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人源性大肠癌自然致敏噬菌体Fab抗体库的构建与筛选

缩略词表第1-6页
主要名词解释第6-7页
中文摘要第7-11页
英文摘要第11-17页
前言第17-20页
材料与方法第20-37页
 一、 材料第20-23页
  (一) 主要材料第20-21页
  (二) 主要试剂及用液第21-22页
  (三) 主要仪器第22-23页
 二、 方法第23-37页
  (一) 组织总RNA的提取第23页
  (二) RT-PCR扩增重链和轻链基因片段第23-25页
  (三) 质粒pComb3的提取和感受态大肠杆菌的制备第25-26页
  (四) 重链Fd PCR产物重组入pComb3第26-28页
  (五) 噬菌体抗体Fab呈现库的构建第28-30页
  (六) 噬菌体Fab呈现原始库的鉴定第30-32页
  (七) Fab噬菌体原始库的富集与淘选第32-33页
  (八) 菌落的快速筛选和单菌落噬菌体抗体的制备第33页
  (九) Fab基因的序列分析第33-34页
  (十) 可溶性Fab段抗体的制备第34页
  (十一) 可溶性Fab段抗体的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第34-35页
  (十二) 可溶性Fab段抗体的亲和力测定第35页
  (十三) 可溶性Fab段抗体对大肠癌组织和细胞的靶向结合第35-37页
结果第37-54页
 一、 噬菌体抗体Fab呈现原始库的构建第37-41页
  (一) 组织总RNA的提取第37页
  (二) RT-PCR扩增抗体Fd和κ基因片段第37-38页
  (三) 重链Fd PCR产物重组入噬粒载体第38-39页
  (四) 噬菌体抗体Fab呈现原始库的构建第39-41页
 二、 噬菌体Fab呈现原始库的鉴定第41-42页
  (一) 点印记鉴定第41页
  (二) ELISA法鉴定第41-42页
 三、 Fab噬菌体抗体库的富集与淘选第42-43页
  (一) Fab噬菌体抗体库的富集第42-43页
  (二) 各级抗体库噬菌体上Fab呈现的鉴定第43页
 四、 单菌落噬菌体抗体的制备及鉴定第43-47页
  (一) 单菌落噬菌体抗体的制备第43-44页
  (二) 单菌落噬菌体抗体的鉴定第44-47页
 五、 可溶性Fab段抗体的制备与鉴定第47-54页
  (一) 可溶性Fab段抗体的制备第47-48页
  (二) 可溶性Fab段抗体的鉴定第48-54页
讨论第54-64页
总结第64-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页
综述第75-89页
攻读博士学位期间主要工作第89-91页

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