缩略词表 | 第1-6页 |
主要名词解释 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-11页 |
英文摘要 | 第11-17页 |
前言 | 第17-20页 |
材料与方法 | 第20-37页 |
一、 材料 | 第20-23页 |
(一) 主要材料 | 第20-21页 |
(二) 主要试剂及用液 | 第21-22页 |
(三) 主要仪器 | 第22-23页 |
二、 方法 | 第23-37页 |
(一) 组织总RNA的提取 | 第23页 |
(二) RT-PCR扩增重链和轻链基因片段 | 第23-25页 |
(三) 质粒pComb3的提取和感受态大肠杆菌的制备 | 第25-26页 |
(四) 重链Fd PCR产物重组入pComb3 | 第26-28页 |
(五) 噬菌体抗体Fab呈现库的构建 | 第28-30页 |
(六) 噬菌体Fab呈现原始库的鉴定 | 第30-32页 |
(七) Fab噬菌体原始库的富集与淘选 | 第32-33页 |
(八) 菌落的快速筛选和单菌落噬菌体抗体的制备 | 第33页 |
(九) Fab基因的序列分析 | 第33-34页 |
(十) 可溶性Fab段抗体的制备 | 第34页 |
(十一) 可溶性Fab段抗体的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-35页 |
(十二) 可溶性Fab段抗体的亲和力测定 | 第35页 |
(十三) 可溶性Fab段抗体对大肠癌组织和细胞的靶向结合 | 第35-37页 |
结果 | 第37-54页 |
一、 噬菌体抗体Fab呈现原始库的构建 | 第37-41页 |
(一) 组织总RNA的提取 | 第37页 |
(二) RT-PCR扩增抗体Fd和κ基因片段 | 第37-38页 |
(三) 重链Fd PCR产物重组入噬粒载体 | 第38-39页 |
(四) 噬菌体抗体Fab呈现原始库的构建 | 第39-41页 |
二、 噬菌体Fab呈现原始库的鉴定 | 第41-42页 |
(一) 点印记鉴定 | 第41页 |
(二) ELISA法鉴定 | 第41-42页 |
三、 Fab噬菌体抗体库的富集与淘选 | 第42-43页 |
(一) Fab噬菌体抗体库的富集 | 第42-43页 |
(二) 各级抗体库噬菌体上Fab呈现的鉴定 | 第43页 |
四、 单菌落噬菌体抗体的制备及鉴定 | 第43-47页 |
(一) 单菌落噬菌体抗体的制备 | 第43-44页 |
(二) 单菌落噬菌体抗体的鉴定 | 第44-47页 |
五、 可溶性Fab段抗体的制备与鉴定 | 第47-54页 |
(一) 可溶性Fab段抗体的制备 | 第47-48页 |
(二) 可溶性Fab段抗体的鉴定 | 第48-54页 |
讨论 | 第54-64页 |
总结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
综述 | 第75-89页 |
攻读博士学位期间主要工作 | 第89-91页 |