| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 符号与缩略语说明 | 第6-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-26页 |
| ·结核概况 | 第11-16页 |
| ·结核杆菌的感染与免疫机理 | 第12-14页 |
| ·BCG与结核病 | 第14-16页 |
| ·结核病诊断学研究进展 | 第16-22页 |
| ·结核特异性诊断抗原 | 第22-25页 |
| ·本研究的内容、目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 利用E.coli表达系统制备rCFP10-ESAT6、rdESAT-6重组蛋白 | 第26-42页 |
| ·材料和方法 | 第27-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·酶、引物和血清 | 第27页 |
| ·试验试剂与仪器设备 | 第27页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白的表达、纯化及其抗原性分析 | 第28-33页 |
| ·lhp-esat6和2×esat-6融合基因的扩增 | 第28-30页 |
| ·lhp-esat6基因片段的扩增 | 第28-29页 |
| ·2×esat-6基因片段的扩增 | 第29-30页 |
| ·pET28a-lhp-esat6和pET28a-2×esat-6重组质粒的构建 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和SDS-PAGE分析 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白的纯化、透析及其抗原性分析 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-40页 |
| ·lhp-esat6和2×esat-6融合基因的获得 | 第33-35页 |
| ·pET28a-lhp-esat6和pET28a-2×esat-6重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE分析重组蛋白的诱导表达情况 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的纯化及其抗原性分析 | 第37-40页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白的免疫印迹鉴定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 利用M.smeg表达系统制备rCFP10-ESAT6、rdESAT-6重组蛋白 | 第42-56页 |
| ·材料和方法 | 第42-43页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·酶、引物和血清 | 第42页 |
| ·试验试剂与仪器设备 | 第42-43页 |
| ·M.smeg感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·重组蛋白的表达、纯化及其抗原性分析 | 第43-49页 |
| ·lhp-esat6和2×esat-6融合基因的扩增 | 第43-45页 |
| ·lhp-esat6基因片段的扩增 | 第44页 |
| ·2×esat-6基因片段的扩增 | 第44-45页 |
| ·pMF41-lhp-esat6和pMF41-rdesat-6重组质粒的构建 | 第45-47页 |
| ·pBluescript SK-lhp-esat6和pBluescript SK-2×esat6亚克隆 | 第45-46页 |
| ·pMF41-lhp-esat6和pMF41-2×esat6质粒的构建与转化 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和SDS-PAGE分析 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白的纯化、透析及其抗原性分析 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-55页 |
| ·lhp-esat6和2×esat-6融合基因的获得 | 第49-50页 |
| ·pMF41-lhp-esat6和pMF41-2×esat-6重组质粒的鉴定 | 第50-51页 |
| ·SDS-PAGE分析重组蛋白的诱导表达情况 | 第51-53页 |
| ·重组蛋白的纯化及其抗原性分析 | 第53-55页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第53-54页 |
| ·重组蛋白的抗原性分析 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 重组蛋白在结核病诊断中的初步应用 | 第56-65页 |
| ·材料与试剂 | 第56-57页 |
| ·临床血清样本 | 第56页 |
| ·检测试剂与材料 | 第56-57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·重组蛋白的应用诊断试验 | 第57-59页 |
| ·ELISA方法的建立 | 第57页 |
| ·重组蛋白刺激IFN-γ全血试验 | 第57-59页 |
| ·人外周血单个核细胞(PBMC)的分离 | 第57-58页 |
| ·淋巴细胞体外培养 | 第58页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测IFN-γ | 第58-59页 |
| ·重组蛋白诊断应用结果分析 | 第59-63页 |
| ·重组蛋白ELISA检测血清的特异性和敏感性 | 第59-62页 |
| ·重组蛋白刺激IFN-γ ELISA结果分析 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第76页 |
