| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 1 前言 | 第6-12页 |
| 1．1 环境中的重金属污染和微生物对重金属的抗性 | 第6-7页 |
| 1．1．1 环境中的重金属污染 | 第6页 |
| 1．1．2 环境中重金属污染的微生物处理 | 第6页 |
| 1．1．3 微生物对重金属的解毒机制 | 第6-7页 |
| 1．2 真核生物的金属硫蛋白 | 第7-12页 |
| 1．2．1 金属硫蛋白的理化特性 | 第8页 |
| 1．2．2 金属硫蛋白的结构 | 第8-9页 |
| 1．2．2．1 一级结构 | 第8-9页 |
| 1．2．2．2 空间结构和金属结合位点 | 第9页 |
| 1．2．3 MT的基因结构及其调控 | 第9-11页 |
| 1．2．4 金属硫蛋白的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1．2．4．1 参与微量元素的储存、运输和代谢 | 第11页 |
| 1．2．4．2 重金属解毒 | 第11页 |
| 1．2．4．3 拮抗电离辐射，清除羟基自由基 | 第11-12页 |
| 1．2．4．4 参与和发育过程中的调节，增强机体对各种应激的反应 | 第12页 |
| 1．2．4．5 参与生物体内多种生化反应过程 | 第12页 |
| 1．3 本研究的目的和意义 | 第12页 |
| 2 材料与方法 | 第12-17页 |
| 2．1 实验材料与仪器 | 第12-13页 |
| 2．1．1 实验菌株 | 第12页 |
| 2．1．2 培养基与缓冲溶液 | 第12-13页 |
| 2．1．3 实验仪器 | 第13页 |
| 2．2 实验方法 | 第13-17页 |
| 2．2．1 单倍体的分离和筛选 | 第13-14页 |
| 2．2．1．1 单倍体的分离 | 第13页 |
| 2．2．1．2 单倍体抗性水平检测及筛选 | 第13-14页 |
| 2．2．2 紫外线（UV）诱变 | 第14页 |
| 2．2．2．1 总菌数测定 | 第14页 |
| 2．2．2．2 紫外线诱变 | 第14页 |
| 2．2．2．3 液体抗性水平检测 | 第14页 |
| 2．2．3 亚硝基胍（NTG）诱变 | 第14-15页 |
| 2．2．3．1 菌悬液的制备和总菌数的测定 | 第14页 |
| 2．2．3．2 亚硝基胍（NTG）诱变 | 第14-15页 |
| 2．2．3．3 液体抗性水平检测 | 第15页 |
| 2．2．4 遗传稳定性检测 | 第15页 |
| 2．2．5 单倍体菌株Cu~（2+）诱导培养和无细胞抽提液的制备 | 第15页 |
| 2．2．6 细胞生长量的测定 | 第15页 |
| 2．2．7 Cu-MT含量的测定 | 第15页 |
| 2．2．8 金属硫蛋白的分离和纯化 | 第15-16页 |
| 2．8．8．1 SephadexG-50凝胶柱层析 | 第15-16页 |
| 2．8．8．2 DEAE-52离子交换层析 | 第16页 |
| 2．8．8．3 SephadexG-25凝胶柱脱盐 | 第16页 |
| 2．2．9 突变菌株生物学功能测定 | 第16-17页 |
| 2．2．9．1 拮抗紫外线辐射效应 | 第16页 |
| 2．2．9．2 拮抗~（60）Co辐射效应 | 第16页 |
| 2．2．9．3 消除·OH自由基能力测定 | 第16-17页 |
| 2．2．9．4 重金属解毒能力的测定 | 第17页 |
| 3 结果与分析 | 第17-39页 |
| 3．1 单倍体的分离与筛选 | 第17-19页 |
| 3．2 紫外线（UV）诱变 | 第19-24页 |
| 3．3 亚硝基胍（NTG）复合诱变 | 第24-26页 |
| 3．4 抗性突变株的遗传稳定性 | 第26-27页 |
| 3．5 酒精酵母单倍体菌株SY1-4及其突变株MT的含量 | 第27-28页 |
| 3．6 金属硫蛋白的分离与提纯 | 第28-30页 |
| 3．6．1 SephadexG-50凝胶柱层析 | 第28-29页 |
| 3．6．2 DEAE-52离子交换层析 | 第29页 |
| 3．6．3 SephadexG-25凝胶柱脱盐 | 第29-30页 |
| 3．7 突变株的生物学功能 | 第30-39页 |
| 3．7．1 MT产生菌的拮抗紫外线辐射效应 | 第30-33页 |
| 3．7．2 MT产生菌的拮抗~（60）Co辐射效应 | 第33-37页 |
| 3．7．3 清除·OH自由基能力比较 | 第37页 |
| 3．7．4 重金属解毒 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 4．1 关于清除环境中重金属污染的菌株的选 | 第39-40页 |
| 4．2 关于金属硫蛋白（MT）的分离纯化 | 第40页 |
| 4．3 尚待进一步开展的工作 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 英文摘要 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
