| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-39页 |
| 1 植物产生抗逆性的分子机制 | 第10-17页 |
| ·逆境诱导表达的基因 | 第10-12页 |
| ·逆境诱导基因的表达调控 | 第12-16页 |
| ·逆境信号的感受和传导 | 第16-17页 |
| 2 抗逆基因工程 | 第17-25页 |
| ·抗逆基因工程的基本策略 | 第17页 |
| ·抗逆基因工程研究进展 | 第17-25页 |
| ·诱导相容性溶质的生物合成 | 第19-22页 |
| ·调节离子的吸收和区隔化 | 第22-24页 |
| ·调控水通道 | 第24页 |
| ·改变光合作用途径 | 第24-25页 |
| ·抗逆基因工程中存在的问题 | 第25页 |
| 3 DREB与抗逆基因工程 | 第25-28页 |
| 4 SOD与抗氧化基因工程 | 第28-36页 |
| ·活性氧的种类 | 第28-29页 |
| ·氧自由基对植物的危害 | 第29-32页 |
| ·氧自由基对植物生命物质的损伤怍用 | 第29-30页 |
| ·氧自由基对植物细胞结构的伤害 | 第30-31页 |
| ·高浓度氧对植物生长的毒害作用 | 第31页 |
| ·氧自由基与逆境伤害 | 第31-32页 |
| ·活性氧的清除 | 第32-35页 |
| ·活性氧的酶促清除系统 | 第32-34页 |
| ·植物的超氧化物歧化酶(SOD) | 第32-33页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX) | 第33页 |
| ·过氧化氢酶(CAT) | 第33-34页 |
| ·活性氧的非酶促清除剂 | 第34-35页 |
| ·抗坏血酸和谷胱甘肽 | 第34页 |
| ·甘露醇 | 第34-35页 |
| ·类黄酮 | 第35页 |
| ·高等植物抗光氧化的研究进展 | 第35-36页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第36-39页 |
| 第二章 材料与方法 | 第39-59页 |
| 1 实验材料 | 第39-41页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·菌株 | 第39页 |
| ·质粒 | 第39页 |
| ·重要仪器设备 | 第39-40页 |
| ·重要的生化试剂 | 第40页 |
| ·玉米转化培养基配方 | 第40-41页 |
| 2 方法 | 第41-59页 |
| ·逆境诱导启动子mwcs120的克隆及功能鉴定 | 第41-46页 |
| ·小麦DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·启动子(mwcs120)的克隆 | 第42页 |
| ·启动子序列的测定及分析 | 第42页 |
| ·启动子瞬时表达载体构建 | 第42-45页 |
| ·基因枪转化 | 第45页 |
| ·逆境处理和GUS组织化学染色 | 第45-46页 |
| ·注册GenBank序列号 | 第46页 |
| ·DREB和SOD单子叶植物表达载体构建 | 第46-50页 |
| ·dreb基冈组成型和诱导型植物表达载体陶建 | 第46页 |
| ·Mnsod基冈组成型植物表达载体的构建 | 第46-50页 |
| ·玉米基因枪转化及再生植株筛选 | 第50-52页 |
| ·受体系统的建立 | 第50页 |
| ·金粉的准备 | 第50-51页 |
| ·微弹DNA的制备 | 第51页 |
| ·基因枪的准备 | 第51页 |
| ·基因枪的轰击 | 第51-52页 |
| ·过渡培养 | 第52页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第52页 |
| ·抗性植株的再生和移栽 | 第52页 |
| ·再生玉米植株的PCR检测 | 第52-53页 |
| ·转sod基因的玉米植株的Southern Blot检测 | 第53-55页 |
| ·基因组DNA的限制性酶切 | 第53-54页 |
| ·Southern转膜 | 第54页 |
| ·探针标记 | 第54-55页 |
| ·预杂交、杂交 | 第55页 |
| ·T1代转sod基因阳性玉米植株的获得 | 第55-56页 |
| ·MnSOD的凝胶电泳及活性检测 | 第56-58页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的制作 | 第56-57页 |
| ·植物材料的制备 | 第57页 |
| ·电泳 | 第57页 |
| ·SOD的活性染色 | 第57-58页 |
| ·转sod基因植株后代抗氧化损伤性能的测定 | 第58-59页 |
| 第三章 结果与分析 | 第59-76页 |
| 1 结果 | 第59-72页 |
| ·逆境诱导启动子mwcs120的克隆及功能鉴定 | 第59-64页 |
| ·PCR克隆启动子mwcs120 | 第59-60页 |
| ·启动子序列测定及分析 | 第60-61页 |
| ·启动子瞬时表达载体构建 | 第61-62页 |
| ·启动子逆境诱导表达活性检测 | 第62-64页 |
| ·GenBank注册 | 第64页 |
| ·DREB和SOD单子叶植物表达载体构建及鉴定 | 第64-67页 |
| ·DREB组成型植物表达载体的构建和鉴定 | 第64-65页 |
| ·DREB诱导型植物表达载体的构建和鉴定 | 第65-66页 |
| ·SOD组成型植物表达载体的构建和鉴定 | 第66-67页 |
| ·转基因玉米植株的获得 | 第67-68页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第68-69页 |
| ·转sod基因再生植株的Southern Blot检测 | 第69页 |
| ·T1代转sod基因植株的获得 | 第69-70页 |
| ·MnSOD凝胶电泳及活性检测 | 第70-71页 |
| ·MV处理后转sod基因植株的电解质渗漏率测定 | 第71-72页 |
| 2 讨论 | 第72-76页 |
| ·超氧化物歧化酶基因Mnsod在玉米中的过量表达及对提高抗氧化损伤性能的作用 | 第72-73页 |
| ·转录因子基因dreb在玉米中的组成型和诱导型表达 | 第73-74页 |
| ·抗逆基因工程存在的问题及解决方法 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 附录 | 第82-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
