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大豆疫霉转录因子PsCZF1、PsHSF1和PsMAD1的功能研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
引言第13-15页
上篇 文献综述第15-66页
 第一章 植物病原卵菌分子遗传学研究进展第16-44页
  摘要第16页
  ABSTRACT第16-17页
  1 卵菌的分类地位第17-18页
  2 植物病原卵菌的危害及其生活史第18-20页
  3 卵菌的遗传操作第20-29页
   ·稳定遗传转化系统第21-23页
   ·瞬时遗传转化系统第23-24页
   ·卵菌基因沉默现象的发现和应用第24-25页
   ·卵菌基因沉默机理的研究第25-27页
   ·卵菌基因沉默方法的优化第27-29页
   ·TILLING技术第29页
  4 卵菌组学的研究进展第29-33页
   ·卵菌基因组学第30-31页
   ·卵菌转录组学进展第31页
   ·卵菌蛋白质组学第31-33页
  参考文献第33-44页
 第二章 病原真菌和卵菌转录因子功能研究进展第44-66页
  摘要第44页
  ABSTRACT第44-45页
  1 转录因子概述第45-51页
   ·与DNA结合的转录因子家族第46-48页
   ·研究转录因子的方法第48-50页
   ·转录因子对基因表达的调控第50-51页
  2 转录因子在病原真菌生长发育和致病性中的功能研究第51-55页
   ·锌指类转录因子第52-53页
   ·螺旋-转角-螺旋类转录因子第53页
   ·螺旋-环-螺旋类转录因子第53页
   ·碱性亮氨酸拉链转录因子第53-54页
   ·其他家族转录因子的研究第54-55页
  3 转录因子在病原卵菌中的功能研究第55页
  参考文献第55-66页
下篇 研究内容第66-144页
 第一章 大豆疫霉C_2H_2锌指转录因子、热激转录因子和MADS-BOX转录因子的生物信息学分析第68-86页
  摘要第68页
  ABSTRACT第68-70页
  1 材料与方法第70-71页
   ·数据库信息第70-71页
   ·多重序列比对和系统发育分析第71页
  2 结果与分析第71-81页
   ·大豆疫霉菌三种转录因子序列的确定第71-72页
   ·大豆疫霉C_2H_2锌指转录因子第72-74页
   ·大豆疫霉热激转录因子第74-77页
   ·大豆疫霉MADS-box转录因子第77-81页
  3 讨论第81-82页
  参考文献第82-86页
 第二章 C_2H_2锌指转录因子PsCZF11参与调控大豆疫霉生长发育和致病性第86-110页
  摘要第86页
  ABSTRACT第86-88页
  1 材料与方法第88-93页
   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第88页
   ·大豆与大豆疫霉的互作早期(0-2 h)侵染菌丝的获得第88页
   ·半定量RT-PCR第88-89页
   ·质粒构建和大豆疫霉转化第89-90页
   ·PsCZF1沉默突变体的表型分析第90-91页
   ·Southern杂交第91-92页
   ·SYBR green实时定量RT-PCR分析第92页
   ·GUS的组织染色和观察第92页
   ·致病性测定第92-93页
  2 结果与分析第93-103页
   ·PsCZF1编码一个锌指蛋白转录因子第93-95页
   ·PsCZF1在卵孢子阶段特异表达第95页
   ·PsCZF1在侵染互作过程中上调表达第95-97页
   ·大豆疫霉PsCZF1沉默转化子的获得第97-99页
   ·PsCZF1沉默转化子的表型分析第99-103页
   ·PsCZF1沉默转化子对大豆丧失了致病性第103页
  3 讨论第103-105页
   ·PsCZF1代表一类新的C2H2锌指蛋白第103-104页
   ·PsCZF1的沉默对大豆疫霉生长发育的影响第104-105页
   ·PsCZF1是毒性必需的第105页
  参考文献第105-110页
 第三章 大豆疫霉热激转录因子PsHSF1参与应答氧化压力、热激反应胁迫和致病性第110-130页
  摘要第110页
  ABSTRACT第110-112页
  1 材料与方法第112-114页
   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第112页
   ·氧化压力条件下大豆疫霉菌丝的获得第112页
   ·半定量RT-PCR第112-113页
   ·质粒构建和大豆疫霉转化第113页
   ·基因沉默转化子的筛选第113页
   ·PsHSF1沉默突变体的表型分析第113-114页
   ·致病性测验第114页
  2 结果和分析第114-124页
   ·PsHSF1是大豆疫霉特异的转录因子第114-116页
   ·PsHSF1在休止胞及其萌发阶段特异表达并且受过氧化氢的诱导表达第116页
   ·大豆疫霉PsHSF1沉默转化子的获得第116-120页
   ·PsHSF1的沉默影响了大豆疫霉游动孢子的萌发第120-122页
   ·PsHSF1沉默突变体对过氧化氢和高温敏感第122页
   ·PsHSF1沉默突变体的致病性下降第122-124页
  3 讨论第124-127页
   ·PsHSF1作为热激转录因子参与了由H_2O_2介导的氧化压力第124-126页
   ·大豆疫霉致病性与早期活性氧进发第126-127页
  参考文献第127-130页
 第四章 大豆疫霉MADS-box转录因子的研究第130-144页
  摘要第130页
  ABSTRACT第130-132页
  1 材料与方法第132-133页
   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第132页
   ·大豆与大豆疫霉的互作早期(0-2 h)侵染菌丝的获得第132页
   ·半定量RT-PCR第132页
   ·质粒构建和大豆疫霉转化第132-133页
   ·GUS表达转化子的筛选第133页
   ·GUS的组织染色和观察第133页
  2 结果与分析第133-139页
   ·大豆疫霉MADS-box的序列分析第133页
   ·PsMAD1在大豆疫霉无性生活史中的表达第133-136页
   ·PsMAD1在侵染过程的表达第136-137页
   ·疫霉菌MADS-box编码基因启动子序列的分析第137-139页
  3 讨论第139-140页
  参考文献第140-144页
附录一 真菌锌指蛋白第144-151页
附录二 大豆疫霉C_2H_2锌指转录因子的种类第151-152页
附录三 大豆疫霉G蛋白偶联受体GPR11的功能研究第152-170页
攻读博士学位期间发表的研究论文第170-172页
致谢第172页

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