| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 引言 | 第7-17页 |
| 1.大黄简介 | 第7-10页 |
| ·大黄的有效成分 | 第8-9页 |
| ·大黄有效成分的分离 | 第8-9页 |
| ·大黄有效成分的生物学效用 | 第9页 |
| ·大黄活性提取成分—大黄酸的抗癌机理研究进展 | 第9-10页 |
| 2.视黄醇X受体(Retinoic X receptor,RXR)简介 | 第10-15页 |
| ·RXR和癌症的关系 | 第12-15页 |
| 3.RXR在肺癌中的作用 | 第15-16页 |
| 4.大黄酸通过拮抗RXR来抑制癌细胞的增殖 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-28页 |
| 1.试验材料 | 第17-20页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·细胞 | 第17页 |
| ·质粒DNA,引物 | 第17页 |
| ·药物、各种酶类试剂盒和特殊进口试剂 | 第17-18页 |
| ·常用缓冲液及其他溶液 | 第18-20页 |
| ·质粒抽提 | 第18页 |
| ·DNA电泳 | 第18页 |
| ·蛋白质电泳分析 | 第18-19页 |
| ·MTT | 第19页 |
| ·转化 | 第19页 |
| ·免疫荧光 | 第19页 |
| ·CAT分析 | 第19页 |
| ·配体竞争性结合 | 第19-20页 |
| ·培养液和固体培养基 | 第20页 |
| ·培养基及相关试剂 | 第20页 |
| ·大肠杆菌的培养 | 第20页 |
| ·细胞培养液及相关试剂: | 第20页 |
| ·细胞的培养 | 第20页 |
| 2.试验方法 | 第20-28页 |
| ·生长抑制试验(MTT) | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第21页 |
| ·CaCl2感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·转化 | 第21页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第21-22页 |
| ·质粒DNA的大量抽提及纯化 | 第21-22页 |
| ·质粒DNA的小量抽提及纯化 | 第22页 |
| ·转染 | 第22-23页 |
| ·磷酸钙转染 | 第22-23页 |
| ·改良的高效磷酸钙转染 | 第23页 |
| ·脂质体转染 | 第23页 |
| ·细胞系的建立 | 第23-24页 |
| ·瞬时转染分析 | 第24-25页 |
| ·细胞裂解 | 第24页 |
| ·β-Galactosidase(β-半乳糖苷酶)分析 | 第24页 |
| ·CAT(氯霉素乙酰转移酶)活性检测 | 第24-25页 |
| ·DAPI染色 | 第25页 |
| ·免疫印迹(Western blot) | 第25-26页 |
| ·BIORAD分析做蛋白标准曲线 | 第26页 |
| ·抗体洗脱 | 第26页 |
| ·细胞冻存 | 第26页 |
| ·冻存细胞复苏 | 第26页 |
| ·GST-LBD的表达及纯化 | 第26-27页 |
| ·配体竞争性结合实验 | 第27-28页 |
| 结果 | 第28-37页 |
| 1.大黄酸抑制肺癌细胞A549的增殖并引起细胞凋亡 | 第28-29页 |
| ·大黄酸对A549细胞的生长抑制作用 | 第28页 |
| ·大黄酸能诱导A549细胞的凋亡 | 第28-29页 |
| 2.大黄酸可以竞争9-cis-RA和RXR结合 | 第29-30页 |
| ·-cis-RA可减轻大黄酸对A549的生长抑制 | 第30-31页 |
| 4.大黄酸可引起RXR的降解 | 第31-32页 |
| 5.大黄酸对细胞的生长抑制作用和细胞内RXR表达的关系 | 第32页 |
| 6.大黄酸可引起RXR的构型变化 | 第32-33页 |
| 7.大黄酸抑制RXR同源二聚体的转录激活 | 第33-34页 |
| 8.大黄酸抑制异源二聚体的转录激活 | 第34-37页 |
| ·大黄酸抑制RXR/TR3异源二聚体的转录激活 | 第34-35页 |
| ·大黄酸抑制RXR/RAR异源二聚体的转录激活 | 第35-37页 |
| 讨论与总结 | 第37-40页 |
| 1.讨论 | 第37-38页 |
| 2.总结 | 第38-40页 |
| 硕士研究生期间发表的论文 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
