| 1 前言 | 第1-22页 |
| ·木素生物降解理论的研究 | 第8-11页 |
| ·木素在自然界中的存在和组成 | 第8页 |
| ·木素生物降解的研究现状 | 第8-9页 |
| ·木素生物降解研究的目的及意义 | 第9页 |
| ·木素降解菌体系 | 第9-11页 |
| ·白腐菌的研究进展 | 第11页 |
| ·白腐菌的生物学背景 | 第11页 |
| ·白腐菌研究和利用现状 | 第11页 |
| ·白腐菌木素降解酶的基本特性与作用机理 | 第11-12页 |
| ·锰过氧化物酶 | 第11-12页 |
| ·锰过氧化物酶活力测定 | 第12-13页 |
| ·愈创木酚法 | 第12页 |
| ·酚红法 | 第12页 |
| ·乳酸钠法 | 第12-13页 |
| ·锰过氧化物酶的研究现状 | 第13-20页 |
| ·锰过氧化物酶发酵条件的研究 | 第13页 |
| ·锰过氧化物酶的催化反应性能 | 第13-14页 |
| ·锰过氧化物酶的结构 | 第14-16页 |
| ·锰过氧化物酶的结构-功能研究 | 第16-18页 |
| ·锰过氧化物酶分子水平的研究 | 第18-20页 |
| ·本论文的立题依据及研究内容 | 第20-22页 |
| ·论文的立题依据 | 第20页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·材料 | 第22-27页 |
| ·菌种与质粒 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·工具酶、试剂盒及DNA Marker | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·溶液 | 第24-26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·接种用孢子悬液的制备 | 第27页 |
| ·菌种的液体培养方法 | 第27页 |
| ·酶活力的测定 | 第27页 |
| ·菌体干重的测量 | 第27页 |
| ·总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·RNA含量的测定 | 第28页 |
| ·反转录PCR | 第28-29页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第29-30页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第30页 |
| ·DNA片段回收 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒转化(CaCl_2法) | 第30-31页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第31页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第31-32页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·细菌总蛋白电泳 | 第32-33页 |
| ·DNA沉淀 | 第33-34页 |
| ·DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第34页 |
| ·DNA含量的测定 | 第34-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-51页 |
| ·黄孢原毛平革菌产锰过氧化物酶最适条件的确定 | 第35-43页 |
| ·黄孢原毛平革菌产锰过氧化物酶培养基的优化 | 第35-39页 |
| ·黄孢原毛平革菌产锰过氧化物酶发酵条件的优化 | 第39-43页 |
| ·锰过氧化物酶(MnP2)基因的克隆 | 第43-51页 |
| ·总RNA溶液浓度的测定和质量检测 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳图谱 | 第44-45页 |
| ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳图谱 | 第45页 |
| ·质粒pUC19酶切及结构 | 第45-46页 |
| ·PCR产物的克隆及筛选 | 第46-47页 |
| ·pUC19重组质粒的酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pUC19-nmp2的结构 | 第48页 |
| ·重组质粒pUC19-mnp2的酶切鉴定 | 第48-49页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外源蛋白的表达 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 4 结论 | 第51-53页 |
| 5 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |