
| 1 材料与方法 | 第50-55页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·DEPC处理水及器皿 | 第51页 |
| ·仪器设备 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-55页 |
| ·多枝赖草叶片 RNA提取方法 | 第51-53页 |
| ·异硫氰酸胍法 | 第51-52页 |
| ·CTAB法 | 第52页 |
| ·SDS法 | 第52-53页 |
| ·TRIZOL试剂快速提取法 | 第53页 |
| ·总 RNA浓度及纯度检测 | 第53页 |
| ·总 RNA电泳 | 第53-54页 |
| ·RNA样品中微量 DNA的去除 | 第54页 |
| ·mRNA差异显示 | 第54-55页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第54-55页 |
| ·多枝赖草Actin基因保守区cDNA的特异扩增 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-57页 |
| ·不同方法提取总 RNA的产量与纯度比较 | 第55页 |
| ·不同方法提取总 RNA的质量比较 | 第55-57页 |
| ·多枝赖草Actin基因保守区cDNA的特异扩增 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第三章 盐胁迫下多枝赖草mRNA差别显示体系的建立与优化 | 第59-67页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·植物材料 | 第59页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59-60页 |
| ·方法 | 第60-62页 |
| ·多枝赖草叶片 RNA提取与纯化 | 第60页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第60-61页 |
| ·PCR扩增 | 第61页 |
| ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-66页 |
| ·RNA的分离提取 | 第62页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第62页 |
| ·引物的确定 | 第62页 |
| ·PCR体系的优化 | 第62-66页 |
| ·退火温度的选择 | 第62-63页 |
| ·Taq酶的确定 | 第63-64页 |
| ·模板量的确定 | 第64页 |
| ·Mg~(2+)的确定 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-67页 |
| 第四章 多枝赖草耐盐相关cDNA的克隆与鉴定分析 | 第67-92页 |
| 1. 材料与方法 | 第67-74页 |
| ·材料 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-74页 |
| ·多枝赖草叶片总 RNA提取 | 第67页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第67页 |
| ·PCR扩增 | 第67-68页 |
| ·6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第68-69页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶的制 | 第68页 |
| ·电泳 | 第68页 |
| ·银染 | 第68-69页 |
| ·差异条带的回收及二次扩增、检测 | 第69页 |
| ·第二次 PCR产物回收 | 第69页 |
| ·CaCl_2法制备感受态大肠杆菌细胞 | 第69-70页 |
| ·S PCR产物的克隆 | 第70-71页 |
| ·连接 | 第70页 |
| ·转化 | 第70-71页 |
| ·阳性克隆的鉴定与保存 | 第71页 |
| ·质粒提取和酶切 | 第71-72页 |
| ·序列测定 | 第72页 |
| ·Reverse Northern杂交 | 第72-74页 |
| ·定量 PCR检测 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-85页 |
| ·多枝赖草总 RNA的提取 | 第74页 |
| ·盐胁迫下基因差异表达 | 第74-77页 |
| ·特异cDNA片段序列分析 | 第77-81页 |
| ·反 Northern Blotting | 第81-82页 |
| ·片段3和11基因的表达 | 第82-85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 第二部分 多枝赖草谷胱甘肽还原酶基因的克隆及表达分析 | 第92-126页 |
| 第一章 前言 | 第93-100页 |
| 第二章 多枝赖草谷胱甘肽还原酶cDNA的克隆与分析 | 第100-111页 |
| 1 材料与方法 | 第100-102页 |
| ·植物材料 | 第100页 |
| ·方法 | 第100-102页 |
| ·总 RNA的制备 | 第100页 |
| ·引物设计及 RT-PCR扩增 | 第100-101页 |
| ·GR基因cDNA片段的PCR扩增 | 第101页 |
| ·PCR产物的克隆和测序 | 第101-102页 |
| ·5'RACE和3'RACE | 第102页 |
| ·DNA序列、氨基酸序列的计算机分析 | 第102页 |
| 2 结果与分析 | 第102-108页 |
| ·总RNA的提取 | 第102-103页 |
| ·GR基因片段的 RT-PCR扩增和重组质粒的鉴定 | 第103页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第103-104页 |
| ·GR基因5’和3’端cDNA的克隆 | 第104-107页 |
| ·推断的GR蛋白的功能及进化分析 | 第107-108页 |
| 3 讨论 | 第108-111页 |
| 第三章 盐胁迫下多枝赖草谷胱甘肽还原酶基因的表达 | 第111-126页 |
| 1 材料和方法 | 第111-119页 |
| ·材料 | 第111-112页 |
| ·方法 | 第112-119页 |
| ·总 RNA的制备 | 第112页 |
| ·多枝赖草基因组 DNA的提取 | 第112-114页 |
| ·SDS法 | 第112-113页 |
| ·CTAB法 | 第113-114页 |
| ·Southern blotting | 第114-117页 |
| ·Northern blotting | 第117-118页 |
| ·表达产物半定量 PCR检测 | 第118-119页 |
| 2 结果与分析 | 第119-124页 |
| ·多枝赖草基因组 DNA的提取 | 第119-120页 |
| ·GR基因 Southern blotting | 第120-121页 |
| ·逆境胁迫下 GR基因的表达 | 第121-123页 |
| ·表达产物定量 PCR | 第123-124页 |
| 3 讨论 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-132页 |
| 全文结论 | 第132-134页 |
| 附录 | 第134-138页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
