前言 | 第1-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-33页 |
1 MHC的发现 | 第15-16页 |
2 猪MHC研究进展 | 第16-32页 |
·猪MHC(SLA)基因在染色体上的位置 | 第16-17页 |
·SLA的特点 | 第17页 |
·SLA分类 | 第17-27页 |
·SLAⅠ类抗原分布、组成及基因图谱 | 第17-21页 |
·SLAⅡ类抗原分布、组成及基因图谱 | 第21-25页 |
·SLAⅢ类基因及其研究概况 | 第25-27页 |
·猪MHC(SLA)的功能概述 | 第27-28页 |
·参与T细胞应答 | 第27-28页 |
·参与免疫应答的遗传控制 | 第28页 |
·约束免疫细胞间的相互作用 | 第28页 |
·参与抗原处理 | 第28页 |
·参与免疫调节 | 第28页 |
·参与免疫细胞的分化 | 第28页 |
·SLA的分型与检测 | 第28-32页 |
·免疫学方法 | 第29页 |
·分子生物学方法 | 第29-32页 |
3 SLA的研究展望 | 第32-33页 |
第二章 实验研究 | 第33-72页 |
实验一 | 第33-48页 |
1 材料与方法 | 第33-40页 |
·材料 | 第33-35页 |
·实验动物及样品的采集 | 第33页 |
·主要的实验仪器和器械 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·溶液配制 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-40页 |
·猪耳组织基因组DNA提取 | 第35-36页 |
·DNA浓度和纯度的检测 | 第36页 |
·PCR引物的设计与合成 | 第36页 |
·PCR扩增 | 第36-38页 |
·利用非变性聚丙烯酰胺凝胶SSCP电泳 | 第38-40页 |
·PCR产物的直接测序(DS) | 第40页 |
·序列的拼接和分析 | 第40页 |
·同源性序列比较 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-45页 |
·五指山猪近交系基因组DNA提取结果 | 第41页 |
·PCR扩增结果 | 第41页 |
·SSCP电泳结果分析 | 第41-42页 |
·直接测序法(DS) | 第42页 |
·结果分析 | 第42-45页 |
3 讨论 | 第45-48页 |
·关于PCR-SSCP条带的判定 | 第45-46页 |
·关于PCR产物直接测序 | 第46页 |
·关于五指山猪近交系群体SLA-DRA和DRB外显子2的分析 | 第46-48页 |
实验二 | 第48-62页 |
1 材料与方法 | 第48-55页 |
·材料 | 第48-49页 |
·试验材料 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·菌株和克隆载体 | 第48页 |
·试剂和药品 | 第48页 |
·溶液配制 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-55页 |
·提取RNA前的准备工作 | 第49页 |
·提取RNA的操作步骤 | 第49-50页 |
·RNA浓度和纯度的检测 | 第50-51页 |
·PCR引物的设计与合成 | 第51页 |
·反转录-PCR反应 | 第51-52页 |
·PCR产物的回收 | 第52页 |
·PCR产物的克隆 | 第52-54页 |
·重组子的鉴定 | 第54-55页 |
·测序 | 第55页 |
·五指山猪SLA-DRBcDNA序列完整阅读框的确定 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-60页 |
·RNA的完整性 | 第55-56页 |
·RT-PCR扩增产物特异性鉴定 | 第56页 |
·PCR扩增产物克隆 | 第56页 |
·菌落PCR扩增检测 | 第56-57页 |
·质粒酶切鉴定 | 第57页 |
·PCR测序结果 | 第57页 |
·结果分析 | 第57-60页 |
·五指山猪近交系群体DRB新等位基因编码序列的比较分析 | 第57-58页 |
·五指山猪近交系群体DRB新等位基因的进化关系 | 第58-60页 |
·五指山猪近交系群体中新的DRB分子和人CD4结合部位的结构分析 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
实验三 | 第62-72页 |
1 材料和方法 | 第62-63页 |
·材料 | 第62页 |
·试验材料 | 第62页 |
·主要仪器 | 第62页 |
·菌株和克隆载体 | 第62页 |
·试剂和药品 | 第62页 |
·溶液配制 | 第62页 |
·方法 | 第62-63页 |
·RNA提取和检测 | 第62页 |
·PCR引物的设计与合成 | 第62页 |
·反转录-PCR反应 | 第62-63页 |
·PCR产物的回收即克隆测序 | 第63页 |
·序列的比对和相应氨基酸的推导方法及其分析 | 第63页 |
2 结果与分析 | 第63-69页 |
·RNA的完整性检测 | 第63页 |
·RT-PCR扩增产物特异性鉴定 | 第63页 |
·PCR扩增产物克隆 | 第63-64页 |
·菌落PCR扩增检测 | 第64页 |
·质粒酶切鉴定 | 第64页 |
·PCR测序结果 | 第64-65页 |
·五指山猪SLAⅠ3等位基因核苷酸序列分析 | 第65-66页 |
·SLAⅠ3等位基因的氨基酸序列分析 | 第66-68页 |
·SLAⅠ3等位基因系统树的构建 | 第68-69页 |
·SLAⅠ类分子与HLAⅠ类分子中NK细胞受体的配体序列比较 | 第69页 |
3 讨论 | 第69-72页 |
·关于五指山猪SLAⅠ3等位基因的分析 | 第69-70页 |
·关于五指山猪SLAⅠ3基因的编码氨基酸序列分析 | 第70页 |
·关于与人HLAⅠ类分子中NK细胞受体的配体序列比较分析 | 第70-72页 |
第三章 结论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82-83页 |
附图 | 第83-84页 |