摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
引言 | 第13-15页 |
上篇 文献综述 | 第15-66页 |
第一章 植物病原卵菌分子遗传学研究进展 | 第16-44页 |
摘要 | 第16页 |
ABSTRACT | 第16-17页 |
1 卵菌的分类地位 | 第17-18页 |
2 植物病原卵菌的危害及其生活史 | 第18-20页 |
3 卵菌的遗传操作 | 第20-29页 |
·稳定遗传转化系统 | 第21-23页 |
·瞬时遗传转化系统 | 第23-24页 |
·卵菌基因沉默现象的发现和应用 | 第24-25页 |
·卵菌基因沉默机理的研究 | 第25-27页 |
·卵菌基因沉默方法的优化 | 第27-29页 |
·TILLING技术 | 第29页 |
4 卵菌组学的研究进展 | 第29-33页 |
·卵菌基因组学 | 第30-31页 |
·卵菌转录组学进展 | 第31页 |
·卵菌蛋白质组学 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-44页 |
第二章 病原真菌和卵菌转录因子功能研究进展 | 第44-66页 |
摘要 | 第44页 |
ABSTRACT | 第44-45页 |
1 转录因子概述 | 第45-51页 |
·与DNA结合的转录因子家族 | 第46-48页 |
·研究转录因子的方法 | 第48-50页 |
·转录因子对基因表达的调控 | 第50-51页 |
2 转录因子在病原真菌生长发育和致病性中的功能研究 | 第51-55页 |
·锌指类转录因子 | 第52-53页 |
·螺旋-转角-螺旋类转录因子 | 第53页 |
·螺旋-环-螺旋类转录因子 | 第53页 |
·碱性亮氨酸拉链转录因子 | 第53-54页 |
·其他家族转录因子的研究 | 第54-55页 |
3 转录因子在病原卵菌中的功能研究 | 第55页 |
参考文献 | 第55-66页 |
下篇 研究内容 | 第66-144页 |
第一章 大豆疫霉C_2H_2锌指转录因子、热激转录因子和MADS-BOX转录因子的生物信息学分析 | 第68-86页 |
摘要 | 第68页 |
ABSTRACT | 第68-70页 |
1 材料与方法 | 第70-71页 |
·数据库信息 | 第70-71页 |
·多重序列比对和系统发育分析 | 第71页 |
2 结果与分析 | 第71-81页 |
·大豆疫霉菌三种转录因子序列的确定 | 第71-72页 |
·大豆疫霉C_2H_2锌指转录因子 | 第72-74页 |
·大豆疫霉热激转录因子 | 第74-77页 |
·大豆疫霉MADS-box转录因子 | 第77-81页 |
3 讨论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-86页 |
第二章 C_2H_2锌指转录因子PsCZF11参与调控大豆疫霉生长发育和致病性 | 第86-110页 |
摘要 | 第86页 |
ABSTRACT | 第86-88页 |
1 材料与方法 | 第88-93页 |
·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得 | 第88页 |
·大豆与大豆疫霉的互作早期(0-2 h)侵染菌丝的获得 | 第88页 |
·半定量RT-PCR | 第88-89页 |
·质粒构建和大豆疫霉转化 | 第89-90页 |
·PsCZF1沉默突变体的表型分析 | 第90-91页 |
·Southern杂交 | 第91-92页 |
·SYBR green实时定量RT-PCR分析 | 第92页 |
·GUS的组织染色和观察 | 第92页 |
·致病性测定 | 第92-93页 |
2 结果与分析 | 第93-103页 |
·PsCZF1编码一个锌指蛋白转录因子 | 第93-95页 |
·PsCZF1在卵孢子阶段特异表达 | 第95页 |
·PsCZF1在侵染互作过程中上调表达 | 第95-97页 |
·大豆疫霉PsCZF1沉默转化子的获得 | 第97-99页 |
·PsCZF1沉默转化子的表型分析 | 第99-103页 |
·PsCZF1沉默转化子对大豆丧失了致病性 | 第103页 |
3 讨论 | 第103-105页 |
·PsCZF1代表一类新的C2H2锌指蛋白 | 第103-104页 |
·PsCZF1的沉默对大豆疫霉生长发育的影响 | 第104-105页 |
·PsCZF1是毒性必需的 | 第105页 |
参考文献 | 第105-110页 |
第三章 大豆疫霉热激转录因子PsHSF1参与应答氧化压力、热激反应胁迫和致病性 | 第110-130页 |
摘要 | 第110页 |
ABSTRACT | 第110-112页 |
1 材料与方法 | 第112-114页 |
·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得 | 第112页 |
·氧化压力条件下大豆疫霉菌丝的获得 | 第112页 |
·半定量RT-PCR | 第112-113页 |
·质粒构建和大豆疫霉转化 | 第113页 |
·基因沉默转化子的筛选 | 第113页 |
·PsHSF1沉默突变体的表型分析 | 第113-114页 |
·致病性测验 | 第114页 |
2 结果和分析 | 第114-124页 |
·PsHSF1是大豆疫霉特异的转录因子 | 第114-116页 |
·PsHSF1在休止胞及其萌发阶段特异表达并且受过氧化氢的诱导表达 | 第116页 |
·大豆疫霉PsHSF1沉默转化子的获得 | 第116-120页 |
·PsHSF1的沉默影响了大豆疫霉游动孢子的萌发 | 第120-122页 |
·PsHSF1沉默突变体对过氧化氢和高温敏感 | 第122页 |
·PsHSF1沉默突变体的致病性下降 | 第122-124页 |
3 讨论 | 第124-127页 |
·PsHSF1作为热激转录因子参与了由H_2O_2介导的氧化压力 | 第124-126页 |
·大豆疫霉致病性与早期活性氧进发 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-130页 |
第四章 大豆疫霉MADS-box转录因子的研究 | 第130-144页 |
摘要 | 第130页 |
ABSTRACT | 第130-132页 |
1 材料与方法 | 第132-133页 |
·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得 | 第132页 |
·大豆与大豆疫霉的互作早期(0-2 h)侵染菌丝的获得 | 第132页 |
·半定量RT-PCR | 第132页 |
·质粒构建和大豆疫霉转化 | 第132-133页 |
·GUS表达转化子的筛选 | 第133页 |
·GUS的组织染色和观察 | 第133页 |
2 结果与分析 | 第133-139页 |
·大豆疫霉MADS-box的序列分析 | 第133页 |
·PsMAD1在大豆疫霉无性生活史中的表达 | 第133-136页 |
·PsMAD1在侵染过程的表达 | 第136-137页 |
·疫霉菌MADS-box编码基因启动子序列的分析 | 第137-139页 |
3 讨论 | 第139-140页 |
参考文献 | 第140-144页 |
附录一 真菌锌指蛋白 | 第144-151页 |
附录二 大豆疫霉C_2H_2锌指转录因子的种类 | 第151-152页 |
附录三 大豆疫霉G蛋白偶联受体GPR11的功能研究 | 第152-170页 |
攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第170-172页 |
致谢 | 第172页 |