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甜瓜幼果cDNA文库的构建、酸性转化酶基因的克隆及遗传转化

摘要第1-11页
Abstract第11-15页
英文缩略词第15-17页
第一章 文献综述第17-41页
 1 果实中糖的积累与糖代谢酶的研究第17-23页
 2 转化酶的结构、功能及在植物发育和蔗糖积累中的作用第23-28页
 3 甜瓜果实发育过程中糖分转化与酶活性变化的研究进展和展望第28-33页
 4 cDNA文库构建方法的进展第33-41页
第二章 甜瓜幼果cDNA文库的构建第41-60页
 1 材料和方法第41-52页
   ·实验材料第41-42页
   ·实验方法第42-52页
     ·甜瓜幼果总RNA的提取第42-43页
     ·cDNA的合成第43-46页
     ·连接第46-47页
     ·包装第47页
     ·文库滴度的测定第47-48页
     ·文库的检测第48页
     ·文库的扩增第48-49页
     ·扩增文库的滴度测定与保存第49页
     ·甜瓜酸性转化酶基因的初步筛选第49-52页
 2 结果与分析第52-57页
   ·总RNA的提取结果第52页
   ·cDNA的合成第52-53页
   ·双链cDNA的分级分离第53页
   ·文库的滴度第53-54页
   ·文库的检测结果第54-56页
   ·甜瓜酸性转化酶基因的初步筛选结果第56-57页
 3 讨论第57-60页
   ·提高RNA质量的措施第57-58页
   ·关于全长cDNA的克隆第58页
   ·SMART技术在甜瓜上的应用第58-60页
第三章 甜瓜果实酸性转化酶基因的克隆及反义表达载体的构建第60-83页
 1 材料和方法第60-71页
   ·实验材料第60-62页
   ·实验方法第62-71页
     ·甜瓜果实总RNA的提取第62页
     ·甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆第62-65页
     ·克隆cDNA片段的测序及序列分析第65页
     ·甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体的构建第65-71页
 2 结果与分析第71-80页
   ·总RNA的提取结果第71页
   ·甜瓜果实酸性转化酶cDNA片段的克隆第71-72页
   ·克隆cDNA片段的测序及序列分析第72-78页
   ·pROK2载体的构建结果第78-79页
   ·甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体Anti-MAl1的构建结果第79页
   ·甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体Anti-MAl2的构建结果第79-80页
 3 讨论第80-83页
   ·关于植物材料和总RNA的提取第80-81页
   ·关于酶切与连接第81页
   ·关于MAI cDNA片段的序列分析结果及其利用第81-82页
   ·关于反义技术在植物基因工程中的应用第82-83页
第四章 遗传转化第83-91页
 1 材料与方法第83-86页
   ·实验材料第83页
   ·实验方法第83-86页
     ·根癌农杆菌介导的Anti-MAll基因转化烟草的实验第83-86页
     ·甜瓜子叶再生系统的建立第86页
     ·农杆菌介导的Anti-MAl1及Anti-MAI2对甜瓜的转化第86页
 2 结果与讨论第86-91页
   ·氯化钙法将Anti-MAl1和Anti-MA12转入根癌农杆菌第86-87页
   ·转基因烟草植株的PCR和PCR-Southern检测第87页
   ·甜瓜子叶再生植株的获得第87-88页
   ·不同变种甜瓜在不同处理的培养基中的分化结果第88-89页
   ·农杆菌介导法转化甜瓜的初步结果第89页
   ·关于标记基因的切除第89-90页
   ·继续研究的设想第90-91页
结论第91-92页
参考文献第92-105页
致谢第105-106页
攻读学位期间发表的学术论文目录第106页

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