| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-27页 |
| ·果蔗育种与遗传转化的研究进展 | 第10-17页 |
| ·果蔗简介 | 第10页 |
| ·果蔗育种的研究 | 第10-14页 |
| ·转基因技术在果蔗中的应用 | 第14-17页 |
| ·植物广谱抗病基因工程与 Rar1 基因的研究 | 第17-21页 |
| ·植物抗病基因工程 | 第17-19页 |
| ·植物 Rar1 基因 | 第19-21页 |
| ·转基因沉默技术与反义 RNA 的研究 | 第21-24页 |
| ·转基因沉默技术 | 第21-22页 |
| ·反义 RNA 技术的原理与应用 | 第22-24页 |
| ·本研究的意义与技术路线 | 第24-27页 |
| ·意义 | 第24-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-40页 |
| ·材料与仪器 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·药品试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-40页 |
| ·果蔗 Rar1 基因片段的克隆 | 第28-33页 |
| ·反义载体的构建 | 第33-35页 |
| ·农杆菌介导法转化果蔗 | 第35-36页 |
| ·转基因植株的初步检测 | 第36-37页 |
| ·叶片接种病菌试验 | 第37页 |
| ·转基因植株的半定量 RT-PCR 分析 | 第37-38页 |
| ·抗病生理生化特性的检测 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-53页 |
| ·果蔗 Rar1 基因 cDNA 片段的克隆 | 第40-42页 |
| ·PCR 扩增 Rar1 片段 | 第40页 |
| ·测序结果与分析 | 第40-41页 |
| ·叶片总 RNA 的提取 | 第41页 |
| ·Rar1 基因 cDNA 片段的克隆 | 第41-42页 |
| ·反义载体构建 | 第42-43页 |
| ·连入中间载体顺反验证 | 第42页 |
| ·真核表达载体酶切 | 第42-43页 |
| ·果蔗愈伤组织培养 | 第43-44页 |
| ·农杆菌介导法转化果蔗 | 第44页 |
| ·转基因植株的检测 | 第44-46页 |
| ·标记基因检测 | 第44页 |
| ·Hyg 抗敏性试验 | 第44-46页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第46页 |
| ·病斑观察 | 第46-47页 |
| ·转基因植株的半定量 RT-PCR 分析 | 第47-49页 |
| ·循环数的确定 | 第47-48页 |
| ·半定量 RT-PCR 分析 | 第48-49页 |
| ·转基因植株抗性生理生化特性检测 | 第49-53页 |
| ·SOD 酶活力 | 第49-50页 |
| ·POD 酶活力 | 第50-51页 |
| ·MDA 含量 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| ·关于果蔗再生体系 | 第53页 |
| ·叶片 Hyg 抗敏性检测结果与 GUS 染色结果不完全一致的原因 | 第53页 |
| ·反义 RNA 技术的作用 | 第53-54页 |
| ·Rar1 基因对果蔗抗病性以及在生理学上的影响 | 第54页 |
| ·关于后续工作 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| ·获得了转反义 Rar1 的转基因果蔗植株 | 第55页 |
| ·对果蔗 Rar1 基因功能的推测 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录一：略缩词 | 第63-65页 |
| 附录二：试验部分试剂及其配制方法 | 第65-67页 |
| 附录三：MS 培养基配方 | 第67-68页 |
| 附录四：试验相关图片 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71页 |