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五指山猪近交系群体三个白细胞抗原基因序列和功能分析

前言第1-15页
第一章 文献综述第15-33页
 1 MHC的发现第15-16页
 2 猪MHC研究进展第16-32页
   ·猪MHC(SLA)基因在染色体上的位置第16-17页
   ·SLA的特点第17页
   ·SLA分类第17-27页
     ·SLAⅠ类抗原分布、组成及基因图谱第17-21页
     ·SLAⅡ类抗原分布、组成及基因图谱第21-25页
     ·SLAⅢ类基因及其研究概况第25-27页
   ·猪MHC(SLA)的功能概述第27-28页
     ·参与T细胞应答第27-28页
     ·参与免疫应答的遗传控制第28页
     ·约束免疫细胞间的相互作用第28页
     ·参与抗原处理第28页
     ·参与免疫调节第28页
     ·参与免疫细胞的分化第28页
   ·SLA的分型与检测第28-32页
     ·免疫学方法第29页
     ·分子生物学方法第29-32页
 3 SLA的研究展望第32-33页
第二章 实验研究第33-72页
 实验一第33-48页
  1 材料与方法第33-40页
   ·材料第33-35页
     ·实验动物及样品的采集第33页
     ·主要的实验仪器和器械第33页
     ·主要试剂第33-34页
     ·溶液配制第34-35页
   ·方法第35-40页
     ·猪耳组织基因组DNA提取第35-36页
     ·DNA浓度和纯度的检测第36页
     ·PCR引物的设计与合成第36页
     ·PCR扩增第36-38页
     ·利用非变性聚丙烯酰胺凝胶SSCP电泳第38-40页
     ·PCR产物的直接测序(DS)第40页
     ·序列的拼接和分析第40页
     ·同源性序列比较第40页
  2 结果与分析第40-45页
   ·五指山猪近交系基因组DNA提取结果第41页
   ·PCR扩增结果第41页
   ·SSCP电泳结果分析第41-42页
   ·直接测序法(DS)第42页
   ·结果分析第42-45页
  3 讨论第45-48页
   ·关于PCR-SSCP条带的判定第45-46页
   ·关于PCR产物直接测序第46页
   ·关于五指山猪近交系群体SLA-DRA和DRB外显子2的分析第46-48页
 实验二第48-62页
  1 材料与方法第48-55页
   ·材料第48-49页
     ·试验材料第48页
     ·主要仪器第48页
     ·菌株和克隆载体第48页
     ·试剂和药品第48页
     ·溶液配制第48-49页
   ·方法第49-55页
     ·提取RNA前的准备工作第49页
     ·提取RNA的操作步骤第49-50页
     ·RNA浓度和纯度的检测第50-51页
     ·PCR引物的设计与合成第51页
     ·反转录-PCR反应第51-52页
     ·PCR产物的回收第52页
     ·PCR产物的克隆第52-54页
     ·重组子的鉴定第54-55页
     ·测序第55页
     ·五指山猪SLA-DRBcDNA序列完整阅读框的确定第55页
  2 结果与分析第55-60页
   ·RNA的完整性第55-56页
   ·RT-PCR扩增产物特异性鉴定第56页
   ·PCR扩增产物克隆第56页
   ·菌落PCR扩增检测第56-57页
   ·质粒酶切鉴定第57页
   ·PCR测序结果第57页
   ·结果分析第57-60页
     ·五指山猪近交系群体DRB新等位基因编码序列的比较分析第57-58页
     ·五指山猪近交系群体DRB新等位基因的进化关系第58-60页
     ·五指山猪近交系群体中新的DRB分子和人CD4结合部位的结构分析第60页
  3 讨论第60-62页
 实验三第62-72页
  1 材料和方法第62-63页
   ·材料第62页
     ·试验材料第62页
     ·主要仪器第62页
     ·菌株和克隆载体第62页
     ·试剂和药品第62页
     ·溶液配制第62页
   ·方法第62-63页
     ·RNA提取和检测第62页
     ·PCR引物的设计与合成第62页
     ·反转录-PCR反应第62-63页
     ·PCR产物的回收即克隆测序第63页
     ·序列的比对和相应氨基酸的推导方法及其分析第63页
  2 结果与分析第63-69页
   ·RNA的完整性检测第63页
   ·RT-PCR扩增产物特异性鉴定第63页
   ·PCR扩增产物克隆第63-64页
   ·菌落PCR扩增检测第64页
   ·质粒酶切鉴定第64页
   ·PCR测序结果第64-65页
   ·五指山猪SLAⅠ3等位基因核苷酸序列分析第65-66页
   ·SLAⅠ3等位基因的氨基酸序列分析第66-68页
   ·SLAⅠ3等位基因系统树的构建第68-69页
   ·SLAⅠ类分子与HLAⅠ类分子中NK细胞受体的配体序列比较第69页
  3 讨论第69-72页
   ·关于五指山猪SLAⅠ3等位基因的分析第69-70页
   ·关于五指山猪SLAⅠ3基因的编码氨基酸序列分析第70页
   ·关于与人HLAⅠ类分子中NK细胞受体的配体序列比较分析第70-72页
第三章 结论第72-74页
参考文献第74-81页
致谢第81-82页
个人简历第82-83页
附图第83-84页

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