| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-17页 |
| 第一章 综述 | 第17-41页 |
| §1 微管组织中心(MTOC) | 第17-20页 |
| ·MTOC在细胞内不同形态和分布 | 第17页 |
| ·MTOC的功能 | 第17-18页 |
| ·MTOC的化学组成 | 第18页 |
| ·中心体的复制和分离 | 第18-20页 |
| §2 中心蛋白的结构基础—EF手性结构及钙调蛋白 | 第20-24页 |
| §3 中心蛋白的结构 | 第24-27页 |
| ·中心蛋白的一，二级结构 | 第24-25页 |
| ·中心蛋白的三级结构 | 第25-27页 |
| §4 中心蛋白的功能 | 第27-36页 |
| ·绿藻中心蛋白功能的研究 | 第27-29页 |
| ·酵母中心蛋白功能的研究 | 第29-30页 |
| ·哺乳动物细胞中心蛋白功能的研究 | 第30-35页 |
| ·高等植物中心蛋白功能的研究 | 第35-36页 |
| ·原生生物中心蛋白功能的研究 | 第36页 |
| §5 中心蛋白的作用机制 | 第36-38页 |
| §6 实验材料——八肋游仆虫 | 第38-40页 |
| §7 纤毛虫分子生物学研究的优势和意义 | 第40-41页 |
| 第二章 八肋游仆虫中心蛋白基因的克隆与序列分析 | 第41-52页 |
| §1 引言 | 第41页 |
| §2 材料与方法 | 第41-47页 |
| ·实验材料 | 第41-43页 |
| ·主要试剂的配制 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-47页 |
| §3 实验结果 | 第47-49页 |
| ·八肋游仆虫中心蛋白基因片段的扩增与克隆 | 第47-48页 |
| ·八肋游仆虫中心蛋白全基因序列分析 | 第48-49页 |
| §4 讨论 | 第49-52页 |
| ·八肋游仆虫中心蛋白基因的扩增 | 第49-50页 |
| ·八肋游仆虫中心蛋白的分类地位 | 第50-52页 |
| 第三章 八肋游仆虫中心蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第52-68页 |
| §1 引言 | 第52页 |
| §2 材料与方法 | 第52-59页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·主要试剂的配制 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| §3 实验结果 | 第59-66页 |
| ·表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第61-62页 |
| ·EoCen表达的Western blotting鉴定 | 第62-63页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第63-66页 |
| §4 讨论 | 第66-68页 |
| ·关于中心蛋白的可溶性分析 | 第66页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第66-68页 |
| 第四章 八肋游仆虫中心蛋白聚合特性的初步分析 | 第68-77页 |
| §1 引言 | 第68页 |
| §2 材料与方法 | 第68-69页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-69页 |
| §3 实验结果 | 第69-75页 |
| ·表观分子量的测定 | 第69-70页 |
| ·pH及盐的影响 | 第70-72页 |
| ·Ca~(2+)的影响 | 第72-74页 |
| ·化学交联分析 | 第74-75页 |
| ·Western Blotting分析 | 第75页 |
| §4 讨论 | 第75-77页 |
| 第五章 八肋游仆虫中心蛋白的光谱学研究 | 第77-90页 |
| §1 引言 | 第77页 |
| §2 材料与方法 | 第77-78页 |
| ·实验材料 | 第77页 |
| ·主要试剂 | 第77页 |
| ·主要仪器 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-78页 |
| §3 实验结果 | 第78-87页 |
| ·中心蛋白的紫外光谱，荧光光谱和CD光谱 | 第78-80页 |
| ·盐离子浓度对EoCen CD谱的影响 | 第80-81页 |
| ·pH对EoCen CD谱的影响 | 第81页 |
| ·温度对EoCen CD谱的影响 | 第81-84页 |
| ·Ca~(2+)与apoCen结合的紫外差光谱研究 | 第84-85页 |
| ·不同浓度Ca~(2+)对EoCen内源荧光光谱的影响 | 第85-86页 |
| ·Ca~(2+)对EoCen CD谱的影响 | 第86-87页 |
| §4 讨论 | 第87-90页 |
| ·EoCen是个稳定的蛋白 | 第87页 |
| ·Ca~(2+)对EoCen的作用 | 第87-90页 |
| 第六章 八肋游仆虫中心蛋白晶体的生长及X射线衍射 | 第90-102页 |
| §1 引言 | 第90页 |
| §2 蛋白质结晶学的原理和方法 | 第90-94页 |
| ·蛋白质结晶 | 第90-93页 |
| ·相位问题 | 第93-94页 |
| §3 材料与方法 | 第94-97页 |
| ·实验材料 | 第94页 |
| ·实验方法 | 第94-97页 |
| §4 实验结果 | 第97-100页 |
| ·EoCen结晶条件的摸索 | 第97-99页 |
| ·EoCen晶体的X射线衍射 | 第99-100页 |
| §5 讨论 | 第100-102页 |
| ·晶体的生长 | 第100-101页 |
| ·晶体结构的解析 | 第101-102页 |
| 第七章 中心蛋白在八肋游仆虫细胞中的定位 | 第102-111页 |
| §1 引言 | 第102页 |
| §2 材料与方法 | 第102-107页 |
| ·材料 | 第102-104页 |
| ·实验方法 | 第104-107页 |
| §3 实验结果 | 第107-109页 |
| ·EoCen抗血清的效价检测 | 第107页 |
| ·EoCen的Western blotting分析 | 第107-108页 |
| ·免疫荧光定位 | 第108-109页 |
| §4 讨论 | 第109-111页 |
| 总结与展望 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 附录Ⅰ | 第126-128页 |
| 附录Ⅱ | 第128-129页 |
| 承诺书 | 第129页 |
