| 致谢 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 一 文献综述 | 第12-33页 |
| 1 盐害及植物抗盐性的生理机制 | 第12-15页 |
| ·渗透胁迫与细胞内的渗透压调节机制 | 第12-13页 |
| ·离子胁迫 | 第13-15页 |
| ·氧自由基及其衍生物的胁迫作用 | 第15页 |
| 2 植物盐诱导基因 | 第15-23页 |
| ·调渗蛋白(Osmotin,OSM) | 第16-19页 |
| ·脱落酸(ABA) | 第19-20页 |
| ·Lea蛋白合成基因 | 第20页 |
| ·多胺物质合成基因 | 第20-21页 |
| ·跨膜通道蛋白基因 | 第21页 |
| ·其他耐盐基因 | 第21-23页 |
| 3 DD RT-PCR | 第23-26页 |
| ·mRNA差别显示的原理 | 第24-25页 |
| ·mRNA差别显示实验的基本过程 | 第25页 |
| ·mRNA差别显示法的局限性 | 第25-26页 |
| 4 应用差异显示方法对小麦基因的研究进展 | 第26页 |
| 5 应用差异性显示方法对植物抗盐、抗旱相关序列的研究进展 | 第26-27页 |
| 6 小麦盐胁迫应答基因的研究状况 | 第27-28页 |
| 7 本研究中生物信息学的应用 | 第28-33页 |
| ·GeneBank序列数据库 | 第28页 |
| ·BLAST | 第28-29页 |
| ·核酸蛋白质序列分析软件 | 第29-33页 |
| ·核酸蛋白质序列分析软件的介绍 | 第29-30页 |
| ·开放阅读框分析 | 第30页 |
| ·多序列比对的实际应用 | 第30-33页 |
| 二 实验部分 | 第33-69页 |
| 前言 | 第33-34页 |
| 1 材料与方法 | 第34-45页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·载体、菌株与抗生素 | 第34-35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·总RNA的提取 | 第35-37页 |
| ·mRNA的分离 | 第37页 |
| ·RT-PCR和差异显示 | 第37-38页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第38-39页 |
| ·连接 | 第39-40页 |
| ·感受态细胞制备 | 第40页 |
| ·重组子转化E.coli DH5α | 第40-41页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·酶切鉴定 | 第42页 |
| ·Northern印迹分析 | 第42-45页 |
| ·探针制备 | 第42页 |
| ·探针有效性的检测 | 第42-44页 |
| ·杂交 | 第44页 |
| ·免疫检测 | 第44-45页 |
| ·序列测定与分析 | 第45页 |
| 2 结果与讨论 | 第45-67页 |
| ·总RNA的提取 | 第45-47页 |
| ·mRNA的差异显示与cDNA片段的PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·盐应答基因cDNA片段的克隆 | 第48-52页 |
| ·载体的选定 | 第48-50页 |
| ·重组克隆的获得 | 第50-52页 |
| ·重组克隆的酶切分析和Northern印迹检测 | 第52-54页 |
| ·序列分析 | 第54-66页 |
| ·WSR2 | 第54-60页 |
| ·WSR3 | 第60-62页 |
| ·WSR1 | 第62-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| 3 小结 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录: 实验中所用试剂的配制 | 第74-76页 |