| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| ·研究背景 | 第11页 |
| ·国内外研究概况 | 第11-20页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的来源及获取的方法 | 第11-12页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的结构，性质及催化机理 | 第12-14页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的催化机理 | 第14页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶在食品工业上的应用 | 第14-17页 |
| ·微生物谷氨酰胺转胺酶产生菌和诱变育种 | 第17-18页 |
| ·微生物谷氨酰胺转胺酶基因克隆和表达研究进展 | 第18-20页 |
| ·立题的背景及意义 | 第20-21页 |
| ·课题研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 产谷氨酰胺转胺酶菌株H197 的初步鉴定研究 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·实验菌株 | 第22页 |
| ·普通培养基（鉴定培养基见附录B） | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·缓冲液及试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·形态学特征，培养特征和生理生化特性 | 第23-24页 |
| ·16S rDNA 序列分析 | 第24-27页 |
| ·构建系统发育树 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-34页 |
| ·形态学特征，培养特征和生理生化特性结果 | 第27-29页 |
| ·16S rDNA 序列结果 | 第29-31页 |
| ·构建系统发育树 | 第31-34页 |
| ·结论 | 第34-35页 |
| 第三章 产谷氨酰胺转胺酶菌株的诱变选育研究 | 第35-47页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·实验菌株 | 第35页 |
| ·主要培养基 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·诱变方法 | 第36-37页 |
| ·初筛方法 | 第37页 |
| ·复筛方法 | 第37页 |
| ·酶活的测定 | 第37-38页 |
| ·遗传稳定性实验 | 第38页 |
| ·CJ3033 菌株的MTG 基因的扩增和回收 | 第38页 |
| ·CJ3033 菌株的MTG 基因的测序 | 第38-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-45页 |
| ·培养基对菌株产孢能力的影响 | 第39页 |
| ·酶活测定的标准曲线绘制和酶活测定公式 | 第39页 |
| ·诱变路线及结果 | 第39-40页 |
| ·UV 处理时间对菌体生长的影响 | 第40-41页 |
| ·高产酶菌株的遗传稳定性 | 第41页 |
| ·高产酶菌株的菌种性能分析 | 第41-42页 |
| ·CJ3033 突变株MTG 基因及蛋白质序列分析 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·紫外诱变效果分析 | 第45页 |
| ·诱变剂量的选择 | 第45页 |
| ·选育过程分析 | 第45-46页 |
| ·筛选方法分析 | 第46页 |
| ·遗传稳定性实验 | 第46页 |
| ·结论 | 第46-47页 |
| 第四章 谷氨酰胺转胺酶基因克隆与载体构建初步研究 | 第47-57页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·菌株、质粒 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47-48页 |
| ·酶、化学试剂 | 第48页 |
| ·缓冲液的配制及抗生素的浓度 | 第48页 |
| ·PCR 扩增用的引物 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·总DNA 的提取及其检测 | 第48-49页 |
| ·MTG 目的基因的 PCR 扩增 | 第49页 |
| ·PCR 产物电泳检测及回收扩增的DNA 片段 | 第49页 |
| ·提取质粒DNA | 第49-50页 |
| ·MTG 基因片段和质粒的双酶切 | 第50页 |
| ·对双酶切产物进行回收 | 第50页 |
| ·将双酶切后的目的基因和质粒进行连接反应 | 第50页 |
| ·制备感受态细胞 | 第50-51页 |
| ·将重组质粒pET-28a 导入E.coli DH5α感受态细胞 | 第51页 |
| ·提取重组质粒：采用质粒的碱裂解小量提取法 | 第51页 |
| ·转化子的PCR 鉴定 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-55页 |
| ·基因组总DNA 提取结果 | 第51-52页 |
| ·H197 菌株的MTG 基因的基因克隆 | 第52-53页 |
| ·MTG 基因和pET-28a 载体分别双酶切回收后电泳检测 | 第53-55页 |
| ·转化子的PCR 鉴定 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 全文总结与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附录A：攻读硕士学位期间发表的文章 | 第67-68页 |
| 附录B：鉴定培养基的配方 | 第68页 |
