| 致谢 | 第1-13页 |
| 中文摘要 | 第13-17页 |
| 序言 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-40页 |
| 1 弹性蛋白酶的分布 | 第20-21页 |
| 2 微生物弹性蛋白酶的研究概况 | 第21-23页 |
| 3 微生物弹性蛋白酶的酶学性质研究 | 第23-26页 |
| ·pH范围、等电点和温度 | 第23-24页 |
| ·酶降解底物的特异性 | 第24-26页 |
| ·激活剂、抑制剂 | 第26页 |
| 4 弹性蛋白酶的蛋白质结构和弹性蛋白酶的分泌 | 第26-30页 |
| ·弹性蛋白酶的一级结构和高级结构的研究 | 第26-28页 |
| ·微生物弹性蛋白酶的加工、分泌和调控 | 第28-30页 |
| 5 弹性蛋白酶解弹性蛋白的机理研究 | 第30-36页 |
| ·弹性蛋白的性质和结构 | 第30-31页 |
| ·弹性蛋白酶促降解的机制研究进展 | 第31-36页 |
| ·弹性蛋白酶促水解的早期研究概述 | 第31-33页 |
| ·弹性蛋白酶解机理研究的进展和存在问题 | 第33-36页 |
| 6 微生物弹性蛋白酶的应用 | 第36-38页 |
| ·医药产品的应用 | 第36页 |
| ·食品工业的应用 | 第36-37页 |
| ·日用化学工业的应用 | 第37-38页 |
| 7 利用微生物生产弹性蛋白酶的问题及前景 | 第38-40页 |
| 第二章 产弹性蛋白酶菌株的分离、选育及产酶特性研究 | 第40-53页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·培养方法 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| 2 结果和分析 | 第42-51页 |
| ·菌株筛选 | 第42-43页 |
| ·菌株鉴定 | 第43页 |
| ·Bacillus sp.EL3菌株产弹性蛋白酶条件的初步研究 | 第43-46页 |
| ·菌的诱变 | 第46-47页 |
| ·EL314CF10突变菌株产酶特性试验 | 第47-51页 |
| 3 讨论和小结 | 第51-53页 |
| 第三章 发酵培养基的优化研究 | 第53-77页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第53-54页 |
| ·培养基 | 第54页 |
| ·培养方法 | 第54页 |
| ·生物量的测定 | 第54页 |
| ·弹性蛋白酶活性测定方法 | 第54页 |
| ·实验设计 | 第54-55页 |
| 2 结果和分析 | 第55-74页 |
| ·种子培养基的优化研究 | 第55-58页 |
| ·发酵培养基的优化研究 | 第58-65页 |
| ·培养基的进一步优化研究 | 第65-70页 |
| ·无机离子对细胞生长和弹性蛋白酶分泌的影响 | 第70-71页 |
| ·表面活性剂及高分子聚合物对细胞生长和弹性蛋白酶合成的影响 | 第71-72页 |
| ·优化后的培养基发酵过程分析 | 第72-74页 |
| 3 讨论和小结 | 第74-77页 |
| 第四章 发酵条件优化研究及其生长特性分析 | 第77-96页 |
| 1 材料与方法 | 第77-78页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·培养基 | 第77-78页 |
| ·培养方法 | 第78页 |
| ·生物量的测定 | 第78页 |
| ·还原糖含量的测定方法 | 第78页 |
| ·蛋白质测定方法 | 第78页 |
| ·弹性蛋白酶活性测定方法 | 第78页 |
| ·实验设计 | 第78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-94页 |
| ·弹性蛋白酶发酵条件优化研究 | 第78-82页 |
| ·发酵条件对产酶与菌体生长的影响 | 第78-80页 |
| ·发酵时间与转速的优化研究 | 第80-82页 |
| ·发酵温度对弹性蛋白酶产生和菌体生长的影响 | 第82-86页 |
| ·不同发酵温度对细胞生长、弹性蛋白酶合成的影响 | 第82-84页 |
| ·不同温度对细胞比生长速率及其产率系数的影响 | 第84-85页 |
| ·不同温度下弹性蛋白酶比合成速率的变化 | 第85-86页 |
| ·诱导物添加对发酵产酶和细胞生长的影响 | 第86-89页 |
| ·发酵过程中细胞生长波动现象的探讨 | 第89-94页 |
| ·玉米提取物对细胞生长的影响 | 第89-90页 |
| ·不同浓度葡萄糖罐发酵的菌体波动生长现象的研究 | 第90-91页 |
| ·不同处理下发酵液的SDS-PAGE检测 | 第91-94页 |
| 3 讨论和小结 | 第94-96页 |
| 第五章 5-L罐分批发酵条件及发酵动力学研究 | 第96-112页 |
| 1 材料与方法 | 第96-97页 |
| ·供试菌株 | 第96-97页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第97页 |
| ·培养基与发酵条件 | 第97页 |
| ·分析测定方法 | 第97页 |
| 2 发酵动力学模型的建立 | 第97-100页 |
| ·细胞生长动力学模型 | 第97-98页 |
| ·产物生成速率模型 | 第98-99页 |
| ·底物消耗速率模型 | 第99-100页 |
| 3 结果与分析 | 第100-110页 |
| ·分批培养条件下菌体生长代谢及弹性蛋白酶分泌研究 | 第100-101页 |
| ·葡萄糖浓度对菌体生长和产酶的影响 | 第101-103页 |
| ·不同搅拌转速对菌体生长和产物合成的影响 | 第103-104页 |
| ·不同搅拌功率对发酵过程的影响 | 第104-106页 |
| ·动力学模型的建立及各参数的估计 | 第106-110页 |
| ·芽孢杆菌EL314CF10生长动力学 | 第106-108页 |
| ·弹性蛋白酶生成动力学 | 第108-109页 |
| ·葡萄糖消耗动力学 | 第109-110页 |
| ·模型适用性考察 | 第110页 |
| 4 讨论和小结 | 第110-112页 |
| 第六章 流加发酵策略 | 第112-125页 |
| 1 材料与方法 | 第112-113页 |
| ·供试菌株 | 第112页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第112页 |
| ·培养基与发酵条件 | 第112-113页 |
| ·分析测定方法 | 第113页 |
| 2 结果与分析 | 第113-123页 |
| ·摇瓶补料研究 | 第113-116页 |
| ·摇瓶补料与对照实验的比较 | 第113-115页 |
| ·不同浓度的补料液对发酵的影响 | 第115-116页 |
| ·葡萄糖流加发酵研究 | 第116-121页 |
| ·补料分批培养1 | 第116-117页 |
| ·补料分批培养2 | 第117-118页 |
| ·补料分批培养3 | 第118-119页 |
| ·补料分批培养4 | 第119-121页 |
| ·氮源流加与不同浓度氮源对菌株生长的影响 | 第121-123页 |
| ·不同浓度的氮源对细胞生长及弹性蛋白酶合成的影响 | 第121-122页 |
| ·氮源流加研究 | 第122-123页 |
| 3 讨论和小结 | 第123-125页 |
| 第七章 氧载体对细胞生长及弹性蛋白酶合成的影响 | 第125-144页 |
| 1 材料与方法 | 第126页 |
| 2 结果与分析 | 第126-142页 |
| ·表面活性剂及氧载体的筛选 | 第126-128页 |
| ·正十二烷和吐温80发酵过程的比较 | 第128-130页 |
| ·Tween-80添加策略的优化研究 | 第130页 |
| ·发酵罐间歇培养中Tween-80对发酵的影响 | 第130-133页 |
| ·发酵开始添加Tween-80对发酵的影响 | 第130-132页 |
| ·发酵12小时添加Tween-80对发酵的影响 | 第132-133页 |
| ·不同添加方式对发酵动力学模型的影响 | 第133-137页 |
| ·Tween-80在弹性蛋白酶发酵过程作用的探讨 | 第137-142页 |
| ·摇瓶实验研究Tween-80在氧气传递中的作用 | 第137-139页 |
| ·Tween-80在发酵过程中被降解利用 | 第139-140页 |
| ·Tween-80对细胞形态与胞外蛋白质分泌的影响 | 第140-142页 |
| 3 讨论和小结 | 第142-144页 |
| 第八章 粗料发酵培养基优化及罐发酵探讨 | 第144-157页 |
| 1 材料与方法 | 第144-146页 |
| ·材料 | 第144页 |
| ·培养基 | 第144-145页 |
| ·培养方法 | 第145页 |
| ·分析测定方法 | 第145页 |
| ·实验设计 | 第145-146页 |
| 2 结果与分析 | 第146-156页 |
| ·不同碳源对弹性蛋白酶合成的影响 | 第146页 |
| ·添加部分葡萄糖作为碳源对产酶的影响 | 第146-147页 |
| ·不同氮源对弹性蛋白酶产生的影响 | 第147-148页 |
| ·培养基主要成分的优化 | 第148-152页 |
| ·培养基主要影响因子的筛选 | 第148-150页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第150页 |
| ·响应面优化及分析 | 第150-152页 |
| ·优化后培养基的摇瓶发酵过程研究 | 第152-154页 |
| ·5-1发酵罐发酵过程分析 | 第154-156页 |
| 3 讨论和小结 | 第156-157页 |
| 第九章 弹性蛋白酶的纯化、酶学性质及酶促反应动力学 | 第157-175页 |
| 1 材料与方法 | 第157-159页 |
| ·材料 | 第157-158页 |
| ·培养基和培养方法 | 第158页 |
| ·弹性蛋白酶活性测定方法 | 第158页 |
| ·蛋白质含量测定方法 | 第158页 |
| ·分级盐析方法 | 第158页 |
| ·凝胶柱层析 | 第158页 |
| ·弹性蛋白酶酶学性质研究方法 | 第158页 |
| ·反相液相色谱法 | 第158页 |
| ·SDS-PAGE实验方法 | 第158-159页 |
| ·氨基酸成分分析 | 第159页 |
| ·双缩脲法 | 第159页 |
| ·弹性蛋白水解度的测定 | 第159页 |
| 2 结果与分析 | 第159-173页 |
| ·酶的纯化 | 第159-160页 |
| ·纯化酶的反相液相色谱分析 | 第160-161页 |
| ·分子量的测定 | 第161-162页 |
| ·弹性蛋白酶酶学性质分析 | 第162-168页 |
| ·酶的最适作用温度和热稳定性 | 第162-163页 |
| ·酶的最适作用pH和酸碱稳定性 | 第163-164页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第164-165页 |
| ·抑制剂和激活剂对酶活性的影响 | 第165-166页 |
| ·弹性蛋白酶的酶解动力学初步研究 | 第166-167页 |
| ·弹性蛋白酶的氨基酸组成分析 | 第167-168页 |
| ·弹性蛋白酶促水解的动力学探讨 | 第168-173页 |
| ·不同酶浓度对底物水解的影响 | 第168页 |
| ·不同浓度底物对弹性蛋白水解的影响 | 第168-170页 |
| ·不同pH下弹性蛋白水解速率的变化 | 第170-171页 |
| ·弹性蛋白酶促降解的动力学模型 | 第171-173页 |
| 3 讨论和小结 | 第173-175页 |
| 第十章 论文主要研究成果及后续研究设想 | 第175-177页 |
| 1 本论文的主要研究成果 | 第175页 |
| 2 后续研究展望 | 第175-177页 |
| 参考文献 | 第177-189页 |
| 英文摘要 | 第189-194页 |
| 个人简历及发表的主要论文 | 第194-195页 |
| 缩略词一览表 | 第195页 |
